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.2001年3月1日;15(5):591-602.
doi:10.1101/gad.193701。

拟南芥Robertson突变转座子受染色质重塑基因DNA甲基化降低(DDM1)的调控

附属公司

拟南芥Robertson突变转座子受染色质重塑基因DNA甲基化降低(DDM1)的调控

T歌手等。 基因开发. .

摘要

玉米中的Robertson突变子转座元件经历了活性周期和无活性周期,这与胞嘧啶甲基化的变化有关。拟南芥基因组中存在突变体样元素,但高度甲基化且不活跃。这些元素在染色质重塑突变体ddm1(DNA甲基化减少)中脱甲基并具有活性,从而导致异色DNA甲基化的丧失。因此,植物中的DNA转座子似乎受到染色质重塑的调节。在近交ddm1菌株中,转座元件可能部分解释了与ddm1无关的突变表型。基因沉默和参数化也受DDM1调控,为表观遗传沉默与转座子调控相关的命题提供了支持。

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数字

图1
图1
分析突变体-具有长末端反向重复序列(TIR-MULE)的类元素拟南芥. (A类)基于末端反向重复序列(TIR)的22个TIR-MULE的无根距离树(表1A、B)。突变体-根据聚类分析,将具有TIR的相似元素(TIR-MULE)按相似性进行分组。转置的元素ddm1型菌株以红色突出显示(在Mu1)和紫色(在Mu6). 引导值显示在节点上。亚组IA和IB(黄色)和组II(绿色)包含转录于ddm1型突变体(见表2)。(B类)97-aa保守区的比对拟南芥玉米MURA蛋白的类MURA转座酶。相同的氨基酸以深灰色装箱,与浅灰色相似。PROSITE特征模式中的相同氨基酸显示在相应序列下面。(C类)转录元件的TIR序列的比对。相同的核苷酸以灰色方框显示(TIRA,5′TIR;TIRB,3′TIR)。
图1
图1
分析突变体-具有长末端反向重复序列(TIR-MULE)的类元素拟南芥. (A类)基于末端反向重复序列(TIR)的22个TIR-MULE的无根距离树(表1A、B)。突变体-根据聚类分析,将具有TIR的相似元素(TIR-MULE)按相似性进行分组。转置的元素ddm1型菌株以红色突出显示(在Mu1)和紫色(在Mu6). 引导值在节点处指示。亚组IA和IB(黄色)和组II(绿色)包含转录于ddm1型突变体(见表2)。(B类)97-aa保守区的比对拟南芥玉米MURA蛋白的类MURA转座酶。相同的氨基酸以深灰色装箱,与浅灰色相似。PROSITE特征模式中的相同氨基酸显示在相应序列下面。(C类)转录元件TIR序列的比对。相同的核苷酸以灰色方框显示(TIRA,5′TIR;TIRB,3′TIR)。
图1
图1
分析突变体-具有长末端反向重复序列(TIR-MULE)的类元素拟南芥. (A类)基于末端反向重复序列(TIR)的22个TIR-MULE的无根距离树(表1A、B)。突变体-根据聚类分析,将具有TIR的相似元素(TIR-MULE)按相似性进行分组。在中转置的元素ddm1型菌株以红色突出显示(在Mu1)和紫色(在Mu6). 引导值显示在节点上。亚组IA和IB(黄色)和组II(绿色)包含转录于ddm1型突变体(见表2)。(B类)一个97个氨基酸的保守区的比对拟南芥玉米MURA蛋白的类MURA转座酶。相同的氨基酸以深灰色装箱,与浅灰色相似。PROSITE特征模式中的相同氨基酸显示在相应序列下面。(C类)转录元件TIR序列的比对。相同的核苷酸以灰色方框显示(TIRA,5′TIR;TIRB,3′TIR)。
图2
图2
TIR-MULE转座子的基因组位置。哥伦比亚生态型中具有TIR的潜在完整元素显示在每条染色体的左侧。换位在Mu1中的元素ddm1型菌株如右图所示(表3)。显示了遗传标记和地图位置,以及着丝粒周围(浅灰色)和核仁(深灰色)异染色质。TIR-MULE子家族如图1A所示进行了彩色编码。
图3
图3
突变体转座子在拟南芥.DNA凝胶印迹分析拟南芥DNA来自(A类)野生型Landsberg直立人(拉丁美洲-)和哥伦比亚菌株(Col-0)以及(B类)野生型和ddm1型变异植物(哥伦比亚)生态RII公司,英国标准时间镍,血红蛋白二、 和Msp公司I.将印迹与来自在Mu1(图4A)。
图4
图4
突变体转座子在ddm1型突变体。(A类)在Mu1有295 bp TIR(灰盒),编码三个外显子;探针1和2如下所示。限制性酶位点血红蛋白II(Hp),Hin公司dIII(H),生态RI(R),以及生态RII(E)如图所示。(B类)混合野生型和ddm1型-突变体幼苗。DNA被消化生态RI与探针2杂交。新带(箭头)表示在Mu1。先前存在的元件T11I11.3、F21A20_a和T3F12.12由左边.车道上微弱的带状物12部分甲基化T3F12.12。车道1,兰茨伯格直立人(勒尔);车道2哥伦比亚野生型(Col-0);车道,哥伦比亚ddm1型; 车道4,兰茨伯格直立杆菌ddm1. (C类)哥伦比亚个体DNA凝胶印迹分析ddm1型植物使用Hin公司dIII和探头1。换位了新的条带(箭头)AtMu1型. (D类)RT-PCR分析(+)转录本使用在Mu1底漆(顶部面板)和对照RuBisCO底漆(底部面板)。交替通道(−)是在没有逆转录酶的情况下的模拟反应。RuBisCO车道12使用Col-0和Ler基因组DNA进行扩增。

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