Duplication and maintenance of heterochromatin domains

doi:10.1083/jcb.147.6.1153

.1999年12月13日；147(6):1153-66.

doi:10.1083/jcb.147.6.1153。

异染色质结构域的复制和维护

塔代伊¹, D罗氏, J B西巴里塔, B M特纳, G阿尔穆兹尼

附属公司

PMID： 10601331
预防性维修识别码：项目经理2168099
内政部： 10.1083/jcb.147.6.1153

异染色质结构域的复制和维护

塔代伊等。 J细胞生物学. 1999.

.1999年12月13日；147(6):1153-66.

doi:10.1083/jcb.147.6.1153。

作者

塔代伊¹, D罗氏, J B西巴里塔, B M特纳, G阿尔穆兹尼

附属

¹居里研究院研究部，UMR 144 et 218 du Centre National de la Recherche Scientifique（CNRS），75248 Paris cedex 05，France。

PMID： 10601331
预防性维修识别码：项目经理2168099
内政部： 10.1083/jcb.147.6.1153

摘要

为了研究确保异染色质区域维持的机制，我们利用了异染色质DNA簇在S期后期复制并在具有特征性核分布的离散病灶中处理的事实。在光学显微镜水平上，在这些实体中，我们跟踪了DNA合成、组蛋白H4乙酰化、异染色质蛋白1（Hp1α和β）和染色质组装因子1（CAF-1）。在复制过程中，Hp1α和β浓度域保持稳定，而异染色质区域在CAF-1和组蛋白H4的复制特异性乙酰化亚型（H4Ac 5和12）中富集。我们为保持这种状态定义了20分钟的时间窗口。此外，在复制过程中和复制后，用曲古菌素A（TSA）处理可以维持异染色质中的H4Ac 5和12状态，不包括H4Ac8和16。相比之下，相同水平的早期复制病灶在H4Ac 5和12中没有显示任何特定富集。这些数据强调了复制相关H4亚型异染色质的特殊重要性。我们认为异染色质的持续存在涉及自我维持因素，包括Hp1α和β的局部浓度，并且在CAF-1的辅助下，H4乙酰化/脱乙酰化的循环提供了一定程度的可塑性。

PubMed免责声明

数字

图1
在晚期复制病灶中可以发现富含Hp1α和-β的结构域。通过体内BrdU脉冲标记和免疫荧光（红色）检测，对小鼠（L929）和人类（HeLa）细胞异步群体中的DNA复制位点进行可视化。使用特定单克隆抗体（绿色）定位Hp1α和-β。DNA通过DAPI复染（蓝色）进行可视化。显示了具有早期（顶部）或晚期（底部）S期特征的复制灶模式的细胞图像。棒材，10μm。

图7
异染色质区域H4乙酰化的动力学受其DNA复制时间的限制。A、首先通过BrdU脉冲（红色）在体内标记HeLa细胞异步群体中的DNA合成位点，并在TSA（50ng/ml）存在或不存在的情况下追踪90分钟。使用特定的pAbs（K5、K8、K12和K16，绿色）定位H4的不同乙酰化亚型。B、非同步HeLa细胞群中的DNA合成位点首先在体内用BrdU脉冲（红色）标记，并追踪14小时，以允许脉冲期间标记的晚期复制细胞退出有丝分裂，然后在没有或存在TSA（50 ng/ml）的情况下长时间孵育90分钟。使用特定的pAbs（绿色）定位H4的不同乙酰化亚型。每种情况下都显示了与单个光学部分相对应的两个信号的数字合并。棒材，10μm。请注意，这些图像的处理方式不同，以便于可视化，因为所记录的强度相差很大+或-TSA。放大的插页（每个图像的左上角）对应于选定的焦距。

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[2] Aagaard L.、Laible G.、Selenko P.、Schmid M.、Dorn R.、Schotta G.、Kuhfittig S.、Wolf A.、Lebersorger A.、Singh P.B.果蝇PEV修饰物Su（var）3-9的功能哺乳动物同源物编码与异染色质组分M31复合的着丝粒相关蛋白。EMBO（Eur.Mol.Biol.Organ.）期刊，1999年；18:1923–1938.-项目管理咨询公司-公共医学

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[10] Braunstein M.，Sobel R.E.，Allis C.D.，Turner B.M.，Broach J.R.酿酒酵母高效转录沉默需要异染色质组蛋白乙酰化模式。分子细胞。《生物》，1996年；16:4349–4356.-项目管理咨询公司-公共医学

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