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.1999年4月2日;274(14):9277-82.
doi:10.1074/jbc.274.14.9277。

幽门螺杆菌空泡毒素最小细胞内空泡结构域的鉴定

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幽门螺杆菌空泡毒素最小细胞内空泡结构域的鉴定

D Ye公司等人。 生物化学杂志. .
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摘要

幽门螺杆菌分泌一种细胞毒素(VacA),诱导敏感哺乳动物细胞中晚期内吞小泡形成大液泡。尽管越来越多的证据表明VacA是一种A-B毒素,但尚未鉴定出不同的A和B片段。为了定位假定的催化A片段,我们用编码截短形式的VacA融合到绿色荧光蛋白的质粒转染HeLa细胞。通过分析截短的VacA片段的细胞内空泡化活性,我们将最小功能域减少为VacA的422个氨基酸末端残基,该残基不到全长蛋白质(953个氨基酸)的一半。VacA通常被分离为两个片段的蛋白水解缺口蛋白,这两个片段保持非共价结合并保持空泡化活性。蛋白质水解缺口VacA的氨基端311残基片段(p33)和羧基端642残基片段都不能自行诱导细胞空泡化。然而,用表达p33和p70的分离质粒联合转染HeLa细胞会导致细胞空泡化。进一步分析表明,仅包含残基312-478的最小片段在功能上补充了p33。总之,我们的结果提示了VacA的一种新的分子结构,即介导细胞内空泡化活性所需的刻痕毒素的两个片段的细胞溶质定位。

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