Sigma-2 Receptor Ligand Binding Modulates Association between TSPO and TMEM97

doi:10.3390/ijms24076381

.2023年3月28日；24(7):6381.

doi:10.3390/ijms24076381。

Sigma-2受体配体结合调节TSPO和TMEM97之间的关联

附属公司

¹澳大利亚新南威尔士州Wagga-Wagga市Charles Sturt大学牙科与医学科学学院2678。
²伊拉克巴格达10065，高等教育和科学研究部研发部。
^三巴西利卡塔大学科学系，Viale dell'Ateneo lucano 10，85100 Potenza，意大利。
⁴巴里大学药物科学系“ALDO MORO”，意大利巴里奥拉博纳4号，邮编：70125。
⁵澳大利亚新南威尔士州2650 Wagga Wagga Charles Sturt大学生命科学与健康学院。
⁶澳大利亚国立大学医学和心理学院，弗洛里大楼，54 Mills Road，Acton，ACT 2601，Australian National University。
⁷宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院放射科，费城，宾夕法尼亚州19104，美国。
⁸大韩民国Seongnam 13620，首尔国立大学医学院，首尔州立大学本当医院，核医学系。
⁹韩国水原市聚合技术高级研究所纳米分子成像和创新药物开发中心，邮编：16229。
¹⁰意大利巴里岛朱利奥·塞萨尔广场巴里大学医学院Jonica地区医学研究所（DIMePRe-J）。
¹¹奥地利维也纳1090年Borschkegasse 8a维也纳医科大学癌症研究中心和综合癌症中心。
¹²意大利巴里，70125，Via Amendola，Cristallografia，国家电力公司（CNR）。
¹³澳大利亚国立大学约翰·科廷医学研究院癌症生物学和治疗学系，澳大利亚堪培拉，ACT 2601，澳大利亚。

PMID： 37047353
预防性维修识别码：项目经理10093951
内政部： 10.3390/ijms24076381

Sigma-2受体配体结合调节TSPO和TMEM97之间的关联

巴沙尔·梅塞耶等。国际分子科学杂志. 2023.

.2023年3月28日；24(7):6381.

doi:10.3390/ijms24076381。

附属公司

¹澳大利亚新南威尔士州Wagga-Wagga市Charles Sturt大学牙科与医学科学学院2678。
²伊拉克巴格达10065，高等教育和科学研究部研发部。
^三意大利波坦萨市维亚尔·德尔阿泰内奥·卢卡诺10号巴西利卡塔大学科学系，邮编85100。
⁴巴里大学药物科学系“ALDO MORO”，意大利巴里奥拉博纳4号，邮编：70125。
⁵澳大利亚新南威尔士州2650 Wagga Wagga Charles Sturt大学生命科学与健康学院。
⁶澳大利亚国立大学医学和心理学院，弗洛里大楼，54 Mills Road，Acton，ACT 2601，Australian National University。
⁷宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院放射科，费城，宾夕法尼亚州19104，美国。
⁸大韩民国Seongnam 13620，首尔国立大学医学院，首尔州立大学本当医院，核医学系。
⁹韩国水原市聚合技术高级研究所纳米分子成像和创新药物开发中心，邮编：16229。
¹⁰意大利巴里岛朱利奥·塞萨尔广场巴里大学医学院Jonica地区医学研究所（DIMePRe-J）。
¹¹奥地利维也纳1090年Borschkegasse 8a维也纳医科大学癌症研究中心和综合癌症中心。
¹²意大利巴里，70125，Via Amendola，Cristallografia，国家电力公司（CNR）。
¹³澳大利亚国立大学约翰·科廷医学研究院癌症生物学和治疗学系，澳大利亚堪培拉，ACT 2601，澳大利亚。

PMID： 37047353
预防性维修识别码：项目经理10093951
内政部： 10.3390/ijms24076381

摘要

Sigma-2受体（S2R）是一个S2R配体结合位点，据报道历史上与21.5kDa蛋白相关，这些蛋白与多种疾病有关，如癌症、阿尔茨海默病和精神分裂症。S2R在各种肿瘤中高度表达，与恶性细胞的增殖状态相关。最近，S2R被报道为跨膜蛋白TMEM97。在此之前，我们一直在研究转位蛋白（TSPO）作为一种潜在的21.5kDa S2R候选蛋白与报道的血红素和甾醇的相关性。在这里，我们研究了TMEM97和TSPO对MCF7乳腺癌和MIA PaCa-2（MP）胰腺癌细胞S2R活性的作用。此外，还阐明了报告的S2R相互作用伙伴PGRMC1的作用。邻近连接分析和联合免疫沉淀显示S2R和TSPO之间存在功能关联。此外，在MP细胞中发现TMEM97和TSPO的紧密物理共定位。在MCF7细胞中，共聚焦显微镜实验进一步证实，共免疫沉淀仅与TMEM97发生，而与PGRMC1没有发生。TMEM97配体20的治疗-(S公司)-羟基胆固醇降低了MP细胞中免疫沉淀TSPO免疫颗粒中TMEM97和PGRMC1的共同免疫沉淀。据我们所知，这是TSPO和TMEM97之间可能受S2R配体影响的（功能）相互作用的第一个建议。

关键词：PGRMC1；Sigma-2受体；TMEM97；TSPO；蛋白质相互作用。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有利益冲突。

数字

图1
TMEM97和TSPO衰减均使S2R配体结合SW120减少。(A类)RT-PCR的基因表达显示MP细胞系中TMEM97 mRNA的衰减。siRNA（每次治疗10或50 nM）对TMEM97的敲除率超过80%(t吨-测试第页< 0.001). (B类)流式细胞术检测SW120与MP细胞的结合(n个= 6). 通过测量FITC信号（FL1）确定中值荧光强度（MFI）。使用Kaluza软件对数据进行分析。TMEM97（10 nM siRNA）的衰减导致SW120显著降低(t吨-测试第页< 0.0001). (C类)与打乱shRNA对照相比，TSPO shRNA敲除后通过Western blot检测TSPO表达水平。Western blot的图像如图S1E所示。用病毒颗粒转导后生成了六个独立的克隆，所有克隆均显示出与肌动蛋白标准化的可见衰减。实现了约70%的显著降低(t吨-测试第页< 0.00001). (D类)该图显示了shRNA击倒TSPO后SW120结合的流式细胞术评估。MP细胞与SKF-10047或DMSO孵育，作为阴性对照。将所有细胞与30 nM SW120在37°C的完整培养基中培养30分钟。SKF-10.047治疗对SW120结合没有显著影响（双向方差分析）。相反，TSPO的衰减导致SW120信号的显著降低（双向ANOVA第页<0.0001）。对每个细胞系进行了六次重复测试。

图2
TMEM97和TSPO的双敲除（DKO）在MP细胞中未产生进一步降低的SW120信号。图中显示了四种不同处理细胞系的第一种培养条件。这包括Scr对照细胞系、TSPO或TMEM97减毒水平的细胞，以及TSPO和TMEM97（DKO）减毒水平细胞。这些细胞在37°C下与SW120孵育30分钟。所有处理均与对照细胞显著不同（ANOVA、事后Tukey's HSD、，第页< 1 × 10⁻⁷). 右栏显示相同的情况，但在用SW120孵育之前，经过DTG或RHM-1处理。在37°C下，用补充有10 nM DTG或4 nM RHM-1的完整培养基培养细胞1小时。对于DTG处理的细胞（+DTG），DTG处理后的对照细胞在第页未处理对照细胞的<0.0001水平。所有DTG处理条件（shTSPO、si TMEM97和DKO）与DTG处理对照在第页<0.005级(t吨-仅在+DTG电池上测试）。所有经RHM1处理的细胞（+RHM-1）在第页<0.001级(t吨-仅对+RHM-1电池进行测试）。RHM-1和DTG处理的细胞在对照组、shTSPO、siTMEM97或DKO之间没有显著差异(t吨-对+DTG或+RHM-1处理的细胞进行测试）。

图3
TSPO与MP细胞中的SW120受体S2R共定位。左侧面板表示TMEM97（TMEM）和TSPO配对的PLA结果。在衰减TSPO后，观察到正信号与负信号的对比。右侧面板显示TMEM97+PGRMC1和PGRMC1+TSPO的两个负PLA信号。这些阴性观察结果类似于没有初级抗体的阴性对照。红色对应于第4.12节中描述的Duolink PLA反应放大的信号。蓝色代表DNA的DAPI染色。每个离散的蓝色斑块代表一个细胞核（放大20倍成像）。

图4
TSPO在MCF7细胞中仅与TMEM97共免疫沉淀，在MP细胞中与TMEM97-PGRMC1共免疫沉淀。用TSPO抗体免疫沉淀MCF7和shTMEM97MCF7细胞，并用抗TMEM97蛋白免疫印迹分析(A类)或抗PGRMC1(B类)抗体。shTMEM97MCF7细胞中的TMEM97蛋白水平相对于MCF7细胞中的蛋白被标准化。用TSPO抗体免疫沉淀MP细胞，并用抗TMEM97蛋白免疫印迹分析(C类)或抗PGRMC1(D类)抗体。IgG为阴性对照。Western blot分析用于评估TMEM97的蛋白质水平(E类)和PGRMC1(F类)在MCF7 MP电池中。在(E类,F类)蛋白质水平根据β-actin标准化。Western blotting数据是至少三个独立实验的代表。图形条用于表示平均值±SD（误差条）。使用Student’st吨-测试(*第页< 0.05, ***第页< 0.001).

图5
20S-OHC降低与TSPO共同免疫沉淀的TMEM97和PGRMC1水平。用20S-OHC处理MP细胞24小时，用TSPO抗体免疫沉淀，用抗TMEM97蛋白免疫印迹分析免疫颗粒(A类)或抗PGRMC1(B类)特异性抗体。IgG是抗TSPO实验治疗免疫沉淀的阴性对照。Western blotting数据是至少三个独立实验的代表。TMEM97型(A类)和PGRMC1(B类)20S-OHC处理细胞的蛋白质水平与未处理细胞（C）的蛋白质水平进行标准化，并在相应的图形栏中报告为平均值±SD（误差栏）。使用Student’st吨-测试(**第页< 0.01, ***第页< 0.001).

图6
草酸西拉米辛盐和FA10盐酸盐影响TSPO-TMEM97和TSPO-PGRMC1的相关性。用草酸西拉米辛盐（S）和FA10盐酸盐（F）处理MP细胞2h，用TSPO抗体免疫沉淀，用抗TMEM97蛋白免疫印迹分析(A类)或抗PGRMC1(B类)特异性抗体。IgG是TSPO抗体的阴性对照。Western blotting图描述了至少三个独立实验的结果。处理细胞中的TMEM97和PGRMC1蛋白水平与未处理细胞（C）中的蛋白进行了标准化，并在相应的图形栏（下面板）中报告为平均值±SD（误差栏）。采用单因素方差分析和Dunnett多重比较检验评估差异的统计显著性(**第页< 0.01).

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

Sigma-2受体和孕酮受体膜组件1是来自独立基因的不同结合位点。
Chu UB、Mavlyutov TA、Chu ML、Yang H、Schulman A、Mesangeau C、McCurdy CR、Guo LW、Ruoho AE。 Chu UB等人。 EBioMedicine公司。2015年10月19日；2(11):1806-13. doi:10.1016/j.ebiom.2015.10.107。eCollection 2015年11月。 EBioMedicine公司。2015 PMID：26870805 免费PMC文章。
S2R（Pgrmc1）：细胞色素相关的sigma-2受体，调节脂质和药物代谢及激素信号。
艾哈迈德IS、张伯伦C、克雷文RJ。艾哈迈德·IS等人。专家操作药物Metab Toxicol。2012年3月；8(3):361-70. doi:10.1517/17425255.2012.658367。Epub 2012年2月1日。专家操作药物Metab Toxicol。2012 PMID：22292588 审查。
Sigma-2受体/TMEM97和PGRMC-1通过形成三元复合物增加LDL受体内化LDL的速率。
Riad A、Zeng C、Weng CC、Winters H、Xu K、Makvandi M、Metz T、Carlin S、Mach RH。 Riad A等人。科学报告，2018年11月15日；8(1):16845. doi:10.1038/s41598-018-35430-3。 2018年科学报告。 PMID：30443021 免费PMC文章。
TMEM97和PGRMC1不介导sigma-2配体诱导的细胞死亡。
Zeng C、Weng CC、Schneider ME Jr、Puentes L、Riad A、Xu K、Makvandi M、Jin L、Hawkins WG、Mach RH。 Zeng C等人。细胞死亡发现。2019年1月28日；5:58. doi:10.1038/s41420-019-0141-2。2019年eCollection。细胞死亡发现。2019 PMID：30701090 免费PMC文章。
第四届σ-2受体国际研讨会论文集：在健康和疾病中的作用。
Izzo NJ、Colom-Cadena M、Riad AA、Xu J、Singh M、Abate C、Cahill MA、Spires-Jones TL、Bowen WD、Mach RH、Catalano SM。 Izzo NJ等人。电子神经。2020年11月4日；7（6）：ENEURO.0317-2020年20月20日。doi:10.1523/ENEURO.0317-2020。打印2020年11月/12月。电子神经。2020 PMID：33028631 免费PMC文章。审查。

查看所有类似文章

引用人

跨膜蛋白TMEM97和表观遗传读取器BAHCC1构成支持促炎细胞因子表达的轴。
Li J，Shen H，Guo LW。李杰等。细胞信号。2024年4月；116:111069. doi:10.1016/j.cellsig.2024.111069。Epub 2024年1月28日。细胞信号。2024 PMID：38290642
Sigma受体：铁/血红素平衡和铁下垂的新调节因子。
Nguyen NT、Jaramillo-Martinez V、Mathew M、Suresh VV、Sivaprakasam S、Bhutia YD、Ganapathy V。 Nguyen NT等人。国际分子科学杂志。2023年9月28日；24(19):14672. doi:10.3390/ijms241914672。国际分子科学杂志。2023 PMID：37834119 免费PMC文章。审查。
阿尔茨海默病中的西格玛受体：诊断和治疗的新潜在靶点。
王涛，贾赫。 Wang T等。国际分子科学杂志。2023年7月27日；24(15):12025. doi:10.3390/ijms241512025。国际分子科学杂志。2023 PMID：37569401 免费PMC文章。审查。

工具书类

1. Hornick J.R.、Spitzer D.、Goedegebuure P.、Mach R.H.、Hawkins W.G.利用sigma-2配体治疗胰腺癌。外科手术。2012;152:S152–S156。doi:10.1016/j.surg.2012.05.014。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
1. Mach R.H.、Smith C.R.、Al-Nabulsi I.、Whirrett B.R.、Childers S.R.、Wheeler K.T.Sigma 2受体作为乳腺癌增殖的潜在生物标记物。1997年癌症研究；57:156–161.-公共医学
1. Mach R.H.，Zeng C.，Hawkins W.G.西格马2受体：一种用于癌症成像和治疗的新型蛋白质。医学化学杂志。2013;56:7137–7160. doi:10.1021/jm301545c。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
1. Yi B.、Sahn J.J.、Ardestani P.M.、Evans A.K.、Scott L.L.、Chan J.Z.、Iyer S.、Crisp A.、Zuniga G.、Pierce J.T.等。sigma 2受体的小分子调节剂具有神经保护作用，可减少阿尔茨海默病实验模型中的认知缺陷和神经炎症。神经化学杂志。2017;140:561–575. doi:10.1111/jnc.13917。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
1. Blass B.E.、Rogers J.P.《西格玛-2（sigma-2）受体：2013–2018年最新专利申请综述》。专家。操作。疗法。拍打。2018;28:655–663. doi:10.1080/13543776.2018.1519024。-内政部-公共医学

赠款和资金

COST 17104/欧盟

LinkOut-更多资源

全文源

[1] Hornick J.R.、Spitzer D.、Goedegebuure P.、Mach R.H.、Hawkins W.G.利用sigma-2配体治疗胰腺癌。外科手术。2012;152:S152–S156。doi:10.1016/j.surg.2012.05.014。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[2] Hornick J.R.、Spitzer D.、Goedegebuure P.、Mach R.H.、Hawkins W.G.利用sigma-2配体治疗胰腺癌。外科手术。2012;152:S152–S156。doi:10.1016/j.surg.2012.05.014。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[3] Mach R.H.、Smith C.R.、Al-Nabulsi I.、Whirrett B.R.、Childers S.R.、Wheeler K.T.Sigma 2受体作为乳腺癌增殖的潜在生物标记物。1997年癌症研究；57:156–161.-公共医学

[4] Mach R.H.、Smith C.R.、Al-Nabulsi I.、Whirrett B.R.、Childers S.R.、Wheeler K.T.Sigma 2受体作为乳腺癌增殖的潜在生物标记物。1997年癌症研究；57:156–161.-公共医学

[5] Mach R.H.，Zeng C.，Hawkins W.G.西格马2受体：一种用于癌症成像和治疗的新型蛋白质。医学化学杂志。2013;56:7137–7160. doi:10.1021/jm301545c。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[6] Mach R.H.，Zeng C.，Hawkins W.G.西格马2受体：一种用于癌症成像和治疗的新型蛋白质。医学化学杂志。2013;56:7137–7160. doi:10.1021/jm301545c。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[7] Yi B.、Sahn J.J.、Ardestani P.M.、Evans A.K.、Scott L.L.、Chan J.Z.、Iyer S.、Crisp A.、Zuniga G.、Pierce J.T.等。sigma 2受体的小分子调节剂具有神经保护作用，可减少阿尔茨海默病实验模型中的认知缺陷和神经炎症。神经化学杂志。2017;140:561–575. doi:10.1111/jnc.13917。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[8] Yi B.、Sahn J.J.、Ardestani P.M.、Evans A.K.、Scott L.L.、Chan J.Z.、Iyer S.、Crisp A.、Zuniga G.、Pierce J.T.等。sigma 2受体的小分子调节剂具有神经保护作用，可减少阿尔茨海默病实验模型中的认知缺陷和神经炎症。神经化学杂志。2017;140:561–575. doi:10.1111/jnc.13917。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[9] Blass B.E.、Rogers J.P.《西格玛-2（sigma-2）受体：2013–2018年最新专利申请综述》。专家。操作。疗法。拍打。2018;28:655–663. doi:10.1080/13543776.2018.1519024。-内政部-公共医学

[10] Blass B.E.、Rogers J.P.《西格玛-2（sigma-2）受体：2013–2018年最新专利申请综述》。专家。操作。疗法。拍打。2018;28:655–663. doi:10.1080/13543776.2018.1519024。-内政部-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

Sigma-2受体配体结合调节TSPO和TMEM97之间的关联

附属公司

Sigma-2受体配体结合调节TSPO和TMEM97之间的关联

作者

附属公司

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

工具书类

MeSH术语

物质

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

工具书类

MeSH术语

物质

相关信息

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源