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比较研究
.2016年12月；1860(12):2782-92.
doi:10.1016/j.bbagen.2016.05.020。 Epub 2016年5月18日。

PM1诱导的氧化应激对肺泡Ⅱ型上皮细胞MLE-12自噬和表面活性蛋白B、C表达影响的比较研究

如白 1, 龙飞关 1, 张伟（音译） 1, 徐金霞 1, 魏瑞 1, 张芳（Fang Zhang） 2, 丁文军 三
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比较研究

PM1诱导的氧化应激对肺泡Ⅱ型上皮细胞MLE-12自噬和表面活性蛋白B、C表达影响的比较研究

如白等。 Biochim生物物理学报. 2016年12月.

摘要

背景：较小的空气污染颗粒物与一系列严重的健康状况之间有着密切的联系。因此，有必要了解空气动力学直径<1μm（PM1）的空气细颗粒物（PM）对肺泡上皮细胞的影响。在本研究中，使用小鼠肺上皮II型细胞MLE-12细胞检测暴露于从城市和钢铁厂采集的不同浓度PM1（以下分别称为uPM1和sPM1）后的细胞内氧化反应和表面活性蛋白表达。

方法：利用扫描电子显微镜和透射电子显微镜对PM1进行了物理化学表征。采用综合方法评价不同浓度PM1对MLE-12细胞的细胞毒性和自噬作用。通过蛋白质印迹法测定表面活性剂蛋白B和C在MLE-12细胞中的表达。

结果：与未暴露细胞相比，暴露细胞中的细胞活力显著下降，乳酸脱氢酶（LDH）释放增加，这与时间和浓度有关，证明了所有经测试的PM1诱导的细胞毒性。细胞间活性氧（ROS）生成增加，超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性降低的模式也类似。微管相关蛋白轻链-3（LC3）点增加、LC3II积累和beclin1水平增加证明了PM1诱导的自噬。Western blotting数据显示表面活性蛋白B和C的表达显著降低。相对较高浓度的过渡金属，包括铁、铜和锰，可能是sPM1比uPM1毒性更高的原因。此外，用N-乙酰半胱氨酸（NAC）或Chelex（一种金属螯合剂，可从PM1中去除大量金属）预处理可阻止PM1诱导的ROS生成和自噬增加，并下调表面活性蛋白B和C的表达。

结论：PM1，尤其是含有高浓度过渡金属（如铁、铜和锰）的PM1，可诱导氧化损伤和自噬，并抑制肺泡II型上皮细胞中表面活性蛋白B和C的表达。

一般意义：这项研究将有助于了解PM1对肺泡II型上皮细胞毒理作用的机制。本文是丁文军、安德鲁·吉奥和吴卫东主编的《空气污染》专刊的一部分。

关键词：肺泡上皮细胞；自噬；PM（1）；活性氧；表面活性剂蛋白B/C。

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