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.2014年1月;11(1):63-5.
doi:10.1038/nmeth.2727。 Epub 2013年11月10日。

量化低温电子显微镜密度图的局部分辨率

附属公司

量化低温电子显微镜密度图的局部分辨率

阿尔普·库库克尔比尔等。 Nat方法. 2014年1月.

摘要

我们提出了使用局部正弦特征的三维电子冷冻显微镜(cryo-EM)密度图局部分辨率的定义。我们的算法没有自由参数,适用于其他成像方式,包括层析成像。通过评估四个示例数据集的单粒子重建的局部分辨率和子谱平均值,我们报告了4到40奥范围内的可变分辨率。

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图1
图1
本地分辨率。(a)ResMap算法。波长λ被初始化为体素间距的两倍。似然比测试决定了在每个体素中是否可以检测到局部类星体模型。通过测试的体素会受到错误发现的控制。增加后,将再次测试未通过测试的体素λ(在线方法)。(b)类余弦和正弦H2函数沿轴定向。白色和黑色分别表示阴性和阳性部分(补充注释1)。(c)左侧,使用体素间距1º切片噪声模拟密度贴图。右侧,径向图。ResMap-H2分辨率估计值显示,随着模拟信号变得更加精细变化,分辨率稳步提高。底部,对应于1的结果/(f)噪声显示对非白噪声的鲁棒性(补充图1)。
图2
图2
使用实验密度图的ResMap-H2结果。颜色条同时应用于卷和切片。使用UCSF Chimera渲染3D可视化效果。彩色条中的白色虚线表示原始出版物中的FSC 0.143和0.5阈值。(a)80S核糖体(EMD-2275)。ResMap-H2结果表明,40S亚单位内和颗粒边缘附近的分辨率降低。(b)杜兰病毒(EMD-5529)。ResMap估计凸出域中的分辨率较低,而外壳看起来分辨率很高。(c)亚谱图GroEL(EMD-2221的非截短版本)。ResMap-H2结果显示具有不同分辨率水平的α螺旋(补充图1)。(d)亚谱图ATP合成酶二聚体(EMD-2161的非截短版本)。ResMap显示中心二聚体的分辨率高于相邻二聚体和膜。

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