Phosphoproteome analysis of functional mitochondria isolated from resting human muscle reveals extensive phosphorylation of inner membrane protein complexes and enzymes

doi:10.1074/mcp.M110.000299

.2011年1月；10（1）：M110.000299。

doi:10.1074/mcp。M110.000299。 Epub 2010年9月10日。

从静止人体肌肉中分离的功能线粒体的磷蛋白组分析揭示了内膜蛋白复合物和酶的广泛磷酸化

赵晓璐¹, 伊莱娜·勒昂, 斯特芬·贝克, 马丁·莫根森, Krzysztof Wrzesinski先生, 库尔特·霍伊隆德, 奥勒·诺雷加德·延森

附属公司

PMID： 20833797
预防性维修识别码：项目经理2013442
内政部： 10.1074/mcp。2009年1月10日

从静止人体肌肉中分离的功能线粒体的磷蛋白组分析揭示了内膜蛋白复合物和酶的广泛磷酸化

赵晓璐等。分子细胞蛋白质组学. 2011年1月.

.2011年1月；10（1）：M110.000299。

doi:10.1074/mcp。M110.000299。 Epub 2010年9月10日。

作者

赵小璐¹, 伊莱娜·勒昂, 斯特芬·贝克, 马丁·莫根森, Krzysztof Wrzesinski先生, 库尔特·霍伊隆德, 奥勒·诺雷加德·延森

附属

¹丹麦南部大学生物化学和分子生物学系，DK-5230 Odense M，Denmark。

PMID： 20833797
预防性维修识别码：项目经理2013442
内政部： 10.1074/mcp。M10.00299号

摘要

线粒体在能量代谢和细胞生存中起着重要作用，因此线粒体功能障碍与许多人类疾病相关。可逆蛋白磷酸化是调节几个线粒体过程的核心机制。在骨骼肌中，线粒体功能障碍与肥胖和2型糖尿病患者的胰岛素抵抗有关。我们对从人类肌肉活检中分离出的功能线粒体进行了磷酸蛋白质组学研究，目的是获得线粒体磷酸蛋白质的全面概述。将有效的线粒体分离方案与几种不同的磷酸肽富集技术和LC-MS/MS相结合，我们在77个线粒体磷酸蛋白中鉴定出155个不同的磷酸化位点，包括116个磷酸丝氨酸、23个磷酸苏氨酸和16个磷酸酪氨酸残基。磷酸酪氨酸残基的数量相对较高，这表明酪氨酸磷酸化在线粒体信号传导中发挥着重要作用。许多线粒体磷酸蛋白参与氧化磷酸化、三羧酸循环和脂质代谢，即与胰岛素抵抗有关的过程。我们还指定了参与氨基酸降解、转运蛋白和转运蛋白、钙稳态和凋亡的线粒体蛋白质中的磷酸化位点。激酶基序的生物信息学分析表明，许多线粒体磷酸蛋白是蛋白激酶A、蛋白激酶C、酪蛋白激酶II和依赖DNA的蛋白激酶的底物。我们的结果证明了对人体组织中分离的细胞器进行磷酸化蛋白质组分析的可行性，并为线粒体可逆磷酸化的功能研究提供了新的靶点。未来对健康和患病个体线粒体的比较磷酸蛋白质组分析将为异常磷酸化在2型糖尿病等病理学中的作用提供见解。

PubMed免责声明

数字

**图2。**
**确定的非冗余线粒体磷酸肽的文氏图(A类)和不同的磷酸化位点(B类)来自五名受试者的四种不同的磷酸肽富集方法。** b条，批处理模式；米，微列模式。

**图3。**
**通过四种不同的磷酸肽富集方法指示不同鉴定的多重磷酸化线粒体蛋白的实例。**

**图5。**
**线粒体呼吸链和TCA循环示意图，并确定了参与这两个过程的磷酸蛋白。**“●”表示特定位点磷酸化的数量。

**图6。**
**通过NetworKIN预测所有确定的不同磷酸化位点的激酶家族。** *CKI公司*酪蛋白激酶I；*表皮生长因子受体*，EGF受体。

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