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.2004年3月5日;279(10):9625-33.
doi:10.1074/jbc。M311933200。 Epub 2003年12月11日。

哺乳动物细胞中Cdt1与微小染色体维持蛋白和Cdc6的调节关联

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哺乳动物细胞中Cdt1与微小染色体维持蛋白和Cdc6的调节关联

珍妮特·戈文(Jeanette Gowen Cook)等。 生物化学杂志. .
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摘要

染色体DNA复制需要通过Cdc6和Cdt1的作用将六亚单位微染色体维持复合体募集到染色质中。尽管已有大量工作描述了Cdc6和Cdt1在酵母和生物化学系统中的功能,但有证据表明它们的哺乳动物对应物受到不同的调控,这表明需要进一步探索涉及Cdc6与Cdt1的分子关系。在这里,我们证明了Cdc6和Cdt1在将Mcm复合物装载到哺乳动物细胞染色质上时相互依赖。Cdt1与Mcm2的关联受细胞生长调节。由静止细胞制备的Mcm2与Cdt1结合很弱,而由血清刺激细胞制备出的Mcm2则与Cdtl结合更有效。Cdc6通常随着细胞从静止状态进入G(1)而积累,当在静止细胞中体外表达时,它能够诱导Mcm2与Cdt1的结合。我们进一步证明,Cdc6通过其N端非催化结构域与Cdt1物理结合,我们之前已经证明该区域对Cdc6功能至关重要。双生蛋白抑制了Cdt1的活性,我们提供了证据表明,这种抑制的机制包括阻断Cdt1与Mcm2和Cdc6的结合。这些结果确定了Cdc6和双生素在控制Cdt1与复制装置其他成分的结合方面的新分子功能,并表明随着细胞退出和重新进入细胞周期,Cdt1和Mcm复合体的结合受到控制。

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