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.2002年2月；160(2):621-30.
doi:10.1016/s0002-9440（10）64882-1。

β1和β2整合素介导巨噬细胞融合和多核异物巨细胞形成过程中的粘附

艾米·麦克纳利 1, 詹姆斯·安德森
附属公司

β1和β2整合素在巨噬细胞融合和多核异物巨细胞形成过程中介导粘附

艾米·麦克纳利等。 美国病理学杂志. 2002年2月.

摘要

采用白细胞介素（IL）-4诱导的人单核巨噬细胞体外融合系统，研究支持多核异物巨细胞（FBGC）形成的细胞/基质粘附机制。单核细胞培养3天，第7天加入IL-4诱导巨噬细胞融合和FBGC形成。功能定义的抗整合素抗体表明，最初的单核细胞粘附是由β2整合素介导的，而在IL-4诱导巨噬细胞融合的过程中，对β1整合素的额外依赖性被获得。抗β1抗体和抗β2抗体的联合使用最为有效，将巨噬细胞/FBGC粘附降低至对照组的10%。与整合素介导的信号传导一致，酪氨酸激酶抑制剂染料木素和磷脂酰肌醇-3-激酶抑制剂沃特曼和LY294002也能减弱巨噬细胞/FBGC粘附。共聚焦显微镜分析显示，β2整合素在初始粘附后存在于单核细胞上，并在融合巨噬细胞（尤其是外周细胞区域）和FBGC上强烈表达。相反，β1整合素在单核细胞上未检测到，但在巨噬细胞发育过程中开始出现，并在融合巨噬细胞和FBGC上强烈表达。这些结果首次证明了IL-4诱导β1和β2整合素在细胞/底物粘附相互作用中获得合作，这是多核FBGC形成所必需的。

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数字

图1。
图1。
EDTA或EGTA及各种非整合素受体抑制剂对初始单核细胞粘附的影响(A类)巨噬细胞/FBGC粘附(B类). 使用材料和方法中所述的指示抑制剂处理新分离的单核细胞或巨噬细胞/FBGC（第3天到第7天）。结果表示为未经处理的对照细胞的粘附百分比，n个=3名单核细胞捐赠者。发件人左边到正确的：EDTA，10 mmol/L；EGTA，10 mmol/L；肝素，2μmol/L；硫酸葡聚糖，25μg/ml；脂多糖（LPS），50μg/ml；硫酸软骨素A（CS-A），1 mg/ml；硫酸软骨素B（CS-B），1 mg/ml。
图2。
图2。
可溶性纤维连接蛋白或其蛋白水解片段对单核细胞初始粘附的影响(A类)巨噬细胞/FBGC粘附(B类). 用0.05 mg/ml的剂量处理新鲜分离的单核细胞或巨噬细胞/FBGC（第3天到第7天(实心钢筋)，0.1毫克/毫升(阴影条)，或0.25毫克/毫升(开放式酒吧)材料和方法中所述的纯化血浆纤维连接蛋白（FN）、120-kd FN片段、40-kd的FN片段或人血清白蛋白。结果表示为未经处理的对照细胞的粘附百分比，n个=3名单核细胞捐赠者。
图3。
图3。
抗整合素抗体对单核细胞初始粘附的影响(A类)或巨噬细胞/FBGC粘附(B类). 按照材料和方法中的描述，分别或以各种组合或非特异性对照IgG，用50μg/ml的所示抗整合素抗体（b1，β1；b2，β2；b3，β3；aM，αM）处理新分离的单核细胞或巨噬细胞/FBGC（第3天到第7天）。结果表示为未经处理的对照细胞的粘附百分比，n个=3名单核细胞捐赠者。
图4。
图4。
整合素介导的细胞信号传导抑制剂的作用。增加酪氨酸激酶抑制剂金雀异黄素的浓度(A类)或磷脂酰肌醇-3-激酶抑制剂LY294002(B类)和沃特曼(C类)如材料和方法中所述，在诱导巨噬细胞融合/FBGC形成期间（第3天至第7天）添加。结果表示为未经处理的对照细胞的粘附百分比，n个=3名单核细胞捐赠者。
图5。
图5。
单核细胞或单核细胞衍生巨噬细胞上整合素的表达。最初粘附1.5小时后，分析单核细胞上整合素的表达(A类,B类，以及C类)或在第三天的文化(D类,E类，以及F类). 用小鼠单克隆抗整合素检测抗体对渗透细胞进行染色（表1）▶ 和与Cy-5结合的抗鼠IgG。A类和D类β1整合素；B类和E类β2整合素；和C类和F类β3整合素。典型图像为细胞/基质界面处的单个2μm切片。比例尺，50μm。
图6。
图6。
整合素在融合巨噬细胞/FBGCs上的表达。A类β1整合素；B类β2整合素；和C类β3整合素。IL-4诱导巨噬细胞融合后第7天，细胞固定并渗透。然后用小鼠单克隆抗整合素检测抗体对融合巨噬细胞/FBGC进行染色（表1）▶ 然后是与Cy-5（绿色，整合素）、罗丹明-指骨样蛋白（红色，F-actin）和YO-YO-1（蓝色，细胞核）结合的抗鼠IgG混合物。合并的Z系列图像显示了具有代表性的显微照片。比例尺，50μm。
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