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.2001年8月31日;276(35):32971-6。
doi:10.1074/jbc。M105412200。 Epub 2001年6月18日。

PRMT5(Janus激酶结合蛋白1)催化蛋白质中对称二甲基精氨酸残基的形成

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PRMT5(Janus激酶结合蛋白1)催化蛋白质中对称二甲基精氨酸残基的形成

T L布兰斯科姆等。 生物化学杂志. .
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摘要

我们已经鉴定出一种新的哺乳动物蛋白精氨酸N-甲基转移酶,即PRMT5,它以前被称为Janus激酶结合蛋白1,能够催化多种蛋白质中形成ω-N(G)-单甲基精氨酸和对称ω-N-(G),N(G’)-二甲基精氨碱。从人HeLa细胞纯化的血凝素肽标记的PRMT5复合物对髓磷脂碱性蛋白的S-腺苷-l-[甲基-(3)H]蛋氨酸依赖性体外甲基化进行催化。当放射性标记的髓鞘碱性蛋白被酸水解成游离氨基酸,并通过高分辨率阳离子交换色谱分离产物时,我们能够检测到两种氚化物种。一个物种与omega-N(G)-单甲基精氨酸标准物共迁移,另一个物种则与对称的omega-N-(G),N(G’)-二甲基精氨碱标准物共色谱。在碱处理后,第二种物质形成甲胺,这是对称ω-N(G),N(G’)-二甲基精氨酸的分解产物特征。通过薄层色谱法对这两种物质进行进一步分析,确认其鉴定为ω-N(G)-单甲基精氨酸和对称ω-N-(G),N(G’)-二甲基精氨酸类。血凝素-PRMT5复合物还能够单甲基化和对称地二甲基化牛组蛋白H2A和谷胱甘肽S-转移酶-纤维蛋白(氨基酸1-148)融合蛋白(谷胱甘苷S-转移酶-GAR)。在COS-1细胞中引入myc标记的PRMT5构建物的S-腺苷-l-甲硫氨酸结合基序I的突变导致观察到的酶活性几乎完全丧失。PRMT5是II型蛋白精氨酸N-甲基转移酶催化链的第一个例子,该催化链可导致对称的二甲基精氨酸残基的形成,如先前在髓鞘碱性蛋白、Sm小核核糖核蛋白和其他多肽中观察到的。

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