SLE患者B细胞自身免疫机制的研究

摘要

引言

系统性红斑狼疮（SLE）被认为是一种典型的自身免疫性疾病，尽管不能排除SLE实际上是一种代表许多离散遗传和分子异常共同最终途径的综合征。大量基因异常可诱发小鼠狼疮样综合征[1]与SLE可能是反映多种不同分子异常的综合征的可能性一致。然而，大多数狼疮小鼠模型都与弥漫性B细胞过度活跃或凋亡物质清除缺陷有关，或两者兼而有之。因此，这些模型的可用数据表明，B细胞激活异常或各种凋亡物质的清除（或两者兼而有之）可能是人类SLE的定义分子途径。

患有SLE的小鼠和人类受试者都会产生许多针对核复合物的自身抗体，尽管这些抗体的分布在个体受试者和小鼠模型之间可能有很大差异。人类狼疮和各种动物模型的核心是产生针对DNA和核小体其他成分的抗体。传统上，血清学评估被用于描述SLE的免疫异常，但多年来人们也知道，患有SLE的小鼠和人类通常都表现出多克隆B细胞高反应性的证据。最近，大量使用流式细胞术的分析记录了狼疮患者B细胞成熟和分化的具体扰动，并产生了关于B细胞分化改变是否主要涉及免疫病理学的新信息，或者，可能继发于SLE的炎症环境（图​（图1）。1). 对某些疗法对临床疾病活动的影响及其对SLE B细胞亚群异常的影响的分析得出了更多见解。根据小鼠狼疮研究的进展，所有这些关于人类狼疮的新数据都增强了我们对B细胞在SLE中致病作用的理解，也为确定这种自身免疫性疾病的潜在治疗靶点提供了新的信息。此外，对B细胞在狼疮发病机制中的中心作用的新认识为监测特定B细胞亚群作为疾病活动和临床治疗反应的生物标记物提供了机会。

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图1

系统性红斑狼疮条件下T细胞依赖性B细胞激活的潜在畸变方案内源性和外源性因素都可能导致已知的B细胞过度活跃，这是由于生发中心反应增强，而选择缺陷所致。最终结果是，记忆增强的B细胞和浆细胞增多症可以解释，并且与活动性系统性红斑狼疮患者血液中可检测到的异常情况相一致。

B细胞作为自身免疫性疾病治疗靶点的原理

增加对B细胞在正常免疫反应中的作用的认识，特别是其分化为抗体分泌血浆消融剂和浆细胞的能力，以及其作为抗原呈递细胞（APC）、分泌细胞因子和影响淋巴结构的能力，已将其作为自身免疫性疾病的治疗靶点而备受关注。此外，全基因组关联研究已经确定了一些候选基因，例如银行1,黑色、IL-21R、CD40、Lyn、，PTPN22型、TNFAIP3、FcγRs和Blimp-1号与SLE和其他自身免疫性疾病相关，并可能导致B细胞反应性增加[2-4]. 最后，对基因操纵小鼠的研究表明，提高B细胞反应性的各种干预措施可导致产生自身抗体，并在适当的遗传株中产生狼疮样综合征[1]. 最近，也有研究表明，破坏广泛表达的基因可能导致B细胞超反应。在这方面，缺乏限制肿瘤坏死因子（TNF）受体家族成员激活核因子κB（NF-κB）的A20分子的小鼠tnfaip3型该基因的多态性与SLE相关，导致B细胞活性增强，生发中心（GC）活性增加，自身抗体和免疫球蛋白（Ig）在肾小球沉积[5]. 总之，这些发现使靶向B细胞被视为各种自身免疫疾病的潜在干预措施。

最初，B细胞消耗疗法被用于类风湿性关节炎，因为人们相信它会减少类风湿因子的产生，从而改善疾病活动[6]甚至诱导缓解。虽然B细胞补充疗法对类风湿性关节炎有效的实际机制尚未完全阐明，但利妥昔单抗已被批准用于治疗这种自身免疫性/炎症性疾病。随后，在SLE和ANCA进行了试验⁺（抗中性粒细胞胞质抗体阳性）血管炎、舍格伦综合征、免疫性血小板减少症、多发性硬化症、自身免疫性肌炎和其他自身免疫性疾病[7]. 尽管利妥昔单抗治疗SLE的试验[8]B细胞靶向治疗后的淋巴细胞监测未达到主要临床终点[9]有助于记录干预的生物学影响，以及与临床反应相关的B细胞再生特征。最近，B细胞生存因子BAFF/BLyS（B细胞激活因子/B淋巴细胞刺激因子）的单克隆抗体(TNFSF13b型)在非肾性狼疮的临床试验中显示有效，并于2011年在美国和欧洲获得批准。

人类系统性红斑狼疮的B细胞亚群

最近，我们回顾了SLE患者与健康受试者相比某些外周血B细胞亚群的异常[10]. 与健康受试者的差异表明，控制B细胞生物学许多方面的机制，包括免疫前B细胞成熟、成熟检查点的阴性选择、受体编辑，以及抗原反应的许多方面，包括体细胞超突变和效应B细胞生成，SLE患者普遍异常。这是否反映了固有的B细胞缺陷或继发于炎症尚不清楚。SLE患者外周免疫前B细胞群发生了一些变化，这反映了B细胞成熟度的异常。在外周血中，可以检测到免疫前B细胞的异常频率，包括过渡期B细胞、早期B细胞和早期B细胞[11]. 这些人群表示发生在骨髓外的B细胞成熟的主要阶段。在系统性红斑狼疮中，移行性B细胞和幼稚前B细胞都大大扩张。这些群体可以由多种标记物定义，包括CD38、CD5、CD9、CD10、CD24和ABCB1转运体[11]. 这些结果表明，SLE免疫前B细胞室中的人群向更不成熟的B细胞转移，这种转移与疾病活动无关。

关于针对自身反应性B细胞的早期选择缺陷，一项综合研究[12]研究表明，即使患有非活动性SLE的患者也无法清除由原始B细胞表达的表达自我活性B细胞受体（BCR）的B细胞。与此相一致，早期研究表明，在B细胞发育早期，从未成熟（CD10⁺CD27型^-免疫球蛋白M⁺B细胞）至成熟（CD10^-CD27型^-免疫球蛋白M⁺B细胞）幼稚的B细胞是SLE的特征[13]. 虽然很容易得出结论，SLE在解释致病性IgG自身抗体发展的“自身免疫检查点”方面存在缺陷，但不能排除的可能性是，这些“检查点”在SLE中活跃，以防止严重的自身免疫，但只是被慢性多克隆B细胞激活所淹没。或者，由于一些主要的IgM自身抗体可能具有保护性，因此在免疫前检查点的选择缺陷可能是为了提高非致病性保护性自身抗体的产生。

系统性红斑狼疮患者记忆B细胞的紊乱

成人SLE外周血B细胞表型的一个中心发现是CD27抗原的大量增加⁺免疫球蛋白D^-切换后存储器B单元[14]对免疫抑制治疗不太敏感[10,14]. 重要的是，SLE患者的外周记忆BCR储备是由异常选择、过度的体细胞超突变和增加的受体编辑形成的[15,16]. 相反，免疫前BCR最初由V_H（H）（D） J型_H（H）重组似乎与健康受试者的重组相似[17]. 此外，SLE的自体干细胞移植提供了概念证明，即该疾病可以在移植后成功缓解，同时出现占主导地位的幼稚T细胞和B细胞[18]. 这与以下结论一致：在狼疮发病机制中，抗原刺激和记忆B细胞分化后Ig储备形成的异常，而不是产生免疫前B细胞初始BCR储备的分子障碍，可能更为重要。

目前尚不清楚IgD是否占优势^-CD27型⁺转换后的记忆B细胞反映了外周耐受能力的丧失或异常选择过程，或者它们的出现是否仅仅是由于幼稚B细胞的激活和分化增强或记忆B细胞对免疫抑制药物缺乏敏感性所致。不考虑这些因素，记忆B细胞池的扩大会对自身免疫造成风险，因为这些细胞的激活阈值较低，FcγRIIb受体的调节可能会降低[19]这些细胞可以通过结合Toll样受体（TLR）激动剂和增殖诱导配体（APRIL）以非抗原特异性的方式快速激活(TNFSF13A型)或BAFF(TNFSF13B公司)以及通过细胞因子如IL-21和BAFF的组合[20].

除了IgD的大亚群外，SLE患者的另一个记忆B细胞亚群特别增强^-CD27型⁺后交换细胞也已被鉴定。这是一群不表达CD27的记忆B细胞[21-23]. CD27型^-B细胞以前被认为是单纯的幼稚B细胞，并表达IgD[23]但在SLE中，IgD的数量增加^-CD27型^-可以检测到具有记忆B细胞特征的B细胞。正常供者IgG⁺CD27型^-扁桃体和外周血中都发现了表达突变BCR的B细胞[24,25]，CD27^-免疫球蛋白D^-SLE患者外周血中的记忆B细胞增加，据报道，这种增加与疾病活动性增加和活动性肾病有关[22]. 这些IgD的频率^-CD27型^-据报道，记忆B细胞还与某些自身抗体（抗dsDNA（抗双链DNA）、抗Smith和抗核糖核蛋白）的存在以及B细胞表达由V_H（H）4-34重链[22]经常编码抗DNA自身抗体[26]. 与过渡期B细胞和早期B细胞类似，也是记忆性B细胞的典型特征，这些CD27^-免疫球蛋白D^-B细胞缺乏ABCB1转运体的表达，因此无法挤出荧光染料罗丹明123。

随后，IgD的一个更同质的子集^-CD27型^-CD95型⁺在IgD中发现记忆B细胞^-CD27型^-B细胞[21]. 详细的表型和分子研究表明，这种记忆性B细胞亚群与活动性疾病有关。相反，CD27的整个子集^-免疫球蛋白D^-B细胞是异质性的，与狼疮活动无关。IgD^-CD27型^-B细胞，但不是IgD^-CD27型^-CD95型⁺记忆B细胞也在细菌感染患者中增加，这表明更大的人群对非特异性免疫激活有反应，而不是SLE特有的变化。IgD^-CD27型^-CD95型⁺B细胞亚群在较大的IgD中是一个更均匀的亚群^-CD27型^-表达各种激活标记物（CD86、HLA-DR和CD38）、趋化因子受体（CXCR3、CXCR4和CXCR5）、CD21（CR2）和CD44的细胞池。重要的是，IgD^-CD27型^-CD95型⁺B细胞表现出较高水平的CD86、CXCR3、HLA-DR和CD71表达，而较低水平的CXCR4表达。这些数据与IgD^-CD27型^-CD95型⁺记忆性B细胞构成了一个独特的亚群，在SLE中出现的数量增加，代表了由于GC活性增强而最近激活的记忆性B淋巴细胞。这种记忆性B细胞亚群的CD95表达似乎是一个重要发现，因为它代表了SLE B细胞群体的一个独特特征，并意味着Fas/Fas-L相互作用对GC B细胞的截短可能在该疾病中有缺陷。

调节性B细胞

虽然尚未明确证明调节性B细胞在人类中发挥重要的免疫调节作用，但在小鼠中似乎是在抗原依赖性激活后诱导的，因此，也被认为是记忆子集的一部分。在小鼠中，调节性CD1d^你好CD5（CD5）⁺CD19编号^你好产生IL-10的B细胞亚群可控制T细胞依赖性免疫反应[27]. 此外，抗CD20介导的B细胞耗竭对CD4的特异性影响⁺，但不在CD8上⁺，证明T细胞对外来和自身抗原有反应[28]这意味着产生IL-10的小鼠B细胞可能对病理性T细胞反应起重要调节作用。然而，它们在人类狼疮中的确切作用尚待确认。最近一份关于SLE受试者的报告发现调节性CD19的人群⁺/CD24型^高的/CD38型^高的B细胞[29]，一种让人联想到免疫前B细胞的表型。据报道，该亚群分泌IL-10，因此能够在CD80/CD86和CD40/CD154结扎后抑制Th1和Th2功能。有趣的是，尽管这些细胞的数量与健康对照组相当，但在SLE患者中缺乏完整的功能。最近的分析[30]证明CD24中存在两个功能不同的子集^高的CD27型⁺B细胞群：B10和B10pro，前者在人类外周血中的含量在0.6%至5%之间，能够在5小时内产生IL-10，从而调节单核细胞功能。值得注意的是，本研究未能确定自身免疫患者（包括SLE患者）和对照组之间B10细胞频率的实质性差异。此外，上述人类调节性B细胞与B10或B10pro之间的关系尚不清楚。尽管如此，结果表明一些B细胞显然在控制T细胞和单核细胞反应中起着关键作用，SLE中的类似活性可能有缺陷。

系统性红斑狼疮患者血浆消融剂/浆细胞的干扰

成人和青少年SLE的一个标志是CD27的显著增加⁺⁺在活动性疾病中表达血浆消融剂/血浆细胞。这些细胞是CD19^低的CD20型^-/CD38型⁺⁺⁺，表面Ig^低的，并表达细胞内Ig[14,31,32]. 最近的研究[33,34]证明IgA⁺/β7整合素⁺浆母细胞/浆细胞代表健康受试者外周血中循环的稳态Ig分泌细胞，与抗原和佐剂刺激的CD62L形成对比⁺/免疫球蛋白G⁺血浆消融剂/有目的接种疫苗后血液中出现的血浆细胞。稳态血浆消融剂/血浆细胞也与CD62L不同^-/β7^-骨髓中的浆细胞。目前可用的大部分数据表明，活动性SLE的特征是儿童和成人循环浆细胞数量增加，表明这些细胞的稳态失调[14,31,35]. 活动性SLE的循环浆细胞增多反映了GCs内持续产生浆细胞/血浆消融剂，因为当SLE患者使用抑制CD40-CD154相互作用的CD154单克隆抗体治疗时，其外观显著减少体内[36]阻止IL-6作为B细胞分化的重要因素[37]因此，GC反应。

与此一致，活动性SLE患者的循环浆细胞表达高度变异的IgV_H（H）与GC模式一致的突变基因[38]. 值得注意的是，浆细胞是寡克隆的，包括积极分泌抗dsDNA抗体的细胞。狼疮性肾炎患者肾脏中的浆细胞也出现扩张[39]这些细胞靠近滤泡外结构。这支持了这样的结论，即通常在自身免疫中发现的这些结构可能有助于局部产生可能在该疾病中致病的自身抗体。

解释系统性红斑狼疮背景下观察到的B细胞异常的模型

很明显，人类狼疮与强烈的多克隆B细胞活化有关。免疫前B细胞群、GC后记忆B细胞和浆细胞中均可观察到异常。这些异常是如何导致狼疮发病的，以及它与自身抗体诱导的关系，这些问题尚未解决，但已经提出了一些可能性。

2.系统性红斑狼疮可能是由于生发中心活性增强和自身抗原的选择性选择所致

另一种假设是，SLE中的致病性自身免疫是由于T细胞依赖的类GC活性增加而产生的，该类GC活性从BCR与种系结构中的自身抗原无内在反应性的B细胞中产生自身抗体。这一假设的本质是B细胞超反应或T细胞过度反应或两者兼而有之的概念，再加上增强的体细胞超突变和GC内凋亡物质的积累，从而能够积极选择自身反应的B细胞。在小鼠模型和人类狼疮中，无固有自身反应性的B细胞前体细胞的体细胞超突变可引起自身免疫，这一发现支持了这一假设。

狼疮患者外周血中GC后B细胞亚群扩增的发现强调了T细胞依赖性GC反应在SLE中的重要性[14,22,35,44,53]. 虽然SLE中GC后细胞扩张，但关于这是由经典或异位GC的活动引起的，以及这些GC可能位于何处的信息很少。在经典型和异位型GC中，均可诱导B细胞的克隆扩增、Ig基因重排的体细胞超突变和Ig重链类开关重组。由此产生的记忆B细胞可被位于滤泡树突状细胞（FDC）表面的免疫复合物阳性选择，而被可溶性自身抗原阴性选择。尽管数据很少，但异位GC中阴性选择的严格程度可能较低。GC形成和活性的三个不同阶段，包括（a）GC结构的建立，（b）产生b细胞效应器的这些位点的活性，以及（c）FDC对高亲和力效应器细胞的选择，在抗原刺激后随时间演变。

2a、。生发中心的产生

鉴于GC活性的增强和异位GC的形成增加导致抗原经验记忆B细胞和浆细胞的产生，有可能与GC结构建立有关的因素，包括T滤泡辅助因子（T_FH公司)细胞、IL-21、IL-6、CXCL13、TNFβ和诱导性T细胞共同刺激物（ICOS）在SLE中起着关键作用。在这方面桑罗克语含有调节T细胞ICOS表达的突变的小鼠会发展成非常侵袭性的狼疮。在这种情况下，CD154/CD40和ICOS-L/ICOS[54]以及CD80/CD86[55]连接被认为是激活B细胞所必需的，但也是激活自身反应性T细胞所必不可少的[56]和调节性B细胞的诱导[29]. 关于SLE血浆细胞和记忆B细胞上表达的共刺激配体的重要参与，已有研究表明SLE血液中的T和B细胞自发表达CD154[36]这表明GC中激活的淋巴细胞可能异常释放，或者选择不足，导致记忆B细胞异常流出血液。类似地，CD4⁺和CD8⁺狼疮患者的T细胞被鉴定为ICOS表达增强，而记忆B细胞则显著下调ICOS-L，这可能是最近T细胞指令的结果[39].

I型细胞因子IL-21对共同刺激的B细胞分化为浆细胞至关重要[20]也被认为与SLE发病机制有关。IL-21R的数据支持这一假设^-/-免疫应答中IgG1和IgG2b降低的小鼠和发生高丙种球蛋白血症的IL-21转基因小鼠[57]. 此外，在BXSB-Yaa中发现IL-21显著增强⁺和桑罗克语SLE小鼠模型[57]. 此外，MRL狼疮小鼠成功地阻断了IL-21活性，与BXSB-Yaa的观察结果一致⁺与IL-21R杂交的小鼠^-/-SLE所有表现消失的小鼠[20,58]. IL-21由CXCR5组成⁺T型_FH公司细胞，一种位于B细胞滤泡中的T细胞亚群，专门为抗原激活的B细胞提供初始帮助[59]. 此外，T_FH公司细胞生成需要ICOS刺激，其分化受转录阻遏物bcl-6调节[60]. 值得注意的是圣罗克构成性过度表达ICOS的小鼠含有大量T_FH公司产生大量IL-21的细胞诱导狼疮表型。这些发现表明，ICOS和IL-21之间的联系是次级淋巴器官B细胞刺激所必需的，这进一步证明了GC诱导或维持或两者都参与的因素在人类SLE中至关重要。IL-21和IL-21R多态性与SLE相关的数据进一步支持了GC在SLE中的作用[61]. 在这种情况下，干扰素α对B细胞直接作用的可能性较小，但I型干扰素[62]也可以通过髓系细胞诱导BAFF/BLyS，从而提高自身反应性B细胞的存活率[63]. 总的来说，一组复杂的配体和细胞因子似乎对启动GC结构的功能和确定其解剖位置很重要。

参与SLE中GC建立的GC因子的可用性增强可能解释了所谓异位GC的形成，这些异位GC被认为参与了自身免疫条件下B细胞和浆细胞的分化。尽管关于异位GC是否对自身免疫具有特异性的确凿证据仍然缺乏，但关于其在病毒性鼻炎等传染病中发生的证据表明，异位GC并非自身免疫疾病所独有，但仍可能有一定作用。此外，目前尚不清楚狼疮异位GC在阴性选择中是否存在独特缺陷，因为即使是SLE患者扁桃体中的经典GC也被发现在对9G4表达的B细胞的选择中存在缺陷。

异位GC结构可能通过BCR与BAFF和APRIL激活受体（TACI，TNFRSF13B）的共同结合或细菌DNA连接TLR9或单链RNA连接TLR-7或TLR-8，从而通过NF-κB依赖机制激活B细胞，从而参与T细胞对记忆B细胞的依赖性激活。通过TLR发出信号，特别是dsDNA诱导的TLR9和单链DNA/RNA诱导的TLR 7，独特地刺激MyD88依赖性记忆B细胞[64]可能导致SLE患者浆细胞增多。

需要强调的是，其他细胞也可能参与自身免疫性疾病中B细胞激活的启动。在这方面，最近的一项研究[65]对MRL.Fas上的DC使用条件敲除小鼠^{液化石油气}背景发现血浆消融剂和自身抗体的诱导依赖于DC，可能与T细胞依赖性滤泡外反应有关。这些动物的总Ig水平保持稳定。有趣的是，这项研究强调，在某些自身免疫性疾病中，DC和T细胞之间的相互作用与DC和B细胞之间的作用可能存在差异。

2b、。抗原呈递细胞功能

B细胞可以充当专业APC。这一结论是由动物模型的数据提出的[66]在这种情况下，当用缺乏分泌免疫球蛋白能力的B细胞重建自身免疫阳性小鼠时，尽管病情轻微，但仍会发展成狼疮样疾病，而在完全缺乏B细胞的情况下，则不会出现疾病。因此，记忆B细胞的一个重要功能可能是抗原提呈，这是由高亲和力BCR、主要组织相容性复合体（MHC）II类和共刺激分子的表达促进的，因此，记忆B细胞可能能够激活和扩展记忆T细胞。

2c、。T细胞依赖性激活记忆B细胞

除了具有APC的潜在作用外，SLE中丰富的记忆性B细胞亚群对各种刺激（如TLR配体、IL-21、BAFF、IL-10、BCR激活和共刺激配体-配体相互作用）具有超反应性，可能导致产生免疫球蛋白的浆细胞增多，而无需像初生B细胞那样有严格的选择标准。记忆B细胞反应性的这种增加也可以反映SLE特有的细胞因子如IL-6、淋巴毒素β、IL-4、IL-10和IL-21的产生增加。在相当多的SLE患者中，由SLE患者血液中减少的组织旁浆细胞样DC产生的干扰素α可能通过诱导BAFF/BLyS（TNFSF13b）的产生而最终诱导B细胞过度活跃[67].

第二天。体细胞过度突变与自身免疫

许多研究证明，体细胞超突变是产生疾病相关抗核抗体（ANA）所必需的。最近的一项指导性研究[47]使用TdT^-/-小鼠因此避免了连接多样性引入的CDR3自身反应结合，这表明自发自身免疫与体细胞超突变产生的非自身反应前体产生的高亲和力自身免疫B细胞密切相关。突变过程引入编码密码子，作为针对突变热点（AGC和AGT/丝氨酸密码子）的目标突变的结果。与早期表明精氨酸残基在抗核活性中重要性的研究一致，这一信息支持了以下结论：体细胞超突变在以T细胞依赖的方式诱导ANA特异性B细胞中起着重要作用。10个克隆中只有1个（J7.13使用J_千1基因片段）在恢复到种系序列后保留了抗核抗体结合活性，这与B细胞发育过程中逃过所有耐受检查点或受体编辑存在缺陷的可能性一致。数据表明，大多数自身反应性B细胞是由体细胞超突变产生的，尽管少数自身抗原结合B细胞可以逃避耐受，这与检查点异常可能导致某些自身免疫，从而在免疫前B细胞室中增加自身免疫储备的论点一致。如上所述，体细胞超突变在自身免疫发展中的重要性已被证明是来源于狼疮患者的自身反应性单克隆抗体，当反向突变到种系构型时，其失去了自身抗原结合[44,45]. 通过不同技术获得的这些独立数据表明，体细胞超突变几乎是SLE中建立自身反应性的普遍因素。

其他结果也集中于体细胞超突变在生成自身抗体中的作用。活动性SLE患者的浆细胞表现出广泛变异的V_H（H）和V_L（左）基因，突变模式与T细胞依赖性抗原刺激后观察到的模式相似[14-17,44-46,68]（图​（图2）。2). 这些浆细胞的Ig基因重排显示，与框架区（FRs）相比，互补性决定区（CDRs）1和2内的替换沉默（R/S）突变率增加，并显示出突变靶向RGYW/WRCY突变热点。现有数据均与GC型分子突变模式一致。

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图2

系统性红斑狼疮（SLE）自身抗体生成的潜在途径SHM，体细胞超突变。

V的分子特性比较_H（H）健康受试者和SLE患者循环中抗原经历过的B细胞的基因重排（图​（图3）三)结果表明，与健康志愿者相比，SLE患者CDR与FRs的R/S比值较高（图​（图3b）3亿)正在接受破伤风加强针接种。近年来，特别针对RGYW/WRCY基序的Gs和Cs的突变引起了人们的特别关注，因为它们被认为是AIDCA脱氨基的直接后果[69]通常发生在普通人群中，因为这种模式在CD154缺陷个体中特别减少，实际上缺乏普通人群[70]. 值得注意的是，体细胞超突变的频率和CDR3的长度在健康受试者和SLE受试者之间具有可比性（图3a、c、d). 因此，SLE患者CDR中较高的R/S比率表明GC反应后的选择缺陷可能在SLE中起主要作用。GC中的阴性选择可能会被GC中大大增加的免疫活性所覆盖或耗尽，从而允许自身反应B细胞的出现。

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图3

免疫对照组和系统性红斑狼疮（SLE）抗原经历细胞的分子生发中心特征的比较分析.V型_H（H）破伤风毒素特异性浆细胞（TT）重组C片段的单个细胞序列⁺PC）和TT特定内存B单元（TT⁺mBCs）在破伤风增强剂治疗后从三名健康献血者中收集[81]和一名SLE患者（SLE PC）的血浆细胞[14]. TT公司⁺PC和TT⁺mBC是由T细胞依赖性反应产生的效应细胞。（a）突变频率。每个点代表一个单独单元格的值。（b）互补性决定区（CDRs）1和2以及框架区（FRs）内替换（R）与沉默（S）突变的比率。（c）位于RGYW和WRCY两个基序内的突变频率（R=嘌呤，Y=嘧啶，W=腺嘌呤/胸腺嘧啶）。（d）单个B细胞的CDR3长度与每个序列的潜在突变总数相关。每个细胞类型的序列根据其V分为三类_H（H）区域突变（即0到5个突变、6到10个突变和超过10个突变），并根据各自的CDR3长度绘制。条形表示中间带。

第二节。选择

人类和小鼠系统性红斑狼疮的各种结果与GC反应后对自身反应性B细胞进行筛选时选择受到严重损害的可能性一致。一种可能的考虑是，选择异常可能与SLE的凋亡特征缺陷有关。在这方面，SLE中凋亡物质清除不足[41,71]似乎发挥了重要作用。Herrmann及其同事[72]证明在体外约50%的SLE患者的吞噬细胞显示自身凋亡物质的吞噬活性降低。关于GC在里面活泼地在一个SLE患者亚组中，可染体巨噬细胞的总数减少，这些巨噬细胞是吞噬凋亡细胞最有效的吞噬细胞，位于靠近FDC的位置。此外，这些可染体巨噬细胞很少含有凋亡物质，而是发现凋亡碎片在吞噬细胞外未被消化[73]. 因此，DC可能通过其表面的MHC分子呈现自我抗原[74]并可能导致自身反应性T细胞活化。此外，GC内FDC表面可见凋亡物质[75]这表明它们可能能够积极选择从GC中产生的自动反应记忆B细胞。有证据表明，这些“审查单位”明显异常，可能会积极选择自身反应性B细胞，这是来自一项研究，该研究表明，在SLE患者的扁桃体中可以检测到表达编码9G4独特型的抗DNA的B细胞，但在正常的GCs中没有发现[26]. 这些数据支持这样的观点，即凋亡物质清除障碍不仅可以诱导而且可以选择GC中的自身反应性B细胞。因此，从低效清除凋亡残留物中获得并由FDC呈现的自身抗原可能在选择自身抗体中具有核心重要性（图​（图44).

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图4

体细胞超突变特征及自身抗体的产生AID，激活诱导的胞苷脱氨酶；CDR，互补性决定区；免疫球蛋白；RGYW、嘌呤（R）、鸟氨酸（G）、嘧啶（Y）、腺嘌呤/胸腺嘧啶（W）；S→R，静置至更换；SHM，体细胞超突变；WRCY、腺嘌呤/胸腺嘧啶（W）、嘌呤（R）、胞嘧啶（C）、嘧啶（Y）。

针对B细胞的治疗策略的临床方面

从一些最近的靶向B细胞治疗临床试验中获得了指导性数据。嵌合抗CD20抗体利妥昔单抗的免疫治疗[9]，tocilizumab阻断IL-6效应[37]，阻止CD154-CD40交互[36]和自体干细胞移植[18]严重SLE患者的研究表明，在成功干预后，扩大记忆的B细胞和浆细胞群可以正常化，并产生主要为幼稚的B细胞。相反，BAFF/BLyS中和抗体belimumab导致原始B细胞和浆细胞减少，但循环记忆B细胞增加[76]. 尽管B细胞表型发生了变化，但两项研究利妥昔单抗治疗SLE的试验均未达到临床终点[77]然而，两项belimumab试验显示出显著的临床疗效。这些试验的不同结果对这些试剂的药效学差异及其最相关的效果提出了疑问。虽然在研究阿巴曲普治疗SLE的试验中没有关于淋巴细胞亚群的数据[78]在早期研究中阻断CD154/CD40之间的共同刺激，在临床前研究中阻断ICOS/ICOS-L[39]与抑制某些GC过程是成功干预的主要候选者的观点一致。

有趣的是，据报道，用人源化单克隆belimumab阻断BAFF/BLys可优先减少过渡期原始B细胞和浆细胞[76]表明该细胞因子可能参与早期和晚期B细胞分化。另一种针对B细胞上表达的CD22的单克隆抗体epratuzumab被证明优先降低外周CD27^-B细胞[79]. CD27上CD22高表达的最新观察^-天真与CD27⁺记忆B细胞可以解释这种差异。此外，epratuzumab与幼稚B细胞的结合增强明显与CXCL12迁移增强有关在体外同时CD62L和β7整合素的表达减少[80]. 这两种可能性意味着B细胞参与SLE，尽管它们是否直接或间接干扰GC激活与FDC阳性选择仍有待证明。

结论

虽然SLE中B细胞过度反应的潜在原因尚待完全阐明，但数据表明，这种活性增加有助于自身免疫的出现。狼疮患者B细胞的两个主要异常是中央检查点缺陷，一方面导致部分自身反应性前免疫储备，另一方面增强了外周T细胞依赖性B细胞的活化，其自身免疫源于体细胞过度突变，并由FDC上显示的凋亡物质选择。虽然两者都可能导致自身免疫的出现，但大多数数据支持后者是致病性自身抗体形成的主要原因。因此，这一假设表明，自体免疫的很大一部分并非严格地由自身抗原刺激针对启动的自身抗原的特定反应而启动，而是由自身抗原选择通过体细胞超突变获得自身反应性的B细胞来生存。此外，研究结果表明，旨在降低GC中T细胞依赖性免疫反应过程中B细胞反应性的疗法可能对治疗SLE患者具有积极作用。

缩写

ANA：抗核抗体；APC：抗原提呈细胞；APRIL：一种增殖诱导配体；BAFF：B细胞激活因子；BCR：B细胞受体；BLyS：B淋巴细胞刺激因子；CDR：互补性决定区；DC：树突状细胞；dsDNA：双链DNA；FDC：滤泡树突状细胞；FR：框架区域；GC：生发中心；ICOS：诱导性T细胞共刺激因子；Ig：免疫球蛋白；IL：白细胞介素；MHC：主要组织相容性复合体；NF-κB：核因子-kappa-B；R/S：替换为静音；SLE：系统性红斑狼疮；T型_FH公司：T卵泡辅助器；TLR：Toll样受体；TNF：肿瘤坏死因子。

竞争性利益

作者声明，他们没有相互竞争的利益。

注释

风湿病的自身免疫基础

本文是关于系统性红斑狼疮由David Pisetsky编辑，可在网上找到http://arthritis-research.com/series/luse

本系列是涵盖主要自身免疫性风湿疾病的特别综述集的一部分，可在以下网址获得：http://arthritis-research.com/series/abrd

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