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《维罗尔杂志》。1993年8月;67(8): 4621–4629.
doi(操作界面):10.1128/jvi.67.8.4621-4629.1993年
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PMID:8392603

含有非活性2A蛋白酶的脊髓灰质炎病毒微复制子在痘苗病毒感染细胞中表达。

摘要

由于尚未开发出合适的互补系统,因此很难评估单个病毒蛋白在脊髓灰质炎病毒复制中的作用。为了解决这个问题,我们构建了一个嵌合的人类免疫缺陷病毒2型(HIV-2)-gag-脊髓灰质炎病毒微复制子,其中HIV-2的gag基因区域插入脊髓灰质病毒基因组中的核苷酸1174和2470之间。将这种嵌合RNA转染到HeLa细胞中会导致微型复制子的复制和HIV-2-gag-P1融合蛋白的表达,该融合蛋白可以与HIV-2-ga抗体免疫沉淀。HIV-2-gag-P1融合蛋白的表达依赖于嵌合RNA基因组的复制。尽管嵌合HIV-2-gag-poliovirus RNA基因组在脊髓灰质炎病毒感染的细胞中复制,但通过嵌合RNA分析,将嵌合HIV-2-gag-Polivirus基因组转染到痘苗病毒感染的电池中会导致复制增加。在痘苗病毒感染的细胞中,复制的增加与HIV-2-gag-P1融合蛋白表达的增加相关。为了表征这个系统,我们在2A基因中构建了一个突变,将氨基酸109处的半胱氨酸转变为丝氨酸。将含有2A突变的HIV-2-gag-poliovirus基因组转染HeLa细胞时,未检测到HIV-2-gag-P1融合蛋白的表达,表明该突变对复制是致命的。当嵌合基因组转染到脊髓灰质炎病毒感染的细胞中时,未观察到HIV-2-gag-P1融合蛋白的RNA复制或表达。相反,将该基因组转染到痘苗病毒感染的细胞中,导致嵌合RNA的复制和两种蛋白的表达,这两种蛋白具有比HIV-2-gag-P1蛋白更大的分子量,可能代表HIV-2-gag-P1-2A和HIV-2-gag-P1-2ABC融合蛋白。将含有2A突变的嵌合HIV-2-gag-poliovirus基因组转染到脊髓灰质炎病毒-疫苗病毒共感染细胞中,导致两个较大的HIV-2-gag-P1融合蛋白的表达和部分处理,以获得HIV-2-ga g-P1融合蛋白的正确分子量。将2A突变重新构建回脊髓灰质炎病毒全长感染性cDNA。将该cDNA转染到痘苗病毒感染的细胞中,然后用抗病毒抗体进行免疫沉淀,证明存在两种分子量大于P1的蛋白,可能是P1-2A和P1-2ABC融合蛋白。(摘要删减为400字)

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  • Ansardi DC、Porter DC、Morrow CD。与表达脊髓灰质炎病毒P1和P3蛋白的重组痘苗病毒联合感染会导致多蛋白加工和空衣壳结构的形成。《维罗尔杂志》。1991年4月;65(4):2088–2092. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Bablanian R、Goswami SK、Esteban M、Banerjee AK、Merrick WC。痘苗病毒mRNA选择性翻译的机制:poly(A)和起始因子在病毒和细胞mRNA翻译中的差异作用。《维罗尔杂志》。1991年8月;65(8):4449–4460. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Beattie E,Tartaglia J,Paoletti E.疫苗病毒编码的eIF-2α同源物消除了干扰素的抗病毒作用。病毒学。1991年7月;183(1):419–422.[公共医学][谷歌学者]
  • Bernstein HD,Sarnow P,Baltimore D。来自感染性cDNA克隆的脊髓灰质炎病毒突变体之间的遗传互补。《维罗尔杂志》。1986年12月;60(3):1040–1049. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Bernstein HD、Sonenberg N、Baltimore D.脊髓灰质炎病毒突变株,不选择性抑制宿主细胞蛋白质合成。分子细胞生物学。1985年11月;5(11):2913–2923. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Black TL、Safer B、Hovanesian A、Katze MG。细胞68000-Mr蛋白激酶在脊髓灰质炎病毒感染期间高度自磷酸化和活化,但显著降解:翻译调控的意义。《维罗尔杂志》。1989年5月;63(5):2244–2251. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Charini WA、Burns CC、Ehrenfeld E、Semler BL。突变脊髓灰质炎病毒RNA聚合酶功能的反式拯救。《维罗尔杂志》。1991年5月;65(5):2655–2665. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Choi WS,Pal-Gosh R,Morrow CD。嵌合HIV-1脊髓灰质炎病毒微复制子中人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)gag、pol和env蛋白的表达。《维罗尔杂志》。1991年6月;65(6):2875–2883. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Collis PS、O'Donnell BJ、Barton DJ、Rogers JA、Flanegan JB。脊髓灰质炎病毒核糖核酸和亚基因组核糖核酸转录物在转染细胞中的复制。《维罗尔杂志》。1992年11月;66(11):6480–6488. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Ehrenfeld E.脊髓灰质炎病毒对宿主细胞蛋白质合成的抑制。单元格。1982年3月;28(3):435–436.[公共医学][谷歌学者]
  • Grodberg J,Dunn JJ。ompT编码大肠杆菌外膜蛋白酶,在纯化过程中裂解T7 RNA聚合酶。细菌杂志。1988年3月;170(3):1245–1253. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Hagino-Yamagishi K,Nomoto A.脊髓灰质炎病毒缺陷干扰颗粒的体外构建。《维罗尔杂志》。1989年12月;63(12):5386–5392. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Hellen CU,Fäcke M,Kräusslich HG,Lee CK,Wimmer E.脊髓灰质炎病毒2A蛋白酶的突变分析表征:自催化活性所需的残基对于诱导真核起始因子4F多肽p220的切割至关重要。《维罗尔杂志》。1991年8月;65(8):4226–4231. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Jore J、De Geus B、Jackson RJ、Pouwels PH、Enger-Valk BE。脊髓灰质炎病毒蛋白3CD是体外加工前体蛋白P1的活性蛋白酶。维罗尔将军。1988年7月;69(第7部分):1627-1636。[公共医学][谷歌学者]
  • 卡普兰G,拉卡尼埃洛VR。脊髓灰质炎病毒亚基因复制子的构建和鉴定。《维罗尔杂志》。1988年5月;62(5):1687–1696. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Kitamura N、Semler BL、Rothberg PG、Larsen GR、Adler CJ、Dorner AJ、Emini EA、Hanecak R、Lee JJ、van der Werf S等。脊髓灰质炎病毒RNA的初级结构、基因组织和多肽表达。自然。1981年6月18日;291(5816):547–553.[公共医学][谷歌学者]
  • Kräusslich HG、Nicklin MJ、Toyoda H、Etchison D、Wimmer E.脊髓灰质炎病毒蛋白酶2A诱导真核生物起始因子4F多肽p220裂解。《维罗尔杂志》。1987年9月;61(9):2711–2718. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Kumar P、Hui HX、Kappes JC、Haggarty BS、Hoxie JA、Arya SK、Shaw GM、Hahn BH。减毒人类免疫缺陷病毒2型分离物的分子特征。《维罗尔杂志》。1990年2月;64(2):890–901. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Lawson MA,Semler BL。3C蛋白酶裂解主要位点产生的交替脊髓灰质炎病毒非结构蛋白加工级联。病毒学。1992年11月;191(1):309–320.[公共医学][谷歌学者]
  • Lloyd RE,Grubman MJ,Ehrenfeld E.小RNA病毒感染期间p220裂解与2A蛋白酶序列测定的关系。《维罗尔杂志》。1988年11月;62(11):4216–4223. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Morrow CD、Gibbons GF、Dasgupta A.脊髓灰质炎病毒体外复制所需的宿主蛋白是一种磷酸化真核细胞起始因子-2的蛋白激酶。单元格。1985年4月;40(4):913–921.[公共医学][谷歌学者]
  • Nicklin MJ、Kräusslich HG、Toyoda H、Dunn JJ、Wimmer E.脊髓灰质炎病毒多肽前体:体外表达和外源3C和2A蛋白酶处理。美国国家科学院院刊。1987年6月;84(12):4002–4006. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • 奥尼尔RE,Racaniello VR。在感染脊髓灰质炎病毒2Apro突变体的细胞中抑制翻译与真核生物起始因子2α亚基的磷酸化相关。《维罗尔杂志》。1989年12月;63(12):5069–5075. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Palmenberg AC。小RNA病毒多蛋白的蛋白质水解加工。微生物年鉴。1990;44:603–623.[公共医学][谷歌学者]
  • Pelletier J,Kaplan G,Racaniello VR,Sonenberg N.脊髓灰质炎病毒mRNA的Cap依赖性翻译由5'非编码区内的序列元件赋予。分子细胞生物学。1988年3月;8(3):1103–1112. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Pelletier J,Sonenberg N.由脊髓灰质炎病毒RNA衍生序列指导的真核mRNA翻译的内部启动。自然。1988年7月28日;334(6180):320–325.[公共医学][谷歌学者]
  • Racaniello VR,Baltimore D.克隆脊髓灰质炎病毒互补DNA在哺乳动物细胞中具有传染性。科学。1981年11月20日;214(4523):916–919.[公共医学][谷歌学者]
  • Rueckert RR,Wimmer E.小核糖核酸病毒蛋白质的系统命名。《维罗尔杂志》。1984年6月;50(3):957–959. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Saiki RK、Gelfand DH、Stoffel S、Scharf SJ、Higuchi R、Horn GT、Mullis KB、Erlich HA。用热稳定DNA聚合酶进行引物导向的DNA酶促扩增。科学。1988年1月29日;239(4839):487–491.[公共医学][谷歌学者]
  • Sanger F、Nicklen S、Coulson AR。链终止抑制剂的DNA测序。美国国家科学院院刊。1977年12月;74(12):5463–5467. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Semler BL、Dorner AJ、Wimmer E。SV40转录和复制信号显著增加了克隆cDNA中感染性脊髓灰质炎病毒的产生。核酸研究。1984年6月25日;12(12):5123–5141. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • Sonenberg N.脊髓灰质炎病毒翻译的监管。高级病毒研究。1987;33:175–204.[公共医学][谷歌学者]
  • 丰田章男(Toyoda H)、尼克林(Nicklin MJ)、穆雷(Murray MG)、安德森(Anderson CW)、邓恩·JJ(Dunn JJ)、Studier FW、威默(Wimmer E)。参与脊髓灰质炎病毒多蛋白蛋白水解过程的第二种病毒编码蛋白酶。单元格。1986年6月6日;45(5):761–770.[公共医学][谷歌学者]
  • Trono D,Pelletier J,Sonenberg N,Baltimore D。与脊髓灰质炎病毒5'非编码区相关的基因在哺乳动物细胞中的翻译。科学。1988年7月22日;241(4864):445–448.[公共医学][谷歌学者]
  • Vieira J,Messing J。单链质粒DNA的生产。方法酶学。1987;153:3–11.[公共医学][谷歌学者]
  • Ypma-Wong MF,Semler BL.脊髓灰质炎病毒P1前体体外裂解为衣壳蛋白所需的加工决定簇。《维罗尔杂志》。1987年10月;61(10):3181–3189. [PMC免费文章][公共医学][谷歌学者]
  • 于顺峰,劳埃德·RE。脊髓灰质炎病毒2A蛋白酶功能活性中必需氨基酸残基的鉴定。病毒学。1991年6月;182(2):615–625.[公共医学][谷歌学者]
  • Yu SF,Lloyd RE。保守半胱氨酸和组氨酸残基在脊髓灰质炎病毒2A蛋白酶中作用的表征。病毒学。1992年2月;186(2):725–735.[公共医学][谷歌学者]

来自的文章病毒学杂志由以下人员提供美国微生物学会