Bcl-x对细胞凋亡的调节_L（左）哺乳动物肌醇1,4,5-三磷酸受体通道亚型门控的调控

摘要

胞质游离钙的调节²⁺浓度（[Ca²⁺]_我)是调节许多生理过程的主要细胞内信号通路(1). 肌醇1,4,5-三磷酸（InsP_三)受体（InsP_三R） 钙²⁺内质网（ER）中的释放通道调节[Ca²⁺]_我通过释放储存的钙²⁺配体InsP结合后从内质网腔流出_三在细胞外刺激下产生(2). 释放的Ca²⁺由肌浆/ER-Ca重新进入内质网腔²⁺-ATP酶(三). 哺乳动物细胞表达三种不同的InsP_三R亚型编码于遗传水平，神经系统外的大多数细胞表达多种类型，尽管不同细胞类型的表达模式差异很大(4). 许多不同的生物化学，钙²⁺已经提出了不同亚型的释放和单通道特性，这可能使通道亚型的细胞类型依赖性互补物能够调节不同的细胞过程(5).

细胞凋亡是一个重要的生理过程，在组织稳态、免疫系统功能和发育中起着重要作用(6–8). 细胞凋亡调节缺陷涉及多种疾病，包括癌症和神经退行性变，在应对各种应激、损伤和病毒感染的生理反应中也很重要。虽然线粒体在细胞凋亡调节中起着重要作用，但人们已经认识到ER也参与其中(9–13)，其贡献被认为与其作为主要钙的作用有关²⁺细胞中的储存细胞器(9,10,14,15). 在正常生理条件下，Ca²⁺InsP发布_三R活化可被附近的线粒体吸收，以刺激氧化磷酸化并增强ATP的生成(16). 然而，线粒体基质[Ca升高²⁺]与某些凋亡刺激相一致，可以触发线粒体通透性转换孔的开放，从而释放细胞色素等凋亡信号分子c（c）(14,17). 此外，释放的ER Ca²⁺与钙的活化有关²⁺-敏感的凋亡蛋白，包括钙调神经磷酸酶(18,19)和钙蛋白酶(20,21).

最近的研究表明InsP_三ER介导的凋亡调控中的R。InsP的击倒_三R表达水平对凋亡刺激具有保护作用(22–26)以及Bcl-2家族抗凋亡成员（如Bcl-2和Bcl-x）提供的凋亡保护_L（左）部分归因于它们调节ER-Ca的能力²⁺通过与InsP的交互发出信号_三R（右）(27–30). Bcl-x公司_L（左）已证明与InsP的羧基末端直接相互作用_三R并使其单通道门控对低水平InsP敏感_三可能存在于非刺激细胞中(29). 这种功能效应增强了[Ca²⁺]_我静止细胞中的信号转导和减少钙含量²⁺在ER流明中(29). 重要的是，Bcl-x的这种相互作用_L（左）与InsP合作_三Bcl-x需要R_L（左）充分发挥其抗凋亡作用(29). 增强低电平[Ca²⁺]_我信号(30,31)或ER Ca减少²⁺水平(28,31–33)也观察到了对Bcl-2/Bcl-x的反应_L（左）在其他研究中也有表达。然而，目前尚不清楚这两种结果中哪一种在调节细胞凋亡方面更重要。人们反复建议Bcl-2/Bcl-x_L（左）-ER[Ca的依赖性减少²⁺]具有保护作用，因为它使Ca最小化²⁺InsP期间发布_三R活化，减少钙含量²⁺被线粒体吸收，防止线粒体通透性转换孔和随后的细胞色素活化c（c）释放(14,17,34). 然而，Bcl-2/Bcl-x_L（左）表达与ER-Ca的变化无关²⁺许多研究的内容(35). 由于单个InsP的表达水平可变且不同_三不同细胞类型之间的R亚型，这些差异可能反映了Bcl-2蛋白与不同InsP相互作用的功能差异_三R亚型。或者，有可能降低ER Ca²⁺含量是一种副现象，具有增强的低水平[Ca²⁺]_我提供抗凋亡信号的信号。在这里，我们探讨了每种哺乳动物InsP的作用_三R亚型作为促凋亡介质和抗凋亡Bcl-x_L（左）-结合伙伴并检查ER-Ca之间的关系²⁺InsP的含量和抗凋亡性_三R–Bcl-x_L（左）互动。

结果

个体InsP的表达_三R等位基因及其对细胞凋亡的影响。

通过使用鸡前B细胞系DT40的一个变种和InsP的所有三种亚型_三R基因删除(26)，产生了一系列稳定的表达重组鼠1型、2型或3型InsP的品系_三R（右）(图1A类). 对于每个亚型，两个具有不同水平InsP的克隆_三已选择R表达(图1B类). DT40 B细胞受体（BCR）的Ig结合刺激InsP_三-依赖[Ca²⁺]_我在重述负选择的过程中传递信号并诱导凋亡(26,36). 用抗鸡IgM刺激细胞，在120小时内监测细胞活力_三R亚型增强细胞凋亡敏感性(图1C类). 值得注意的是，1型和2型InsP的绝对表达水平之间存在相关性_三R（克隆之间的差异分别为2.5倍和5倍）和凋亡敏感性增强的程度(图1C类). 在3型表达系中没有观察到这种相关性，可能是因为InsP水平相似_三R-3蛋白在两个克隆中表达（它们之间的差异小于1.5倍）。值得注意的是，每个InsP的表达增强了细胞凋亡敏感性_三R亚型在最初48小时内最为显著，其模式与DT40野生型细胞的模式相似，该细胞内源性表达所有三只鸡的InsP_三卢比(29). 这些数据表明InsP的能力缺乏亚型特异性_三R有助于细胞凋亡的进展，并进一步表明凋亡敏感性可以通过总InsP的变化进行滴定_三R蛋白表达。

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图1。

单个InsP的表达_三R亚型增强凋亡敏感性。(A类)描述DT40-InsP单个克隆生成策略的流程图_三R-KO稳定表达大鼠1型、2型和3型InsP_三R或相关空向量；选定的单个菌落用数字表示。(B类)每个InsP的表达水平_三通过蛋白质印迹检测所选克隆中的R异构体。数据是三个独立实验的代表。(C类)用20μg ml在时间0处理后的细胞活力⁻¹表达1、2或3型InsP的两个克隆（红色和绿色圆圈）的抗BCR抗体（抗IgM）_三R和一个克隆单独表达载体（黑钻石）（与B类). 将数据标准化为时间0表示至少三个单独试验的平均值±SEM，一式三份。

Bcl-x的影响_L（左）InsP中的细胞凋亡_三R表达细胞系。

对于每个InsP_三R亚型，InsP最高的克隆系_三用Bcl-x转染R表达_L（左）或仅矢量。亚克隆后，InsP_三稳定表达可比Bcl-x的R型1、2和3菌落_L（左）选择蛋白质水平。稳定DT40-InsP_三表达Bcl-x的R敲除（KO）细胞_L（左）或并行生成适当的矢量控制(图2 A类和B类). Bcl-x公司_L（左）IgM刺激两种InsP细胞凋亡期间的表达提供保护_三R表达和非表达细胞。然而，值得注意的是，表达InsP的细胞的保护程度更大_三R.该结果与InsP相似_三Bcl-x的R表达依赖性效应_L（左）先前在表达内源性InsP的DT40细胞中观察到_三R（右）(29). 重要的是，Bcl-x的这种协同效应_L（左）和InsP_三凋亡抵抗的R表达与特定哺乳动物InsP无关_三表达的R亚型(图2C类). 从第二组克隆中获得了类似的结果(SI图6). 因此，哺乳动物InsP_三Bcl-x需要R_L（左）作为抗凋亡调节剂完全有效，但保护程度并不取决于Bcl-x_L（左）与特定通道亚型的相互作用。

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图2。

每个InsP_三R亚型增强Bcl-x的抗凋亡功效_L（左）. (A类)表达Bcl-x的单个克隆的生成策略流程图_L（左）在DT40 InsP的背景下_三R-KO-表示空向量或InsP_三R类型1、2或3。(B类)Bcl-x的表达水平_L（左），InsP公司_三R、 肌浆/ER-Ca²⁺-所选克隆中的ATP酶2（SERCA2）和肌动蛋白以Western blotting为特征。数据代表三个独立实验；选定的单个菌落用数字表示。(C类)用20μg ml在时间0处理后的存活率⁻¹表达InsP的DT40细胞的抗BCR抗体（抗IgM）_三有（红色开圆圈）或无（红色填充圆圈）Bcl-x的R亚型_L（左）和InsP_三带有（黑色开口钻石）或不带（黑色填充钻石）Bcl-x的R-KO电池_L（左）.时间0标准化的数据表示至少三个单独试验的平均值±SEM，一式三份。星号表示P（P）<0.05（*）或P（P）<0.001（**），72和96小时时间点的方差分析。使用第二组克隆获得了类似的结果[参见支持信息（SI）图6].

Bcl-x的影响_L（左）在InsP上_三R Isoform单通道选通。

以前的膜片钳研究证明Bcl-x_L（左）提高了InsP的灵敏度_三R至低浓度InsP_三(29). 然而，这些研究是针对内源性InsP进行的_三来自Sf9昆虫细胞系的R通道，被认为只表达一种亚型。这一事实提出了两个重要问题：Bcl-x的功能效应_L（左）无脊椎动物和哺乳动物通用InsP_三R通道和can Bcl-x_L（左）不同哺乳动物InsP的差异调节_三R亚型？为了解决这些问题，单一InsP的活动_三通过膜片钳核电生理记录R通道(37)从同种型特异性InsP中分离_三R表达的DT40细胞系。InsP公司_三在饱和（10μM）[InsP存在的情况下首次观察到R通道活性_三]和2μM Ca²⁺，期望引发最大开放概率的条件(P（P）_o个) (38). 在所有三种通道亚型中都观察到稳健的门控，尽管平均P（P）_o个每种亚型都不同(图3A类). 正如预期的那样，当移液管[InsP_三]减少至1μM，符合[InsP_三]通道选通的依赖性(38). 尽管绝对值不同P（P）_o个单个InsP之间的值_三R通道亚型，加入纯化重组人Bcl-x的移液管溶液_L（左）【rBcl-x】_L（左）（1μM）；SI图7]1μM InsP激活的门控显著增加_三在所有三种亚型中增加5到10倍(图3B类).

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图3。

Bcl-x公司_L（左）增加每个InsP的单通道活性_三R亚型对低[InsP的反应_三]. (A类)1、2和3型InsP的典型单通道记录_三存在饱和（10μM）或过饱和（1μM）时的R[InsP_三]在没有或存在重组Bcl-x的情况下_L（左）（1μM；rBcl-x_L（左）). 保持电位为40 mV，向上偏转表示向开放状态过渡；移液管²⁺]为2μM。通道平均值±SEMP（P）_o个每种条件下为：10μM InsP_三（类型1，0.108±0.04；n个=9），（类型2，0.552±0.12；n个=5），（类型3，0.713±0.09；n个= 4); 1μM InsP_三（类型1，0.013±0.003；n个=7），（2型，0.021±0.01；n个=6），（类型3，0.052±0.01；n个= 6); 1μM检查_三+1μM rBcl-x_L（左）（类型1，0.131±0.06；n个=6），（类型2，0.105±0.02；n个=3），（类型3，0.354±0.08；n个= 5). (B类)Bcl-x作用的标准化总结_L（左）上P（P）_o个1、2和3类InsP_三R.归一化前进行统计分析；星号表示P（P）<0.05（*）或P（P）<0.01（**），未成对学生吨测试。

Bcl-x的影响_L（左）–InsP公司_三ER-Ca上的R等形相互作用²⁺平衡与钙²⁺信号发送。

这些单通道数据证实Bcl-x_L（左）在功能上与所有哺乳动物亚型相互作用，扩展了先前对Bcl-x之间生物化学相互作用的观察_L（左）和所有三只大鼠InsP_三R亚型(29). 为了确定这些相互作用对体内[加利福尼亚州²⁺]_我发送信号。首先，Ca²⁺ER的含量通过[Ca增加的单细胞成像来评估²⁺]_我对钙的急性抑制作出反应²⁺thapsigargin对内质网的吸收(29) (图4A类). 根据该技术评估，该技术间接测量ER-Ca²⁺在表达1型和3型通道亚型的细胞中，细胞池大小相似，而在表达2型通道亚型态的细胞中则有所减少。Bcl-x公司_L（左）表达对thapsigargin释放Ca无影响²⁺表达1型或2型亚型的细胞池，而钙²⁺表达3型通道亚型的细胞的反应减少约30%（总结如下图4B类).

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图4。

Bcl-x的影响_L（左）与InsP的互动_三内质网和细胞质钙上的R亚型²⁺监管。(A类)描述单个电池[Ca的典型记录²⁺]_我在缺乏细胞外钙的情况下对应用1μM他普司加菌素（TG）的反应²⁺在类型1、2和3 InsP中_三R-表达的DT40细胞与Bcl-x共存_L（左）（红色）或单独的矢量（黑色）。每个记录道代表图像区域内30个单元格的平均值。使用的DT40细胞克隆与凋亡检测中使用的细胞克隆相同。(B类)峰值总结[Ca²⁺]_我对TG的反应。从至少三份独立的盖玻片收集的数据代表不少于90个细胞的平均±SEM。星号表示P（P）<0.001（***），学生未成对吨测试。(C类)典型单电池[Ca²⁺]_我5μg ml的瞬态响应⁻¹InsP中的抗BCR抗体（抗IgM）_三表达1型、2型或3型R的DT40细胞与Bcl-x共存_L（左）（红色）或单独矢量（黑色）。(D类)摘要数据表示多个试验中至少40个细胞的峰值振幅（平均值±SEM）。星号表示P（P）<0.001（***），学生未成对吨测试。

因为BCR结扎通过InsP诱导DT40细胞凋亡_三R依赖性途径，我们接下来检测了[Ca²⁺]_我响应抗IgM饱和浓度的信号。在所有三个InsP中_三R异构体表达细胞系，抗IgM诱发振荡[Ca²⁺]_我叠加在初始瞬态响应上的信号(图4C类). 初始峰值[Ca的振幅²⁺]_我表达1型或2型亚型的细胞反应相似。相反，初始[Ca的振幅²⁺]_我3型表达细胞的反应几乎高出2倍(图4D类). Bcl-x公司_L（左）表达对初始[Ca的振幅没有影响²⁺]_我表达1型或2型InsP的细胞的反应_三R亚型，而[Ca的峰值振幅²⁺]_我在表达3型的细胞中短暂性减少(图4 C类和D类)有趣的是，这与观察到的Bcl-x一致_L（左）-诱导可释放ER-Ca总量减少²⁺在3型表达细胞中特异性聚集。

我们之前证明了Bcl-x_L（左）表达增加了自发性InsP的概率和频率_三R-依赖[Ca²⁺]_我静止野生型DT40细胞的振荡(29). 这种效应归因于观察到的Bcl-x_L（左）-介导的InsP敏感性增加_三R通道至低水平InsP_三可能存在于未经刺激的细胞中。因为Bcl-x_L（左）在低[InsP存在的情况下，增加所有三种大鼠通道亚型的单通道活性_三] (图3)，我们假设类似的自发InsP_三R依赖[Ca²⁺]_我Bcl-x中会出现信号_L（左）-表达哺乳动物InsP_三R异构体特异性DT40细胞。Bcl-x公司_L（左）表达增加了自发[Ca的频率²⁺]_我表达1型、2型或3型InsP的细胞中的振荡_三R亚型(图5 A类和B类)并增加了自发[Ca²⁺]_我表达2型或3型亚型的细胞中的振荡(图5C类). 相反，Bcl-x_L（左）对[Ca的平均振幅没有影响²⁺]_我峰值或振幅分布（未显示数据）。这些结果表明，三种哺乳动物中任何一种InsP的表达_三R通道亚型分别重述了野生型DT40细胞的观察结果。此外，目前的观察结果扩展了Bcl-2依赖性[Ca增加的其他报道²⁺]_我阈下激动剂刺激的振荡频率(29–31).

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图5。

Bcl-x公司_L（左）调节自发[Ca²⁺]_我振荡。(A类)显示自发[Ca的代表性痕迹²⁺]_我1、2或3型InsP中的振荡_三R-表达的DT40细胞与Bcl-x共存_L（左）（红色）或单独矢量（黑色）。(B类和C类)频率差异(B类)和振荡电池数量(C类)仅矢量和Bcl-x之间的（平均值±SEM）_L（左）-表达细胞。数据来自至少三份独立的投保单。星号表示P（P）<0.001（***），学生未成对吨测试。

讨论

ER被认为通过其作为主要钙的作用而促进细胞凋亡²⁺细胞中的储存细胞器(34). 生理InsP_三R依赖钙²⁺由于内质网和线粒体紧密结合，信号冲击线粒体，从而确保有效钙²⁺两个细胞器之间的转移(25,39,40). 越来越多的证据表明，InsP_三R介导的钙²⁺在存在凋亡刺激的情况下转移到线粒体会导致线粒体膜完整性的丧失（综述见参考文献。17). 增强型InsP可能会在这一过程中提供积极反馈_三R活性对释放的细胞色素结合的反应c（c）进一步增强线粒体钙²⁺过载(41). 有人认为高水平的ER-Ca²⁺可能通过提供更多释放的钙使细胞对凋亡刺激敏感²⁺(42). 为了支持这种模式，降低ER[Ca的干预措施²⁺]减少线粒体钙²⁺摄取对细胞凋亡有保护作用(14).

尽管InsP的作用_三R作为促凋亡介质越来越受到重视，但对单个通道亚型的相对参与尚不清楚。在淋巴细胞中进行的反义敲除研究确定为3型(24)或类型1(23)InsP公司_三R作为细胞凋亡的关键介质。由于DT40-InsP中1型通道的表达恢复了凋亡敏感性，因此进一步暗示了1型通道_三如图所示，R-KO细胞，而具有抗caspase-3裂解的突变序列的通道表达(43,44)，尽管仍具有钙的功能²⁺-释放通道，不赋予细胞凋亡敏感性(45). 然而，其他研究结果表明，InsP能力可能存在功能冗余_三R亚型可增强细胞凋亡敏感性。例如，DT40细胞中每一个单独的鸡亚型的基因缺失表明，这三种亚型的丢失是最大限度的凋亡保护所必需的(26). 在CHO细胞的siRNA研究中也报告了一定程度的冗余；然而，由于3型病毒与线粒体共定位，它能更有效地使细胞对凋亡敏感(25). 为了直接评估每种哺乳动物通道亚型增强凋亡敏感性的能力，我们表达了大鼠1、2和3型InsP_三内源性InsP缺乏的DT40细胞中的R_三R和分离出的单个克隆在不同水平上稳定表达每个亚型。我们的结果表明，所有InsP_三R亚型在调节抗IgM诱导的B细胞凋亡的时间过程中显然同样有效。此外，InsP的程度_三R依赖性细胞凋亡敏感性增强与绝对InsP相关_三R表达水平。值得注意的是，2型和3型通道亚型均不包含1型通道中存在的半胱氨酸天冬氨酸酶切位点(44)然而，它们在本研究中具有类似的促凋亡作用。因为不同的细胞类型表达不同水平的每种通道亚型，这些通道亚型可以根据生理状态发生变化，一种特定亚型相对于其他亚型的细胞类型特异性绝对表达水平可能解释了先前报道的一种特定亚型的显性效应。

抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-x_L（左）都被报道通过降低钙在ER中发挥作用²⁺内容(34). 之前，我们确定了Bcl-x这种作用的分子基础_L（左）通过证明InsP增加_三Bcl-x中的R活性_L（左）-表达细胞扰乱了ER泵-泄漏平衡，导致钙减少²⁺内容(29). 我们现在显示每个哺乳动物的InsP_三R在功能上与Bcl-x相互作用_L（左）增加InsP_三灵敏度，使每个信道在较低[InsP时具有较高的开放概率_三]. 因此，可以预期，这种效应会增加细胞对刺激的反应，否则刺激会太弱。我们观察到Bcl-x_L（左）表达增加了自发[Ca的频率²⁺]_我表达每个哺乳动物InsP的细胞中的振荡_三R亚型和增加自发[Ca²⁺]_我表达2型或3型亚型的细胞中的振荡。然而，这增强了自发InsP_三Bcl-x中的R活性_L（左）-表达细胞导致内质网钙减少²⁺仅在表达3型通道亚型的细胞中含量。由于我们尚未量化不同细胞系中每个通道亚型的绝对量，因此尚不清楚3型通道的这种作用是否对该亚型具有特异性，或者它是否反映了可能比其他两种亚型更高的表达水平。如果是前者，则可能是Bcl-2/Bcl-x的表达_L（左）在主要表达1型或2型通道亚型的细胞中，ER[Ca²⁺]这种可能性可以解释一些不同的公布结果(35). 然而，我们的结果表明，尽管所有InsP_三DT40细胞中表达的R亚型有助于增强自发钙²⁺Bcl-x存在下的释放活性_L（左），只有3型通道的活性足以扰动稳态ER-Ca²⁺泵–导致重置的泄漏平衡，ER Ca降低²⁺内容。值得注意的是，3型通道的这一特性与其在Bcl-x存在下的3倍更高的单通道开放概率相关_L（左）与其他两种亚型相比(图3图例）。然而，从单通道行为到全细胞反应的这种简单推断是有风险的，因为[Ca²⁺]_我生成的信号体内按督察_三R活性取决于通道密度，而通道密度在本研究中未在不同亚型之间进行控制，并且受到复杂的变构调节(5). 然而，这里重要的是，尽管这三个InsP_三当用Bcl-x表达时，R亚型提供了抗凋亡作用_L（左），只有3型通道降低了ER[Ca²⁺].

有强有力的证据表明Bcl-2/Bcl-x_L（左）表达与ER-线粒体Ca减少有关²⁺转移（有关最新审查，请参阅参考文献。17和34). 此外，可独立于Bcl-2降低ER含量的演习(42)或恢复ER[Ca²⁺]在表达Bcl-2的细胞中(15)调节细胞凋亡抵抗。尽管这些观察结果支持一个模型，其中Bcl-2/Bcl-x_L（左）通过降低ER-Ca增强细胞凋亡抵抗²⁺水平，该模型不支持不变的ER Ca观察²⁺许多研究中Bcl-2介导的细胞凋亡保护期间的水平(35). 此外，我们现在报告，InsP_三R型1和2通道与Bcl-x相互作用_L（左）以一种与ER[Ca降低无关的方式给予ER-依赖性凋亡保护²⁺]. 因此，尽管降低了ER[Ca²⁺]可能提供凋亡保护，这种相关性的缺乏表明，它不是Bcl-x相互作用提供的凋亡抵抗的唯一机制，也可能不是最重要的机制_L（左）与督察_三R.如果未降低ER[Ca²⁺]，其他机制是什么？Bcl-x可能_L（左）ER[Ca的调节²⁺]在细胞凋亡期间，在决定死亡程序是否继续完成方面起着重要作用。另一方面，之前在比较野生型和InsP的研究中也显示了这一点_三InsP的R-KO DT40细胞_三Bcl-x的R通道调节_L（左）增加[Ca的频率²⁺]_我静止细胞中的振荡(29). 在目前的工作中，我们发现增强的自发[Ca²⁺]_我表达Bcl-x的细胞中出现峰值_L（左）是表达三种InsP的细胞的共同特征_三R亚型。事实上，只有这个过程与InsP始终相关_三R-Bcl-x型_L（左）-介导的细胞凋亡抗性。这些结果表明，增强的自发[Ca²⁺]_我信号转导可能是细胞凋亡抵抗的重要机制。转换InsP的机制_三R-Bcl-x型_L（左）-介导增强自发[Ca²⁺]_我凋亡抵抗的峰值尚不清楚。然而，[Ca的频率调制²⁺]_我信号已被证明可以调节大量钙²⁺-敏感靶点，包括转录因子(45–47). 哇巴因触发的InsP_三R介导的[Ca²⁺]_我振荡通过激活NF-κB增加凋亡保护(48). 因此，InsP_三R-Bcl-x型_L（左）-介导增强自发[Ca²⁺]_我尖峰可能通过调节转录活性和基因表达使细胞“适应”更具抗凋亡能力。InsP公司_三R-Bcl-x型_L（左）-介导的增强自发钙²⁺释放也可能是促进钙的有效机制²⁺以一种比触发线粒体通透性转变更适合刺激线粒体生物能量学的速度和幅度输送到线粒体。在这个模型中，增强的细胞生物能量学可能会增加细胞凋亡抵抗力(29,49).

总之，我们已经证明抗凋亡Bcl-x_L（左）与三种哺乳动物的InsP相互作用_三R亚型在单通道水平发挥功能，增加通道P（P）_o个针对低水平InsP_三当在InsP中单独表达时_三在缺乏Bcl-x的情况下，R缺陷的DT40细胞，这三种亚型都增强了凋亡敏感性_L（左）但在Bcl-x存在下增强细胞凋亡抵抗_L（左）表达两种InsP的细胞的共同生理特征_三R和Bcl-x_L（左）增强自发[Ca²⁺]_我发送信号。相反，ER管腔[Ca的减少²⁺]仅在3型InsP中观察到_三R表达细胞。我们得出结论，细胞凋亡抵抗的主要机制是由每种哺乳动物InsP的相互作用提供的_三R亚型通过增强低水平[Ca的机制²⁺]_我发出信号。

方法

补充材料

致谢

缩写

脚注

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