色谱试剂

背景

概述

色谱试剂是色谱分析中使用的一系列化学试剂,在分离、检测和量化样品中的各种成分方面起着关键作用。色谱分析是一种强大的分离技术,广泛应用于化学、生物、环境科学、药物分析等领域。
色谱分析,简称色谱,是一种物理或物理化学分离分析方法。它基于不同溶质(样品)之间的差异以及固定相和流动相之间的作用力(如分布、吸附、离子交换等)来实现分离。当两相相对运动时,每种溶质在两相中多次平衡,从而达到分离的目的。

概述

研究进展

色谱试剂的发展与色谱技术的发展密切相关。自20世纪初诞生以来,色谱技术经历了几个重要的发展阶段,每个阶段都伴随着色谱试剂的改进和创新。
1903年,俄罗斯植物学家米哈伊尔·茨维特发现了色谱现象,这就是色谱技术的起源。他用碳酸钙作为固定相,用水作为流动相来分离植物色素,这是最早的色谱试剂。
20世纪初,色谱技术开始区分为不同类型,如气相色谱(GC)、液相色谱(LC)、薄层色谱(TLC)等。因此,固定相和流动相的类型得到了扩展和标准化。随着化学合成技术和材料科学的进步,出现了更多类型的固定相和流动相。例如,硅胶和化学键合相(如C18、C8)的出现大大提高了液相色谱的分离效率和再现性。
20世纪末,色谱试剂开始大规模商业化生产,质量控制和标准化成为行业标准。这包括固定相的粒径和孔径的标准化,以及流动相溶剂的提纯和配制。
到目前为止,随着分析需求的多样化,色谱试剂也在不断创新。例如,为了提高分离选择性,手性固定相和特殊的离子液体作为流动相出现。为了提高检测灵敏度,已经开发了衍生试剂,可以将难以检测的成分转换为易于检测的形式。环境和安全考虑也推动了无有机溶剂或低有机溶剂色谱试剂的开发。

研究进展

色谱试剂的类型和功能

静止相:固定相是色谱柱的一部分,为样品中的组分提供了一个相互作用的表面。固定相可以是固体(例如硅胶、氧化铝)或液体(涂敷在固体载体上),也可以是凝胶或其他多孔材料。
流动相:流动相是携带样品通过色谱柱的液体或气体。在高效液相色谱法(HPLC)中,流动相通常是水和有机溶剂(如甲醇、乙腈)的混合物,其极性和组成可以根据分析目的进行调整。
洗脱液:洗脱液是流动相的一部分,用于洗脱和分离样品组分与固定相。洗脱液的选择对色谱分离的效果至关重要。
检测试剂:在一些色谱法中,如薄层色谱法(TLC),需要特定的检测试剂来可视化色谱斑点。这些检测试剂通常是与样品成分发生颜色反应的化学品。
衍生试剂:衍生试剂用于将样品的某些成分(例如氨基酸、糖)转换为更可检测的形式,以便进行色谱分析。
缓冲器:在离子交换色谱法(IEC)和其他需要pH控制的色谱法中,缓冲液用于保持流动相的pH稳定性,这会影响样品组分的分离。

色谱试剂的类型和功能

色谱法类型

高效液相色谱法(HPLC):这是色谱法的一个重要分支,也称为“高压液相色谱法”、“高速液相色谱”等。高效液相色谱因其分离效率高、分析速度快和应用范围广而被广泛应用。
气相色谱法:主要用于挥发性和半挥发性有机化合物的分析,特别是在环境监测、药物检测和石化产品分析中。
薄层色谱法(TLC):这是一种相对简单且经济的色谱技术,通常用于快速分析和纯度检测。
离子交换色谱法:主要用于分离离子化合物,如蛋白质、核酸和其他生物大分子。
亲和层析:利用生物分子之间的特定相互作用进行分离,常用于酶、抗体和其他生物活性物质的纯化。
凝胶渗透色谱法(GPC):主要用于测定聚合物化合物的分子量分布和聚合物表征。
超高效液相色谱法:UHPLC比HPLC具有更高的分辨率、速度和灵敏度。
毛细管电泳(CE):虽然不是传统意义上的色谱法,但它也是一种利用电场力分离的分析技术,有时被归类为色谱法技术之一。
多维色谱法:结合两种或多种色谱技术以提高分离效率和分析能力。

色谱法的类型

我们提供的服务

Creative BioMart包含各种规模的基质的所有不同类型的色谱,包括:交联琼脂糖、交联纤维素、葡聚糖、甲基丙烯酸和聚苯乙烯。根据不同的色谱方法提供相应的色谱试剂,您可以根据具体的方法分类找到您需要的试剂。请联系我们了解更多信息。

我们提供的服务

亲和层析:亲和层析用于分离具有特定生物相互作用的物质,如酶及其底物、抗原和抗体。关键在于固定相的选择,通常使用具有特定亲和力的配体,如蛋白质、核酸、小分子等。固定相通常与柱的基质化学结合。
离子交换色谱法:基于分子间电荷相互作用的离子交换色谱法广泛用于蛋白质、核酸和其他带电分子的纯化。固定相是带电的离子交换树脂或化学键合的离子交换剂,例如强酸性阳离子交换树脂或强碱性阴离子交换树脂。
凝胶过滤色谱法:凝胶过滤色谱用于根据分子大小进行分离,通常用于脱盐、蛋白质纯化和聚合物分子量测定。固定相是多孔凝胶颗粒,如聚丙烯酰胺或葡聚糖。
多模色谱法:多模色谱提供了多种分离机制,适用于复杂样品的纯化和分析。固定相结合了多种相互作用模式,如疏水、离子交换和亲和。
疏水相互作用色谱法疏水相互作用色谱法是基于分子间疏水相互作用的分离,通常用于蛋白质和肽的纯化。固定相具有疏水性质,例如疏水聚合物或化学键合的疏水基团。
吸附色谱法吸附色谱法是一种基于分子间吸附的分离方法,适用于非极性到中等极性化合物的纯化。固定相是一种吸附材料,如活性炭、硅胶或氧化铝。
预耦合磁珠:预耦合磁珠用于快速简便的样品纯化和捕获,特别是用于捕获生物样品中的特定蛋白质、细胞或核酸。磁珠的表面预先偶联到特定配体,例如抗体、蛋白质A/G、生物素或寡核苷酸。

案例研究

案例研究1:m7GTP琼脂糖(m7GTP-001A型)

脆性X相关蛋白-1(FXR1)基因在卵巢癌患者中高度扩增,这种扩增与FXR1mRNA和蛋白的表达增加有关。FXR1的表达直接关系到癌细胞的生存和增殖。表面翻译感应(SUnSET)实验表明,FXR1增强了癌细胞的整体翻译。反相蛋白阵列(RPPA)显示cMYC是FXR1的关键靶点。在机械上,FXR1与cMYC的3'非翻译区(3'utr)中的富金元素(ARE)结合并稳定其表达。此外,FXR1中的RGG结构域与eIF4A1和eIF4E蛋白质相互作用。FXR1的这两种相互作用导致cMYC mRNA的环化,并促进真核翻译起始因子向翻译起始位点的募集。

图1.用对照siRNA或FXR1 siRNA转染HeyA8细胞48小时,用m7GTP孵育裂解产物(5′mRNA帽类似物)。

(贾斯敏·乔治,2021)
图1.用对照siRNA或FXR1 siRNA转染HeyA8细胞48小时,并用m7GTP(5′mRNA帽类似物)培养裂解产物。

案例研究2:蛋白质G琼脂糖高流动树脂(COP28号机组)

人类T细胞群中与年龄相关的变化是免疫衰老的重要因素。特别是,终末分化CD8+效应记忆CD45RA+TEMRA细胞及其亚群具有细胞衰老的特征,在老年人中积累,在与年龄相关的慢性炎症疾病中增加。对65岁以上个体的详细T细胞分析表明,CD8+TEMRA人群中存在较高的诱导间变异。CD8+TERA比值与巨细胞病毒(CMV)抗体水平呈正相关,但与年龄无关。对90多种炎症蛋白的分析表明,血浆TRANCE/RANKL水平与几个分化的t细胞群相关,包括CD8+TEMRA及其CD28-亚群。鉴于CD8+TEMA细胞作为免疫衰老生物标志物的强大潜力,研究人员使用亚硫酸盐深度扩增子测序将其在流式细胞术中的频率与CpG位点甲基化水平相匹配,并开发了一个计算模型来预测CD8+TEMA细胞在全血基因组DNA中的比例。

图2.CMV阳性和阴性个体的抗p150d1和p50d2抗体水平如下所示荧光素酶活性的发光单位(LU)作为箱线图。

(Ahto Salumets,2022)
图2.CMV阳性和阴性个体中的抗-p150d1和p50d2抗体水平显示为荧光素酶活性的发光单位(LU),如箱线图所示。

案例研究3:硫丙基琼脂糖(硫代-001A)

蛋白质棕榈酰化是发生在膜-细胞质界面的细胞过程,由DHHC酶家族成员协调,在调节各种细胞功能中起关键作用。流感病毒M2蛋白在膜附近的两亲螺旋上酰化,可作为模型研究控制酰化的复杂信号及其与同源酶DHHC20的相互作用。这项研究表明,改变两亲螺旋的生物物理性质,特别是通过缩短或破坏它,可以显著降低M2棕榈糖基化,但并不能完全消除这一过程。有趣的是,与野生型M2相比,DHHC20对某些M2突变体的亲和力增强。分子动力学模拟揭示了螺旋氨基酸与DHHC20的催化DHHC和TTXE基序之间的相互作用。结果表明,M2与DHHC20的结合虽然没有高度特异性,但通过必要的接触介导,并可能触发脂肪酸的转移。

图3 S-酰化:M2 wt和突变体在293个T细胞中表达。

(孟晓荣,2023)
图3 S-酰化:M2 wt和突变体在293个T细胞中表达。

优势

  • 产品范围广泛:由于色谱技术的广泛应用,我们提供各种不同类型的色谱试剂,如气相色谱试剂、高压液相色谱试剂和薄层色谱试剂等,以满足不同客户的需求。
  • 严格的质量控制:我们将严格监控产品质量,确保试剂的纯度和稳定性,以满足高标准的实验要求。
  • 技术创新:我们专注于色谱试剂的开发,从开发团队到支持团队,从生产设备到检测方法,我们保证做到最好。

常见问题解答

  • Q: 色谱试剂的纯度和质量是多少?

    A: 为了确保色谱试剂的质量和纯度,通常会进行严格的质量控制和测试,包括吸光度、水分含量、金属离子含量、非挥发性物质含量等的检测,以确保试剂符合特定的色谱分析要求。

  • Q: 当你遇到色谱试剂问题时,你能提供技术支持或指导吗?

    A: 我们提供从生产到使用的各种服务,如文本资料和在线支持,可以帮助客户更好地理解和使用色谱试剂,确保色谱分析的准确性和重复性,提高用户满意度和产品价值。

工具书类

  • 乔治·J。;等。RNA-结合蛋白FXR1通过向翻译起始位点招募eIF4F复合体来驱动cMYC翻译。单元格代表. 2021;37(5):109934.
  • 沙龙A。;.人类血液中免疫基因CD8+TEMRA细胞的表观遗传量化。老化细胞. 2022;21(5):e13607。
  • 孟十。;两亲性螺旋和跨膜区在流感病毒M2蛋白高效酰化中的作用。科学代表. 2023;13(1):18928.

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