下拉分析

一般来说,蛋白质与伴侣或作为大型多蛋白复合物的组成部分发挥作用。了解这些相互作用对于研究蛋白质的生物途径和细胞功能至关重要。下拉分析是一种相对简单、直接的方法来识别潜在的蛋白结合伙伴。该方法还广泛用于确认已知的相互作用和绘制相互作用位点。下拉法依赖于将融合蛋白固定在用作固相的珠上。当靶蛋白结合珠被混合并允许与细胞裂解物相互作用时,与诱饵蛋白结合的猎物蛋白可以被捕获并“拉下”。猎物蛋白质可以来自多种来源,包括细胞裂解物、无细胞表达系统和提取的蛋白质。通过随后的洗涤和SDS-PAGE、Western Blot或质谱分析,可以确认预测的相互作用,并可以发现以前未知的相互作用。

下拉分析

对于那些对了解蛋白质功能感兴趣的研究人员来说,第一步通常是确定蛋白质在系统内形成何种相互作用,从而确定相关的生物途径。Creative BioMart现在提供了许多识别蛋白质-蛋白质相互作用的方法,包括生物物理、生物化学和遗传学方法,其中下拉分析与质谱联用需要简单且完善的程序,并且与大多数其他方法相比成本较低。我们还提供生物素相关下拉分析,这是一种定量方法,用于分析蛋白质后组学研究中蛋白质的功能特征。我们的分析程序经过了优化,但也可以根据您的项目要求进行调整。请随时向我们发送询盘以进行更多讨论。

下拉分析

亲和珠选项:

  • 谷胱甘肽S-转移酶(GST)
  • 六氢istidine(6xHis)
  • 麦芽糖结合蛋白(MBP)
  • 抗生物素

下拉分析的应用:

  • 初步筛选以确定新的蛋白质相互作用。
  • 确认其他技术发现的现有蛋白质相互作用。
  • 分离蛋白质复合物。
  • 生物素相关下拉分析提供了关于结合到珠子上的相互作用蛋白质相对数量的额外定量信息。

参考:

  1. 川野洋二、川野高子、岛本高子。动植物中Rho家族GTPase依赖性免疫。前植物科学。2014年10月14日;5点522分。数字对象标识代码:10.3389

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