主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆抗体[EPR19147]对TNF-α 适用于:WB、IP、ELISA、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:老鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR19147]至TNFα -
宿主 兔子 -
特异性 我们建议使用ab183218在Western blot中检测TNF-α,因为它比 约215188 在大多数样品中检测TNF-α需要刺激。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠,人类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:TPA预处理的THP-1全细胞裂解液、TPA预治疗的RAW 264.7全细胞裂解物和U937(人类组织细胞淋巴瘤细胞系)细胞裂解液。 ICC/IF:RAW264.7细胞。 IP:TPA预处理的THP-1(人单核细胞白血病细胞系)全细胞裂解物。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR19147(电子顺磁共振19147) -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 与TNFRSF1A/TNFR1和TNFRSF1B/TNFBR结合的细胞因子。主要由巨噬细胞分泌,可诱导某些肿瘤细胞系的细胞死亡。 它是一种通过直接作用或刺激白细胞介素-1分泌而引起发热的强效热原,与恶病质的诱导有关。在某些条件下,它可以刺激细胞增殖和诱导细胞分化。 -
疾病相关 TNF的遗传变异是银屑病关节炎(PSORAS)易感性的一个原因[MIM:607507]。 PSORAS是一种与银屑病相关的炎症性、血清阴性关节炎。 这是一种异质性疾病,从轻微的非破坏性疾病到严重的进行性侵蚀性关节病。 银屑病关节炎有五种类型:以手指或脚趾小关节为主的不对称性少关节炎; 涉及四肢关节的不对称性关节炎; 对称性多发性关节炎,其特征是手、腕、踝和脚可能出现类风湿样改变; 多发性关节炎,这是一种罕见的畸形和破坏性疾病; 骶髂关节和脊柱关节炎(银屑病性脊柱炎)。 -
序列相似性 属于肿瘤坏死因子家族。 -
翻译后修饰 可溶性形式来源于通过蛋白水解过程形成的膜形式。 膜形式,而不是可溶性形式,在丝氨酸残基上磷酸化。 膜形式的去磷酸化通过与可溶性TNFRSF1A/TNFR1结合而发生。 O-糖基化; 聚糖包含半乳糖、N-乙酰半乳糖胺和N-乙酰神经氨酸。 -
细胞定位 分泌和细胞膜。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 APC1抗体 APC1蛋白抗体 Cachectin抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗-TNFα抗体[EPR19147](ab183218) 车道1: 野生型THP-1 Brefeldin A( 约120299 )经处理的(5µg/ml,4小时)细胞裂解物 车道2: 野生型THP-1 LPS处理(100 ng/ml,16 h)和Brefeldin A( 约120299 )处理过的(5µg/ml,4h)细胞裂解物 3号车道: TNFα基因敲除THP-1布雷费尔丁A( 约120299 )处理过的(5µg/ml,4h)细胞裂解物 车道4: TNFα敲除物THP-1 LPS处理(100 ng/ml,16 h)和布雷费尔丁A( 约120299 )处理过的(5µg/ml,4h)细胞裂解物 车道5: U937 PMA治疗(10 mM,2天)加上16小时不治疗和布雷费尔丁A( 约120299 )处理过的(5µg/ml,4h)细胞裂解物 车道6: U937 PMA处理(10 mM,2天)和LPS处理(1µg/ml,16小时)加Brefeldin A( 约120299 )处理过的(5µg/ml,4h)细胞裂解物 每车道30µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 观察到的波段大小: 26千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-6车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在26 kDa时观察到ab183218。 红色-加载控制 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55 kDa时观察到。 Western blot显示ab183218与THP-1野生型细胞中的TNF-α反应,在TNF敲除样品中观察到信号丢失。 对野生型和TNF敲除的THP-1细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在用ab183218和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在4°C下过夜,分别以1/1000和1/20000稀释。 印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye)孵育 ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
用100ng/ml LPS处理7小时的RAW264.7(小鼠Abelson小鼠白血病病毒诱导的肿瘤巨噬细胞)的免疫细胞化学/免疫荧光分析,以及用纯化的ab183218以1/5000稀释度(0.09µg/ml)标记TNF-α的最后3小时细胞的1µg/ml BFA。 细胞固定在4%多聚甲醛中,并用0.1%Triton X-100渗透。 用Ab195889抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor®594)1/200(2.5µg/ml)对细胞进行复染。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor®488, 约150077 )以1/1000稀释度(2µg/ml)作为二级抗体。 DAPI用作核染色。 用PBS代替一级抗体作为二级抗体对照。 -
ELISA使用0.1至1000 ng/ml之间的ab183218检测TNFα肽。 次要使用的是碱性磷酸酶亲和纯山羊抗狂犬病IgG(H+L)1/2000。 -
所有车道: 1/2000稀释度的抗-TNFα抗体[EPR19147](ab183218) 车道1: TPA预处理THP-1(人单核细胞白血病细胞系)全细胞裂解物 车道2: 用100 ng/ml LPS处理TPA预处理的THP-1(人单核细胞白血病细胞系)全细胞裂解液7小时 3号车道: TPA预处理的THP-1(人单核细胞白血病细胞系)全细胞裂解物用100 ng/ml LPS处理4小时,然后添加1µg/ml BFA处理3小时 每条泳道20µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 观察到的波段大小: 26千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 3分钟 阻塞/稀释缓冲液: 5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-TNFα抗体[EPR19147](ab183218) 车道1: TPA预处理的RAW 264.7(Abelson小鼠白血病病毒转化的小鼠巨噬细胞系)全细胞裂解物 车道2: TPA预处理的RAW 264.7(用Abelson小鼠白血病病毒转化的小鼠巨噬细胞系)全细胞裂解物用100 ng/ml LPS处理7小时 3号车道: TPA预处理的RAW 264.7(用Abelson小鼠白血病病毒转化的小鼠巨噬细胞系)全细胞裂解物用100 ng/ml LPS处理4小时,然后添加1µg/ml BFA处理3小时 每条泳道20µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 观察到的波段大小: 26,33千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 3秒 阻塞/稀释缓冲液: 5%NFDM/TBST。 33kDa带可能是文献中描述的二聚体中间形式(PMID:9933416)。 -
用100 ng/ml LPS处理0.35 mg TPA预处理的THP-1(人单核细胞白血病细胞系)全细胞裂解液4小时,然后用ab183218以1/40稀释度添加1μg/ml BFA 3小时,从中免疫沉淀TNF-α。 用ab183218在1/1000稀释度下对免疫沉淀物进行Western blot。 IP检测试剂VeriBlot(HRP)( 阿布131366 ),用于1/1000稀释度的检测。 车道1: TPA预处理的THP-1全细胞裂解物用100 ng/ml LPS处理4小时,然后添加1μg/ml BFA 3小时10µg(输入)。 车道2: ab183218 IP在TPA预处理的THP-1全细胞裂解液中,用100 ng/ml LPS处理4小时,然后添加1μg/ml BFA处理3小时。 3号车道: 兔IgG,单克隆[EPR25A]-同位素对照( 约172730 )用100 ng/ml LPS处理4小时的TPA预处理THP-1全细胞裂解液代替ab183218,然后加入1μg/ml BFA处理3小时。 封闭稀释缓冲液和浓度: 5%NFDM/TBST。 暴露时间: 1秒钟。
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
合格证书
文献 (104)
兴D 等。 TNFAIP3对衰老炎症微环境下Leydig细胞睾酮生成的保护作用。 老年老年医学 117:105274 (2024). 公共医学:37995648 金·H 等。 使用炎症反应水凝胶有效保护光感受器,以减轻视网膜外变性。 NPJ Regen Med公司 8:68 (2023). 公共医学:38097595 彭克 等。 迷迭香酸通过激活Sirt1/PGC-1α通路来减轻线粒体损伤,从而防止脂多糖诱导的心脏功能障碍。 临床实验药理学 50:218-227 (2023). 公共医学:36350269 王平(Wang P) 等。 N-乙酰-L-半胱氨酸通过抑制氧化应激改善妊娠期糖尿病。 生物技术应用生物化学 70:1128-1136 (2023). 公共医学:36517965 张杰 等。 生物激发的聚多巴胺纳米粒子是有效的抗氧化和抗炎增强剂,可对抗紫外线诱导的皮肤损伤。 纳米生物技术杂志 21:354 (2023). 公共医学:37775761