主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 兔单克隆[E343]至S6K1 适用于:Flow Cyt(Intra)、ICC/IF、WB、IHC-P、IP 敲除已验证 反应:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [E343]至S6K1 -
宿主 兔子 -
特异性 该抗体检测αI和αII亚型。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 人S6K1 aa 1-100内的合成肽(N末端)。 确切的顺序是专有的。 -
阳性对照 WB:WT HAPI、MCF7和HEK293细胞裂解物。 ICC/IF:HeLa细胞。 流式细胞周期(内部):HeLa、293T、Neuro-2a和C6细胞。 IHC-P人乳腺癌、小鼠睾丸和大鼠脑组织。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 交付后,将等分样品保存在-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:49%PBS、50%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 E343型 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制
应用
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靶标
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功能 在蛋白质合成、细胞增殖、细胞生长、细胞周期进展和细胞存活的调节中整合营养素和生长因子信号。 mTOR信号通路的下游效应器。 磷酸化特异性核糖体蛋白S6对胰岛素或几种有丝分裂原的反应。 在翻译起始阶段,在营养物质耗尽的条件下,非活性形式与eIF-3复合物结合。 有丝分裂刺激导致eIF-3复合物的磷酸化和解离,而自由活化形式可以磷酸化包括EIF4B在内的其他翻译靶点。 通过在“Ser-67”磷酸化PDCD4并将其靶向降解,促进蛋白质合成。 磷酸化RICTOR,导致哺乳动物雷帕霉素复合物靶点2(mTORC2)信号的调节; 可能在“Thr-1135”磷酸化RICTOR。 多丝氨酸残基磷酸化IRS1与胰岛素抵抗; 可能在“Ser-270”处磷酸化IRS1。 TNF-α诱导的IRS-1降解所需。 磷酸化EEF2K以响应IGF1并抑制EEF2K活性。 “Ser-99”磷酸化BAD以响应IGF1,导致BAD失活并抑制BAD诱导的凋亡。 磷酸化线粒体RMP导致RMP:PPP1CC复合物分离; 可能在“Ser-99”磷酸化RMP。 游离线粒体PPP1CC可以在Thr-412处对RPS6KB1进行去磷酸化,这可能是RPS6KC1抗凋亡功能的负反馈机制。 在导致TSC1-TSC2复合物损失的条件下,将GSK3B在“Ser-9”处磷酸化。 磷酸酯类POLDIP3。 -
组织特异性 广泛表达。 -
序列相似性 属于蛋白激酶超家族。 AGC Ser/Thr蛋白激酶家族。 S6激酶亚家族。 包含1个AGC-激酶C末端结构域。 包含1个蛋白激酶结构域。 -
结构域 自抑制结构域被认为可以阻断AGC-激酶C末端结构域和激活环内的磷酸化。 TOS(TOR信号)基序对于mTORC1的激活至关重要。 -
翻译后修饰 Thr-412的磷酸化由mTORC1调节。 该位点的磷酸化由激动剂依赖的自身磷酸化机制维持。 -
细胞定位 细胞质; 核心。 细胞质和细胞连接>突触>突触体。 线粒体外膜。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 6198 人类 Entrez基因: 72508 鼠标 Entrez基因: 83840 老鼠 Omim公司: 608938 人类 瑞士保护银行: 第23443页 人类 瑞士保护银行: Q8BSK8号机组 鼠标 瑞士保护银行: 第67999页 老鼠 尤尼金: 463642 人类
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别名 70kDa核糖体蛋白S6激酶1抗体 KS6B1_HUMAN抗体 p70α抗体
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图片
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车道1: 野生型HAP1细胞裂解物(20µg) 车道2: S6K1敲除HAP1细胞裂解物(20µg) 3号车道: MCF7细胞裂解物(20µg) 车道4: HEK293细胞裂解物(20µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在68 kDa下观察到ab32529。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 当使用S6K1敲除样品以及其他交叉反应带时,ab32529被证明能够识别S6K1。 对野生型和S6K1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab32529和 约8245 (GAPDH的负荷控制)分别稀释1/5000和1/10000,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
所有车道: 0.004µg/ml时的抗S6K1抗体[E343](ab32529)(纯化) 车道1: Neuro2a(小鼠神经母细胞瘤成神经细胞)全细胞裂解物 车道2: 小鼠小脑裂解物 3号车道: C6(大鼠胶质瘤胶质细胞)全细胞裂解物 车道4: 大鼠小脑 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )1/20000稀释(山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合) 预测的带宽大小: 59千帕 观察到的波段大小: 70千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 3分钟 使用的阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
用ab32529在1/500稀释度(4.4μg/mL)下标记S6K1的人乳腺癌组织的免疫组织化学分析。 使用的二级抗体是ImmunoHistoProbe一步法HRP聚合物(随时可用)。 二级抗体仅控制PBS,而非一级抗体。 抗原检索通过热介导使用 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 组织用苏木精复染。 -
C6细胞(大鼠胶质瘤胶质细胞)的免疫细胞化学/免疫荧光分析用ab32529标记S6K1,稀释度为1:200,11.1µg/ml。细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%Triton X-100渗透。 二级抗体山羊抗兔IgG(Alexa Fluor®488, 约150077 ). 用1:200,2.5μg/ml的Ab195889抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor®594)对细胞进行联合染色。 细胞核用DAPI(蓝色)复染。 对照:1:1000稀释。 -
用ab32529在1/500稀释度(4.4μg/mL)下标记S6K1的小鼠睾丸组织的免疫组织化学分析。 使用的二级抗体是ImmunoHistoProbe一步法HRP聚合物(随时可用)。 二级抗体仅控制PBS,而非一级抗体。 抗原回收是使用热介导的 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 用苏木精对组织进行复染。 -
在1/500稀释度(4.4μg/mL)下用ab32529标记S6K1的大鼠脑组织的免疫组织化学分析。 使用的二级抗体是ImmunoHistoProbe一步法HRP聚合物(随时可用)。 二级抗体仅控制PBS,而非一级抗体。 抗原检索通过热介导使用 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 用苏木精对组织进行复染。 -
用ab32529在1:200,11.1μg/ml稀释液中标记NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)的免疫细胞化学/免疫荧光分析。细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%Triton X-100渗透。 二级抗体山羊抗兔IgG(Alexa Fluor®488, 约150077 ). 细胞以1:200稀释度、2.5μg/ml与Ab195889抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor®594)共同染色。 细胞核用DAPI(蓝色)复染。 对照:1:1000稀释。 -
以1:200,11.1 ug/ml的稀释度用ab32529标记S6K1的MCF 7(人乳腺癌上皮细胞)的免疫细胞化学/免疫荧光分析。细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%Triton X-100渗透。 次级抗体羊抗兔IgG(Alexa Fluor®488, 约150077 ). 细胞以1:200稀释度、2.5μg/ml与Ab195889抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor®594)共同染色。 细胞核用DAPI(蓝色)复染。 对照:1:1000稀释。 -
HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)的免疫细胞化学/免疫荧光分析,以1/500的稀释度用ab32529标记S6K1。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%tritonX-100渗透 约150077 以at1/1000为二级抗体。 细胞核用DAPI(蓝色)复染。 共聚焦图像显示HeLa细胞系上的细胞层染色。 -
重叠直方图显示用ab32529染色的HeLa细胞(红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育细胞,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(ab32529,1/1000稀释)孵育30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗兔IgG(H&L)( 约150077 )在22°C下以1/2000稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)(0.1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器采集了超过5000个事件。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (96)
高J 等。 GDF11和TET2之间的相互调节可防止间充质干细胞的衰老。 J细胞生理学 238:2827-2840 (2023). 公共医学:37801347 王四杰 等。 小鼠模型中区分心肌梗死和绞窄性死亡的氨基酸代谢组学特征。 科学代表 13:14999 (2023). 公共医学:37696922 徐Z 等。 Sapanisertib通过调节Wnt5a/mTOR信号减轻肺纤维化。 基础临床药物毒理学 133:226-236 (2023). 公共医学:37394756 肖特 等。 巴马汀通过减少炎症和增加自噬来治疗荨麻疹。 前部免疫 14:1268467 (2023). 公共医学:38035098 卢J 等。 乙酰辅酶A合成酶2激活介导糖尿病肾病肾损伤。 JCI洞察力 8:N/A(2023年)。 公共医学:37870960