主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 兔单克隆抗体[EPR20048]到PAK1 适用于:WB、ICC/IF、IP、Flow Cyt(Intra) 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR20048]至PAK1 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:His-tagged human PAK1(aa1-250)重组蛋白; HeLa、SK-OV-3、SH-SY5Y、HEK-293T、NIH/3T3和PC-12全细胞裂解物; 人胎儿脑裂解物; 小鼠和大鼠大脑溶解。 ICC/IF:SH-SY5Y和HeLa细胞。 流式细胞周期(内部):SH-SY5Y和HeLa细胞。 IP:SH-SY5Y全细胞裂解物。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.1%叠氮化钠 成分:0.05%BSA、40%甘油(甘油、甘油)、PBS -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR20048 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 活化的激酶作用于多种靶点。 可能是连接Rho相关GTPase和JNK-MAP激酶途径的GTPase效应器。 由CDC42和RAC1激活。 参与应力纤维的溶解和焦点复合体的重组。 通过TBCB磷酸化参与微管生物发生的调节。 凋亡细胞中的活性受到抑制,可能是由于CDC2L1和CDC2L2的结合。 -
序列相似性 属于蛋白激酶超家族。 STE-Ser/Thr蛋白激酶家族。 STE20亚家族。 包含1个CRIB域。 包含1个蛋白激酶结构域。 -
翻译后修饰 被CDC42/p21和RAC1激活时自动磷酸化。 -
细胞定位 细胞质。 细胞连接>局部粘附。 激活后招募至局部粘连。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 5058 人类 Entrez基因: 18479 鼠标 Entrez基因: 29431 老鼠 Omim公司: 602590 人类 瑞士保护银行: 问题13153 人类 瑞士保护银行: O88643号 鼠标 瑞士保护银行: 第35465页 老鼠 尤尼金: 435714 人类
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别名 α-PAK抗体 α-PAK抗体 MGC130000抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗PAK1抗体[EPR20048](ab223849) 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: PAK1敲除HAP1全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 61千Da 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在61 kDa处观察到ab223849。 红色-装载控制, 约9484 ,在37 kDa下观察到。 ab223849在野生型HAP1细胞中与PAK1特异性反应,因为PAK1敲除细胞中信号丢失。 对野生型和PAK1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab223849和 约9484 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度孵育过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透性SH-SY5Y(人骨髓神经母细胞瘤细胞系)细胞的免疫荧光分析,用ab223849在1/100稀释度下标记PAK1,然后用山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共聚焦图像显示SH-SY5Y细胞系上的细胞质染色。 核反染为DAPI(蓝色)。 用抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor)检测管蛋白 ® 594) ( 约195889年 )(红色)稀释1/200。 仅二级抗体对照:使用PBS代替一级抗体,二级抗体为山羊抗兔IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )二级抗体的稀释度为1/1000。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗PAK1抗体[EPR20048](ab223849) 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: PAK1 CRISPR/Cas9编辑的HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 61千Da 观察到的频带大小: 65千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在65 kDa下观察到ab223849。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 western blot显示ab223849与野生型HeLa细胞中的PAK1反应。 CRISPR/Cas9编辑细胞系中观察到的条带 约264889 (CRISPR/Cas9编辑的细胞裂解物 ab257572号 )65kDa以下的车道可能代表截断形式和劈开碎片。 尚未对此进行进一步调查。 对野生型HeLa和PAK1 CRISPR/Cas9编辑的HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab223849和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别以1/1000和1/20000的稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗PAK1抗体[EPR20048](ab223849) 车道1: SK-OV-3(人卵巢癌上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)全细胞裂解物 3号车道: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系)全细胞裂解物 车道4: 人胎脑裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 1-3车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 车道4: IP检测试剂VeriBlot(HRP)( 阿布131366 )稀释1/4000 使用ECL技术开发。 预测的带宽大小: 61千Da 观察到的频带大小: 60千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 1号车道:3分钟; 第二车道:30秒; 3号车道:3秒; 第四车道:15秒。 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗PAK1抗体[EPR20048](ab223849) 车道1: 小鼠脑裂解物 车道2: 大鼠脑裂解物 3号车道: SH-SY5Y(人骨髓成神经细胞瘤细胞系)全细胞裂解物 车道4: HEK-293T(大T抗原转化胚胎肾人上皮细胞系)全细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 使用ECL技术开发。 预测的带宽大小: 61千Da 观察到的频带大小: 60千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 车道1:5秒; 第二车道:3秒; 3号车道:3分钟; 第4车道:1分钟。 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗PAK1抗体[EPR20048](ab223849) 车道1: His-tagged人PAK1(aa1-250)重组蛋白 车道2: His-tagged人PAK2(aa1-250)重组蛋白 每车道0.01微克的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 使用ECL技术开发。 预测的带宽大小: 61千Da 观察到的频带大小: 37千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 车道1:1分钟; 第二跑道:3分钟。 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
对4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞进行免疫荧光分析,在1/100稀释度下用ab223849标记PAK1,然后用山羊抗Rabbit IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共焦图像显示HeLa细胞系上的细胞质染色。 核反染为DAPI(蓝色)。 用抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor)检测管蛋白 ® 594) ( 约195889年 )(红色)稀释1/200。 仅二级抗体对照:使用PBS代替一级抗体,二级抗体为山羊抗兔IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )二级抗体的稀释度为1/1000。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
合格证书
文献 (11)
科瓦诺娃 等。 PAK1和PAK2参与细胞代谢调节。 J细胞生物化学 123:375-389 (2022). 公共医学:34750857 李D 等。 环状RNA hsa_circ_0004396作为miR-615-5p的海绵,通过上调P21-活化激酶1促进非小细胞肺癌的进展和放射抗性。 临床实验室分析杂志 第36页:e24463(2022年)。 公共医学:35500159 卢Y 等。 CircLMTK2沉默通过海绵miR-485-5p和靶向PAK1降低胰腺癌对吉西他滨的耐药性。 肿瘤杂志 2022:1911592 (2022). 公共医学:36059806 库日·埃洛瓦克 等。 I组p21活化激酶在白血病细胞与纤维连接蛋白粘附中的作用。 细胞Adh迁移 15:18-36 (2021). 公共医学:33464167 李浩 等。 含有miR-451a的外显子参与了脑缺血预处理对脑缺血再灌注损伤的保护作用。 CNS神经科学疗法 27:564-576 (2021). 公共医学:33533575