主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[E381]到NFkB p105/p50 适用人群:WB、IHC-P 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [E381]至NFkB p105/p50 -
宿主 兔子 -
特异性 这种抗体将检测两种形式:p50和p105。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HeLa、MCF-7和PC-12细胞裂解物。 IHC-P:前列腺癌和膀胱癌组织。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 E381型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
检测试剂盒 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
阳性对照
应用
靶标
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功能 NF-kappa-B是一种多效性转录因子,存在于几乎所有细胞类型中,参与炎症、免疫、分化、细胞生长、肿瘤发生和凋亡等多种生物过程。 NF-kappa-B是由类Rel结构域蛋白RELA/p65、RELB、NFKB1/p105、NFKB1/p50、Rel和NFKB2/p52形成的同二聚体或异二聚体复合物,其中异二聚物p65-p50复合物最为丰富。 二聚体结合在其靶基因DNA中的kappa-B位点,并且单个二聚体对不同的kappa-B位点有不同的偏好,它们可以以不同的亲和力和特异性结合。 不同的二聚体组合分别作为转录激活物或阻遏物。 NF-kappa-B受翻译后修饰和亚细胞分隔的各种机制以及与其他辅因子或辅抑制因子的相互作用控制。 NF-kappa-B复合物被保存在细胞质中,处于与NF-kampa-B抑制剂家族成员复合的非活性状态。 在传统的激活途径中,IκB被IκB激酶(IKKs)磷酸化以响应不同的激活剂,随后被降解,从而释放出转移到细胞核的活性NF-κ-B复合物。 NF-kappa-B异二聚体p65-p50和RelB-50复合物是转录激活物。 NF-kappa-B p50-p50同源二聚体是一种转录阻遏物,但与BCL3相关时可作为转录激活物。 NFKB1似乎具有双重功能,如通过p105在细胞质中保留附着的NF-kappa-B蛋白和通过共翻译过程生成p50。 蛋白酶体介导的过程确保了p50和p105的产生,并保留了它们的独立功能,尽管NFKB1/p105的处理似乎也发生在翻译后。 p50与kappa-B一致序列5'-GGRNNYCC-3'结合,位于参与免疫反应和急性期反应的基因的增强子区域。 在MAP3K8复合物中,NFKB1/p105抑制MAP3K8-诱导的MAPK信号传导; 活性MAP3K8通过NFKB1/p105的蛋白酶体依赖性降解释放。 -
序列相似性 包含7个ANK重复。 包含1个死亡域。 包含1个RHD(Rel-like)域。 -
结构域 p105的C末端可能参与细胞质滞留、DNA结合抑制和转录激活。 富含甘氨酸区域(GRR)似乎是p50生成的关键元素。 -
翻译后修饰 当翻译发生时,GRR重复后的特定未折叠结构促进p50的产生,使其成为蛋白酶体可接受的底物。 这个过程称为共翻译处理。 加工形式是活性的,未加工形式作为抑制剂(IκB样),能够与NF-κB形成细胞溶质复合物,将其困在细胞质中。 GRR重复序列下游区域的完全折叠妨碍了处理。 “Ser-903”和“Ser-907”处的磷酸化启动p105的蛋白水解过程,以响应TNF-α刺激。 BTRC/BTRCP介导的蛋白水解需要“Ser-927”和“Ser-932”处的磷酸化。 多泛素化似乎允许p105处理。 Cys-61的S-亚硝基化影响DNA结合。 -
细胞定位 核心。 细胞质。 核,但也发现在细胞质中以非活性形式与抑制剂复合。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 4790 人类 Entrez基因: 18033 鼠标 Entrez基因: 81736 老鼠 Omim公司: 164011 人类 瑞士保护银行: 第19838页 人类 瑞士保护银行: 第25799页 鼠标 瑞士保护银行: 问题63369 老鼠 尤尼金: 618430 人类
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别名 DKFZp686C01211抗体 DNA结合因子KBF1抗体 DNA结合因子KBF1 EBP1抗体
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图片
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1/1000稀释的抗-NFkB p105/p50抗体[E381](ab32360)+40µg的小鼠神经干细胞裂解物 次要 Alexa Fluor 790山羊荧光灯,1/10000稀释 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 50千Da 观察到的频带大小: 100,50千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 1小时
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所有车道: 抗NFkB p105/p50抗体[E381](ab32360) 车道1: 野生型HAP1细胞裂解物 车道2: NFkB p105/p50敲除HAP1细胞裂解物 3号车道: HeLa细胞裂解物 车道4: Jurkat细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 50千Da 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在120,50 kDa时观察到ab32360。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 当使用NFkB p105/p50敲除样品时,ab32360显示与NFkB p105/p50特异性反应。 对野生型和NFkB p105/p50敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab32360和 约8245 (GAPDH的负载对照)分别以1/1000和1/1000稀释,并在4°C下孵育过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
人膀胱癌组织标记NFkB p105/p50的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,纯化的ab32360为1/250。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG(H+L)作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精复染。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-NFkB p105/p50抗体[E381](ab32360) 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: NFKB1 CRISPR/Cas9编辑的HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 50千Da 观察到的频带大小: 105千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在105 kDa下观察到ab32360。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 在western印迹中显示ab32360与野生型HeLa细胞中的NFkB p105/p50反应。 CRISPR/Cas9编辑细胞系中观察到的条带 约264823 (CRISPR/Cas9编辑的细胞裂解物 ab257003号 )105kDa以下的车道可能代表截断形式和劈开碎片。 尚未对此进行进一步调查。 对野生型HeLa和NFKB1 CRISPR/Cas9 HeLa-HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab32360和抗GAPDH抗体[6C5]-负载对照( 约8245 )分别以1/1000和1/20000的稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
1/10000稀释(纯化)的抗-NFkB p105/p50抗体[E381](ab32360)+20µg的HeLa细胞裂解液 次要 过氧化物酶结合羊抗兔IgG(H+L)1/1000稀释 预测的带宽大小: 50千Da 观察到的频带大小: 105.50千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
1/50000稀释(纯化)的抗-NFkB p105/p50抗体[E381](ab32360)+10µg的MCF-7细胞裂解液 次要 过氧化物酶结合羊抗兔IgG(H+L)1/1000稀释 预测的带宽大小: 50千Da 观察到的频带大小: 105千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 其他波段位于: 50 kDa(可能的非特异性结合) 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 1/10000稀释(纯化)的抗-NFkB p105/p50抗体[E381](ab32360) 车道1: PC-12细胞裂解物 车道2: NIH/3T3细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 过氧化物酶结合羊抗兔IgG(H+L)1/1000稀释 预测的带宽大小: 50千Da 观察到的频带大小: 105千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 其他波段位于: 50 kDa(可能的非特异性结合) 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
1/5000稀释(未净化)+HeLa细胞裂解液的抗-NFkB p105/p50抗体[E381](ab32360) 预测的带宽大小: 50千Da 观察到的频带大小: 105.50千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? -
人前列腺癌组织标记NFkB p105/p50的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,使用稀释度为1/250的未纯化ab32360。
实验方案
数据表及文件
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文献 (210)
刘杰 等。 丹参酮IIA通过下调BCL2和上调TP53促进三阴性乳腺癌细胞凋亡。 Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol公司 396:365-374 (2023). 公共医学:36374307 谢杰 等。 粘液阿克曼菌保护小鼠免受新出现的蜱传病毒病原体的侵害。 自然微生物 8:91-106 (2023). 公共医学:36604506 吴H 等。 miR-5132-5p靶向的磷脂酶D2通过Nrf2/NFκB途径减轻蓝蛋白诱导的急性胰腺炎。 Immun Inflamm Dis公司 11:e831(2023)。 公共医学:37249288 高田H 等。 单细胞转录组学揭示了胃稳态中EGFR信号介导的胃祖细胞分化。 国家公社 14:3750 (2023). 公共医学:37386010 Qi H(气H) 等。 狼疮性肾炎中DEC2表达下调通过抑制糖酵解和p38 MAPK/Erk通路抑制系膜细胞增殖。 分子医学 29:99 (2023). 公共医学:37488524