主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆抗体[EPR28581-87]到LAP2α 适用于:Flow Cyt(Intra)、IP、ICC/IF、WB、IHC-P 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR28581-87]至LAP2α -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 重组片段。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HEK-293、HEL、HeLa、293T、NIH/3T3、PC-12、C6、Neuro-2a、U-87 MG、SH-SY5Y、小鼠睾丸、小鼠脾脏、大鼠睾丸、大鼠脾脏和His标记的人类LAP2α片段。 IHC-P:人扁桃体、人胃癌、小鼠脾和大鼠脾组织。 ICC/IF:HEK293T和NIH/3T3细胞。 流式细胞仪(内部):HEK293T和NIH/3T3细胞。 IP:HEK-293全细胞裂解物。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油(甘油,甘油),59%PBS,0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR28581-87 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
相关产品
应用
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靶标
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相关性 层粘连蛋白是V型中间丝蛋白,分为组成性表达的B型层粘连和发育调节的A型层粘着。 核板层和核内部的层粘连蛋白结合蛋白包括高等真核生物中的几个蛋白家族和/或类型的蛋白质,如内核膜蛋白、层粘连B受体、emerin、MANI、层粘着相关多肽1(LAP 1)的三种亚型和LAP 2的几种亚型。 哺乳动物中通过选择性剪接从单个基因衍生出多达六种LAP 2亚型,非洲爪蟾中已经描述了各种亚型。 最具特征的LAP2亚型是内核膜蛋白LAP2β和核质蛋白LAP2-α,它们在N端187-氨基酸恒定区相同,但在C端不同。 LAP 2α作为抗洗涤剂和抗盐核骨架结构的一部分,与核内部的A型层粘连蛋白特异性相互作用。 -
细胞定位 核能 -
数据库链接 -
别名 等形β/γ抗体 膜相关多肽2抗体 LAP2抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗-LAP2α抗体[EPR28581-87](ab317028) 车道1: 野生型HEK-293(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 2号和5号车道: TMPO敲除HEK-293全细胞裂解物 3号车道: HEL(红白血病-成红细胞)全细胞裂解物 车道4: 野生型HEK-293全细胞裂解物 车道6: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 7号车道: 293T(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 第8车道: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解物 9号车道: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)全细胞裂解物 10号车道: C6(大鼠胶质瘤胶质细胞)全细胞裂解物 11号车道: Neuro-2a(小鼠神经母细胞瘤成神经细胞)全细胞裂解物 12号车道: U-87 MG(人胶质母细胞瘤-星形细胞瘤上皮细胞)全细胞裂解物 13号车道: SH-SY5Y(人神经母细胞瘤上皮细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 在还原条件下进行。 预测波段大小: 75千帕 观察到的频带大小: 76千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 在Western blot中,ab317028显示与LAP2α特异结合。 在野生型HEK-293细胞裂解物(1/4通道)中观察到76 kDa的靶点,而在TMPO敲除细胞系(2/5通道)(敲除细胞株 约266774 /敲除细胞裂解物 ab257747号 ). 在1-3通道中,裂解产物储存在-80? 在Western Blotting之前。 目标谱带(76kDa)下方的谱带很可能是降解产物。 在4-13道中,新鲜制备裂解液并立即用于Western Blotting,以最大限度地减少蛋白质降解。 大约250 kDa(在10号通道中)的更高MW频段的身份未知。 通道1-2是使用高灵敏度ECL基板开发的。 在Western blot中,抗-GAPDH抗体[EPR16891]-负载控制( 约181602 )1/200000稀释液染色。 曝光时间:1-2车道:81秒,3-13车道:180秒 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-LAP2α抗体[EPR28581-87](ab317028) 车道1: 小鼠睾丸组织裂解物 车道2: 小鼠脾脏组织裂解物 3号车道: 大鼠睾丸组织裂解物 车道4: 大鼠脾组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测波段大小: 75千帕 观察到的频带大小: 76千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 180秒 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 新鲜制备裂解液并立即用于蛋白质印迹,以尽量减少蛋白质降解。 目标带(76kDa)下方的带可能是降解的目标碎片。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-LAP2α抗体[EPR28581-87](ab317028) 车道1: His-tagged人LAP2α片段100 ng 车道2: His-tagged人LAP2β重组蛋白100 ng 3号车道: His-tagged人LAP2γ重组蛋白100 ng 车道4: His-tagged人LAP2 zeta重组蛋白100 ng 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测波段大小: 75千帕 观察到的频带大小: 57千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 180秒 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 该抗体不会与人LAP2β、LAP2γ和LAP2 zeta发生交叉反应。 在Western blot中,Anti-6X His tag®抗体[EPR20547]-ChIP等级( 约213204 )1/5000稀释液染色。 -
对石蜡包埋的人扁桃体组织进行免疫组织化学分析,用ab317028在1/2000(0.262 ug/ml)稀释度下标记LAP2α,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™ Polymer Refine Detection)。 人扁桃体染色阳性。 该切片在室温下与ab317028孵育30分钟。 免疫染色在Leica Biosystems BOND®RX仪器上进行 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是一种可随时使用的LeicaDS9800(Bond™ Polymer Refine Detection)。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位回收溶液2)进行热介导的抗原回收20分钟 -
石蜡包埋的人胃癌组织用ab317028在1/2000(0.262 ug/ml)稀释度下标记LAP2α,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™ Polymer Refine Detection)进行免疫组织化学分析。 人胃癌阳性染色(PMID:22745766)。 该切片在室温下与ab317028孵育30分钟。 在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行免疫染色 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是一种可随时使用的LeicaDS9800(Bond™ Polymer Refine Detection)。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位回收溶液2)进行热介导的抗原回收20分钟 -
对石蜡包埋小鼠脾组织进行免疫组织化学分析,用ab317028在1/2000(0.262 ug/ml)稀释度下标记LAP2α,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™ Polymer Refine Detection)。 小鼠脾脏染色阳性。 该切片在室温下与ab317028孵育30分钟。 在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行免疫染色 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是一种可随时使用的LeicaDS9800(Bond™ Polymer Refine Detection)。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位回收溶液2)进行热介导的抗原回收20分钟 -
对石蜡包埋大鼠脾组织进行免疫组织化学分析,用ab317028在1/2000(0.262 ug/ml)稀释度下标记LAP2α,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™ Polymer Refine Detection)。 大鼠脾脏染色阳性。 该切片在室温下与ab317028孵育30分钟。 在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行免疫染色 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是一种可随时使用的LeicaDS9800(Bond™ Polymer Refine Detection)。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位回收溶液2)进行热介导的抗原回收20分钟 -
4%对甲醛固定、0.1%TritonX-100渗透性TMPO KO HEK293T(TMPO敲除人胚胎肾上皮细胞)的免疫荧光分析( 约266774 )在1/500(1.046 ug/ml)稀释度下用ab317028标记LAP2α的细胞,然后 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附抗体,稀释度为1/1000(2 ug/ml)(绿色)。 共焦图像显示亲代HEK293T细胞中有核染色(以绿色显示),TMPO KO HEK293 T细胞中没有染色。 反色为洋红色。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 约195889年 使用抗α-微管蛋白小鼠单克隆抗体-微管标记(Alexa Fluor®594)在1/200(2.5 ug/ml)稀释度(洋红)下对微管蛋白进行反染色。 核染色为DAPI(蓝色)。 仅二级抗体对照:二级抗体为 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)以1/1000(2 ug/ml)稀释度预先吸附。 -
4%对甲醛固定、0.1%TritonX-100渗透NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)细胞的免疫荧光分析,在1/500(1.046 ug/ml)稀释度下用ab317028标记LAP2α,然后 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附抗体,稀释度为1/1000(2 ug/ml)(绿色)。 共聚焦图像显示NIH/3T3细胞中的核染色(以绿色显示)。 反色为洋红色。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 约195889年 使用抗α-微管蛋白小鼠单克隆抗体-微管标记(Alexa Fluor®594)在1/200(2.5 ug/ml)稀释度(洋红)下对微管蛋白进行反染色。 核染色为DAPI(蓝色)。 仅二级抗体对照:二级抗体为 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)以1/1000(2 ug/ml)稀释度预先吸附。 -
LAP2α从0.35 mg HEK-293(人类胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解液中免疫沉淀,ab317028以1/30稀释(0.35 mg裂解液中2 ug)。 使用ab317028在1/1000稀释度下对免疫沉淀物进行蛋白质印迹。 用于IP二级抗体(HRP)的VeriBlot( 阿布131366 )以1/5000稀释度使用。 通道1:HEK-293(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 通道2:HEK-293(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解液中的ab317028 IP 通道3:兔单克隆IgG( 约172730 )代替HEK-293全细胞裂解液中的ab317028 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:180秒。 新鲜制备裂解液并立即用于蛋白质印迹,以尽量减少蛋白质降解。
实验方案
数据表及文件
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