主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆抗体[EPR25353-284]对KMT6/EZH2的作用 适用于:ChIC/CUT&RUN-seq、WB、IHC-P、ICC/IF、IP、ChIP、Flow Cyt(内部) 敲除已验证 反应:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR25353-284]至KMT6/EZH2 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 重组片段。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:野生型HAP1、B16-F10、Neuro-2a、HeLa、293T、NIH/3T3、PC-12和NCCIT裂解物。 IHC-P:人结肠、人胰腺癌、小鼠结肠、小鼠胰腺肿瘤、大鼠结肠和野生型HAP1组织。 ICC/IF:野生型HAP1、NCJIT和B16-F10细胞。 流式细胞周期(内部):野生型HAP1、NCCIT和B16-F10细胞。 IP:NCCIT和B16-F10细胞。 ChIP:NCCIT细胞。 ChIC/CUT&RUN-Seq:NCCIT细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR25353-284型 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本
应用
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靶标
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功能 多梳群(PcG)蛋白。 PRC2/EED-EZH2复合物的催化亚单位,将组蛋白H3的“Lys-9”和“Lys-27”甲基化,导致受影响靶基因的转录抑制。 能够将组蛋白H3的“Lys-27”单甲基化、二甲基化和三甲基化,分别形成H3K27me1、H3K17me2和H3K28me3。 与含EZH2的复合物相比,它在胚胎干细胞中更为丰富,并在形成H3K27me3中发挥主要作用,这是胚胎干细胞鉴定和正确分化所必需的。 PRC2/EED-EZH2复合物也可作为DNA甲基转移酶的招募平台,从而连接两个表观遗传抑制系统。 PRC2/EED-EZH2复合物抑制的基因包括HOXC8、HOXA9、MYT1、CDKN2A和维甲酸靶基因。 -
组织特异性 在许多组织中表达。 在许多肿瘤类型中过度表达,包括乳腺癌、结肠癌、喉癌、淋巴瘤和睾丸癌。 -
序列相似性 属于组蛋白赖氨酸甲基转移酶家族。 EZ亚科。 包含1个SET域。 -
发展阶段 在胚胎成纤维细胞(HEFs)衰老过程中表达降低。 在G1/S相界处出现峰值。 -
翻译后修饰 AKT1磷酸化。 AKT1磷酸化降低甲基转移酶活性。 -
细胞定位 核心。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 zeste 2抗体增强剂 zeste-2多梳抑制复合物2亚单位抗体增强子 zeste同源物2(果蝇)抗体增强剂
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图片
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使用最终浓度为700 ng/mL的pAG-MNase、2.5 x 10^5 NCCIT(人类多能干胚胎癌上皮细胞)细胞和5µg ab307646[EPR25353-284]进行ChIC/CUT&RUN。 所得DNA在Illumina NovaSeq 6000上测序,测序深度为1000万读。 阴性IgG对照 约172730 图中还显示了。 日内瓦大学拥有与ChIC(染色质免疫清洗)方法相关的专利。 -
使用最终浓度为700 ng/mL的pAG-MNase、2.5 x 10^5 NCCIT(人类多能干胚胎癌上皮细胞)细胞和5µg ab307646[EPR25353-284]进行ChIC/CUT&RUN。 所得DNA在Illumina NovaSeq 6000上测序,测序深度为1000万读。 阴性IgG对照 约172730 图中还显示了。 日内瓦大学拥有与ChIC(染色质免疫清洗)方法相关的专利。 -
使用最终浓度为700 ng/mL的pAG-MNase、2.5 x 10^5 NCCIT(人类多能干胚胎癌上皮细胞)细胞和5µg ab307646[EPR25353-284]进行ChIC/CUT&RUN。 所得DNA在Illumina NovaSeq 6000上测序,测序深度为1000万读。 阴性IgG对照 约172730 也显示了。 日内瓦大学拥有与ChIC(染色质免疫清洗)方法相关的专利。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗KMT6/EZH2抗体[EPR25353-284](ab307646) 车道1: 野生型HAP1(人慢性粒细胞白血病近单倍体细胞系)全细胞裂解物 车道2: KMT6/EZH2敲除HAP1全细胞裂解物 3号车道: B16-F10(小鼠皮肤黑色素瘤细胞)全细胞裂解物 车道4: Neuro-2a(小鼠神经母细胞瘤成神经细胞)全细胞裂解物 每条泳道20µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(IRDye®800CW)( ab216773号 )和山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye®680RD)( 约216776 )稀释度为1/10000 预测的带宽大小: 85千帕 观察到的波段大小: 85千帕 封闭和稀释缓冲液和浓度:Intercept®(TBS)封闭缓冲液,用等体积的0.1%TBS稀释 样品在Bis-Tris凝胶上进行。 在还原条件下进行。 Western blot假彩色图像:抗KMT6/EZH2抗体(ab307646)在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度加载控制染色,以红色显示。 在Western blot中,ab307646显示与KMT6/EZH2特异结合。 在野生型HAP1细胞裂解液中在85kDa处观察到一条带,而在KMT6/EZH2敲除细胞系中未观察到这种大小的信号。 为了生成此图像,分析野生型和KMT6/EZH2敲除HAP1细胞裂解物。 首先,样品在Bis-Tris凝胶上运行,然后转移到固定-FL PVDF膜上。 在4°C下与一级抗体孵育过夜之前,将膜封闭在Intercept®(TBS)封闭缓冲液中,缓冲液用等体积的0.1%TBS稀释。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸收抗体( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®680RD)预吸收床( 约216776 )以1/2000稀释。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗KMT6/EZH2抗体[EPR25353-284](ab307646) 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞系)全细胞裂解物 车道2: 293T(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 3号车道: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解物 车道4: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)全细胞裂解物 每条泳道20µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 85千帕 观察到的波段大小: 85千帕 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST 新鲜制备裂解液并立即用于蛋白质印迹,以尽量减少蛋白质降解。 曝光时间:26秒 -
1/1000稀释的抗-KMT6/EZH2抗体[EPR25353-284](ab307646)+20µg的NCJIT(人多能干胚胎癌上皮细胞)全细胞裂解物 次要 山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 85千帕 观察到的波段大小: 85千帕 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST 目标带(85 kDa)下方的带可能是降解的目标碎片。 曝光时间:3秒 -
用ab307646在1/100(5.43 ug/ml)的浓度下标记KMT6/EZH2的石蜡包埋人结肠组织,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)进行免疫组织化学分析。 人结肠细胞核染色。 该切片在室温下与ab307646孵育30分钟。 在莱卡生物系统BOND®RX仪器上进行免疫染色,苏木精对其进行复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟 -
对石蜡包埋的人胰腺癌和邻近组织进行免疫组织化学分析,在1/100(5.43 ug/ml)时用ab307646标记KMT6/EZH2,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 人类胰腺癌上的核染色(图像A)和相邻组织上的无染色(图像B)。 该切片在室温下与ab307646孵育30分钟。 在莱卡生物系统BOND®RX仪器上进行免疫染色,苏木精对其进行复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟 -
用ab307646在1/1000(0.543 ug/ml)的浓度下标记KMT6/EZH2的石蜡包埋小鼠结肠组织,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)进行免疫组织化学分析。 小鼠结肠细胞核染色。 该切片在室温下与ab307646孵育30分钟。 在莱卡生物系统BOND®RX仪器上进行免疫染色,苏木精对其进行复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟 -
用ab307646在1/1000(0.543 ug/ml)浓度下标记KMT6/EZH2的石蜡包埋小鼠胰腺肿瘤组织,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)进行免疫组织化学分析。 小鼠胰腺肿瘤细胞核染色。 该切片在室温下与ab307646孵育30分钟。 在莱卡生物系统BOND®RX仪器上进行免疫染色,苏木精对其进行复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟 -
用ab307646在1/1000(0.543 ug/ml)浓度下标记KMT6/EZH2的石蜡包埋大鼠结肠组织,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)进行免疫组织化学分析。 大鼠结肠细胞核染色。 该切片在室温下与ab307646孵育30分钟。 在莱卡生物系统BOND®RX仪器上进行免疫染色,苏木精对其进行复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟 -
石蜡包埋A)野生型HAP1(人类慢性粒细胞白血病近单倍体细胞)细胞颗粒和B)EZH2敲除HAP1细胞颗粒的免疫组织化学分析,用ab307646在1/1000(0.543 ug/ml)条件下标记KMT6/EZH2,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 (A)野生型HAP1细胞颗粒上的细胞核染色,(B)EZH2敲除HAP1的细胞颗粒上没有染色。 该切片在室温下与ab307646孵育30分钟。 在莱卡生物系统BOND®RX仪器上进行免疫染色,苏木精对其进行复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟 -
用ab307646在1/50(10.86 ug/ml)稀释度下标记KMT6/EZH2的4%副甲醛固定、0.1%TritonX-100渗透性EZH2-KO HAP1(EZH2-敲除人类慢性粒细胞白血病)细胞的免疫荧光分析,然后 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附抗体,稀释度为1/1000(2ug/ml)(绿色)。 共聚焦图像显示亲本HAP1细胞系中有核染色,EZH2 KO HAP1细胞核未染色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 观察到。 约195889年 使用抗α-微管蛋白小鼠单克隆抗体-微管标记物(Alexa Fluor®594)以1/200(2.5ug/ml)稀释度复染微管蛋白(红色)。 核染色为DAPI(蓝色)。 仅二级抗体对照:二级抗体为 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)以1/1000(2ug/ml)稀释度预先吸附。 -
用ab307646在1/50(10.86 ug/ml)稀释液中标记KMT6/EZH2的4%对甲醛固定、0.1%TritonX-100渗透性NCCIT(人类多能干胚胎癌上皮细胞)细胞的免疫荧光分析,然后 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附抗体,稀释度为1/1000(2ug/ml)(绿色)。 共聚焦图像显示NCCIT细胞系中的核染色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 观察到。 约195889年 使用抗α-微管蛋白小鼠单克隆抗体-微管标记物(Alexa Fluor®594)以1/200(2.5ug/ml)稀释度复染微管蛋白(红色)。 核染色为DAPI(蓝色)。 仅二级抗体对照:二级抗体为 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)以1/1000(2ug/ml)稀释度预先吸附。 -
在1/50(10.86 ug/ml)稀释度下用ab307646标记KMT6/EZH2的4%对甲醛固定、0.1%TritonX-100渗透性B16-F10(小鼠皮肤黑色素瘤细胞)细胞的免疫荧光分析,然后 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附抗体,稀释度为1/1000(2ug/ml)(绿色)。 共聚焦图像显示B16-F10细胞系的核染色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 观察到。 约195889年 使用抗α-微管蛋白小鼠单克隆抗体-微管标记物(Alexa Fluor®594)以1/200(2.5ug/ml)稀释度复染微管蛋白(红色)。 核染色为DAPI(蓝色)。 仅二级抗体对照:二级抗体为 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)以1/1000(2ug/ml)稀释度预先吸附。 -
KMT6/EZH2从0.35 mg NCCIT(人类多能干胚胎癌上皮细胞)全细胞裂解液中免疫沉淀,10 ug,ab307646,1/30稀释(0.35 mg裂解液中2 ug)。 使用ab307646在1/1000稀释度下对免疫沉淀进行Western blot。 用于IP二级抗体(HRP)的VeriBlot( 阿布131366 )以1/5000稀释度使用。 通道1:NCCIT(人类多能干胚胎癌上皮细胞)全细胞裂解物10 ug 泳道2:NCJIT全细胞裂解物中的ab307646 IP 通道3:兔单克隆IgG( 约172730 )而不是NCCIT全细胞裂解液中的ab307646 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:5秒 新鲜制备裂解液并立即用于IP,以尽量减少蛋白质降解。 -
KMT6/EZH2从0.35 mg B16-F10(小鼠皮肤黑色素瘤细胞)全细胞裂解液10 ug中免疫沉淀,ab307646以1/30稀释(0.35 mg裂解液中2 ug)。 使用ab307646在1/1000稀释度下对免疫沉淀进行Western blot。 用于IP二级抗体(HRP)的VeriBlot( 阿布131366 )以1/5000稀释度使用。 通道1:B16-F10(小鼠皮肤黑色素瘤细胞)全细胞裂解液10 ug 通道2:ab307646 IP in B16-F10全细胞裂解液 通道3:兔单克隆IgG( 约172730 )代替B16-F10全细胞裂解液中的ab307646 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:5秒 新鲜制备裂解液并立即用于IP,以尽量减少蛋白质降解。
实验方案
数据表及文件
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