主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR5477]抗Hsp27 适用于:流式细胞周期(内部)、ICC/IF、WB 敲除已验证 反应对象:人类、非洲绿猴
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR5477]至Hsp27 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类、非洲绿猴 预测可用于: 老鼠 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HeLa、HAP1、MCF7、COS-1、BxPC-3和HT-1376细胞裂解物。 ICC/IF:HeLa细胞。 流式细胞仪(内部):HAP1细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 储存于-20°C。 在-20°C下稳定12个月。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.05%叠氮化钠 成分:0.1%牛血清白蛋白、40%甘油(甘油、甘油)、9.85%甘氨酸、50%组织培养上清液 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR5477系列 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物
应用
靶标
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功能 参与应激抵抗和肌动蛋白组织。 -
组织特异性 在所有受试组织中检测到:骨骼肌、心脏、主动脉、大肠、小肠、胃、食道、膀胱、肾上腺、甲状腺、胰腺、睾丸、脂肪组织、肾脏、肝脏、脾脏、大脑皮层、血清和脑脊液。 心脏和由横纹肌和平滑肌组成的组织中含量最高。 -
疾病相关 热休克蛋白B1的缺陷是2F型夏科特-马里奥病(CMT2F)的病因[MIM:606595]。 CMT2F是一种夏科特-马利牙病,是外周神经系统最常见的遗传性疾病。 根据电生理特性和组织病理学,Charcot-Marie-Tooth病分为两大类:原发性周围脱髓鞘神经病(CMT1)和原发性外周轴突神经病(CMC2)。 CMT2组的神经病变以轴突再生迹象为特征,无明显髓鞘改变,神经传导速度正常或稍有降低,远端肌肉进行性无力和萎缩。 神经传导速度正常或稍有降低。 CMT2F发病年龄在15至25岁之间,肌肉无力和萎缩通常始于足部和腿部(腓骨分布)。 上肢受累发生较晚。 CMT2F遗传为常染色体显性遗传。 HSPB1缺陷是远端遗传性运动神经病变2B型(HMN2B)的原因[MIM:608634]。 远端遗传性运动神经病变是一组异质性神经肌肉疾病,由脊髓前角运动神经元选择性损伤引起,后角无感觉缺陷。 整体临床表现为典型的腿部远端肌萎缩综合征,无临床感觉丧失。 该病始于腿部胫骨前和腓骨室远端肌肉的无力和消瘦。 随后,虚弱和萎缩可能扩展到下肢近端肌肉和/或上肢远端肌肉。 -
序列相似性 属于小分子热休克蛋白(HSP20)家族。 -
翻译后修饰 MCF-7细胞暴露于蛋白激酶C活化剂和热休克时发生磷酸化。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 细胞质>细胞骨架>纺锤体。 间期细胞中的细胞质。 有丝分裂细胞中有丝分裂纺锤体的结肠化。 在热冲击过程中转移到细胞核,并存在于称为SC35斑点或核拼接斑点的亚核结构中。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 热休克27kDa蛋白抗体 28kDa热休克蛋白抗体 CMT2F抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗-Hsp27抗体[EPR5477](ab109376) 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: HSPB1敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 23千帕 观察到的波段大小: 23千帕 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在23 kDa时观察到ab109376。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 western blot显示ab109376与野生型HeLa细胞中的Hsp27反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约261738 (敲除细胞裂解物 约256945 )已使用。 对野生型HeLa和HSPB1敲除HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab109376和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4°C下过夜,稀释率分别为1:1000和1:20000。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
显示用ab109376染色的野生型HAP1(绿线)和HSPB1敲除HAP1细胞(红线)的叠加直方图。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清中培养细胞,以阻止非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(ab109376,1µg/ml)培养30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗兔IgG(H&L)预吸收( 约150081 )在22°C下以1/2000稀释30分钟。 一种兔IgG同型控制抗体( 约172730 )在与第一抗体相同的浓度和条件下使用(HAP1野生型-黑线,敲除HSPB1 HAP1-灰线)。 未标记样本也用作对照(为了简单起见,未显示此行)。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和530/30带通滤波器采集了超过5000个事件。 -
用1/500的纯化ab109376标记Hsp27的HeLa(人宫颈腺癌)细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析。 用100%甲醇固定细胞。 约150077 ,Alexa Fluor公司 ® 用488-结合羊抗兔IgG(1/1000)作为二级抗体。 细胞核用DAPI(蓝色)复染。 仅二级对照:用PBS代替一级抗体作为阴性对照。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-Hsp27抗体[EPR5477](ab109376) 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: Hsp27敲除HAP1全细胞裂解物 3号车道: HeLa全细胞裂解物 车道4: MCF7全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 23千帕 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在27 kDa时观察到ab109376。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 ab109376在野生型HAP1细胞中与Hsp27特异性反应,因为Hsp27敲除的HAP1中信号丢失。 对野生型和Hsp27敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab109376和 约8245 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别以1/1000和1/20000稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-Hsp27抗体[EPR5477](ab109376) 车道1: HeLa细胞裂解物 车道2: COS-1细胞裂解物 3号车道: BxPC-3细胞裂解物 车道4: HT-1376细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 23千帕 观察到的波段大小: 27千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同?
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (7)
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