主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 抗糖皮质激素受体的兔单克隆抗体[EPR24889-231] 适用对象:ChIP、IP、ICC/IF、WB、IHC-P 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR24889-231]转糖皮质激素受体 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 不与反应: 老鼠,老鼠 -
免疫原 重组片段。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:全细胞裂解物:HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)、糖皮质激素受体敲除HeLa、U-87 MG(人胶质母细胞瘤-星形细胞瘤上皮细胞)、HEK-293T(人胚胎肾上皮细胞)、THP-1(人单核细胞白血病-单核细胞)。 IHC-P:人类:肝脏、胰腺和肾脏。 ICC/IF:NR3C1基因敲除人宫颈腺癌上皮细胞。 IP:你好。 ChIP:A549(人肺癌上皮细胞)经地塞米松(100nM 1h)治疗,A549未经治疗。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR24889-231 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系
应用
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靶标
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功能 糖皮质激素受体(GC)。 具有双重作用模式:作为与糖皮质激素反应元件(GRE)结合的转录因子和作为其他转录因子的调节剂。 影响目标组织中的炎症反应、细胞增殖和分化。 在生长激素(GH)刺激下,可作为STAT5依赖性转录的辅激活剂,并可能揭示肝脏GR在控制身体生长中的重要作用。 参与染色质重塑。 在交易激励中发挥着重要作用。 涉及核移位。 -
组织特异性 广泛表达。 在心脏中,检测到左、右心房、左、右心室、主动脉、心尖、室间隔、房室结以及整个成人和胎儿心脏。 -
疾病相关 NR3C1缺陷是糖皮质激素抵抗(GCRES)的原因[MIM:138040]; 也称为皮质醇抵抗。 这是一种以血清皮质醇浓度升高为特征的高血压、高雄激素血症。 遗传为常染色体显性遗传。 -
序列相似性 属于核激素受体家族。 NR3亚家族。 包含1个核受体DNA结合域。 -
结构域 由三个结构域组成:一个调制N端结构域、一个DNA结合结构域和一个C端配体结合结构域。 -
翻译后修饰 糖皮质激素引起蛋白酶体介导的降解增加。 在缺乏激素的情况下磷酸化; 在糖皮质激素的存在下,变得过度磷酸化。 Ser-203磷酸化形式主要是细胞质,而Ser-211磷酸化形式是核。 转录活性与Ser-211的磷酸化量相关。 磺酰化; 这减少了转录反式激活。 泛素化; 限制糖皮质激素介导的转录信号。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 细胞质中无配体,细胞核后有配体结合和细胞核。 主要定位于细胞核。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 GCCR抗体 GCR抗体 GCR_HUMAN抗体
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图片
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所有车道: 抗糖皮质激素受体抗体[EPR24889-231](ab305050),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞),全细胞裂解物 车道2: 糖皮质激素受体敲除HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞),全细胞裂解物 3号车道: U-87 MG(人胶质母细胞瘤-星形细胞瘤上皮细胞),全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附( ab216773号 )稀释度为1/10000 预测的带宽大小: 85千帕 观察到的频带大小: 94千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭稀释缓冲液和浓度:截距 ® (TBS)用等体积0.1%TBS稀释的阻塞缓冲液 目标带(94kDa)下方的带可能是降解的目标碎片。 Western blot假彩色图像:抗糖皮质激素受体抗体[EPR24889-231](ab305050)在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度加载控制染色,以红色显示。 在Western blot中,ab305050被证明与糖皮质激素受体特异性结合。 在野生型HeLa细胞裂解液中观察到94kDa的条带,在糖皮质激素受体敲除细胞系中未观察到该大小的信号。 为了生成这张图像,对野生型和糖皮质激素受体敲除的HeLa细胞裂解物进行了分析。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸收抗体( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释度为1/10000。 -
所有车道: 抗糖皮质激素受体抗体[EPR24889-231](ab305050),稀释度为1/1000 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞),全细胞裂解物 车道2: HEK-293T(人胚胎肾上皮细胞),全细胞裂解物 3号车道: THP-1(人单核细胞白血病单核细胞),全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 在非还原条件下进行。 预测的带宽大小: 85千帕 观察到的频带大小: 94千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST 通道3中目标带(94kDa)下方的带可能是退化的目标碎片。 新鲜制备裂解液,并立即使用,以尽量减少蛋白质降解。 曝光时间:通道1:37秒 2-3车道:3分钟 -
石蜡包埋的人肝组织的免疫组织化学分析,用稀释度为1/100(5.12µg/ml)的ab305050标记糖皮质激素受体,然后用现成的Leica DS9800(Bond ™ 聚合物精制检测)。 观察人类肝脏的细胞核染色。 该切片在室温下与ab305050孵育30分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND上进行 ® RX仪器。 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的Leica DS9800(Bond ™ 聚合物精制检测)套件。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟。 -
用ab305050在1/100稀释度(5.12µg/ml)下标记糖皮质激素受体的石蜡包埋人胰腺组织的免疫组织化学分析,然后使用现成的徕卡DS9800(Bond ™ 聚合物精制检测)。 观察人类胰腺细胞核染色(PMID:32619553)。 该切片在室温下与ab305050孵育30分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND上进行 ® RX仪器。 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的徕卡DS9800(Bond ™ 聚合物精制检测)套件。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟。 -
石蜡包埋的人肾组织的免疫组织化学分析,用稀释度为1/100(5.12µg/ml)的ab305050标记糖皮质激素受体,然后用现成的Leica DS9800(Bond ™ 聚合物精制检测)。 观察人肾细胞核染色。 该切片在室温下与ab305050孵育30分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND上进行 ® RX仪器。 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的徕卡DS9800(Bond ™ 聚合物精制检测)套件。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟。 -
4%对甲醛固定、0.1%TritonX-100渗透NR3C1 KO-HeLa(NR3C1敲除人宫颈腺癌上皮细胞)的免疫荧光分析( 约261766 )在1/50稀释度(10.24µg/mL)下用AB305050标记糖皮质激素受体的细胞,然后 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)预吸附抗体,稀释度为1/1000(2µg/mL)(绿色)。 共聚焦图像显示NR3C1基因敲除HeLa细胞无染色,野生型HeLa细胞核和弱细胞质染色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 约195889年 抗α-管蛋白小鼠单克隆抗体-微管标记(Alexa Fluor ® 594)用于对1/200(2.5µg/mL)的微管蛋白进行反染色(红色)。 核染色为DAPI(蓝色)。 仅二级抗体对照:二级抗体为 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)以1/1000稀释度(2µg/mL)预吸附。 -
糖皮质激素受体从0.35 mg HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解液中免疫沉淀,ab305050以1/30稀释(0.35 mg裂解液中2μg)。 用稀释后的ab305050对免疫沉淀物进行蛋白质印迹。 用于IP二级抗体(HRP)的VeriBlot( 阿布131366 )以1/5000稀释度使用。 车道1 :HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解液10µg(插图) 2号车道 :ab305050 IP in HeLa全细胞裂解液 3号车道 :兔单克隆IgG( 约172730 )而不是HeLa全细胞裂解物中的ab305050 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:6秒 观察值M W公司 (kDa):94 目标带(94kDa)下方的带可能是降解的目标碎片。 -
根据Abcam Dual-X-ChIP协议,从A549+地塞米松(100 nM 1h)细胞中制备染色质*。 细胞用1.5 mM EGS固定30分钟,然后用甲醛固定10分钟。 使用25微克染色质、5微克305050(红色)或5微克兔正常IgG进行ChIP 约172730 (灰色)和25µl蛋白质A/G Dynabeads。 免疫沉淀DNA通过实时PCR(Sybr green方法)定量。 * http://www.abcam.com/resources?keywords=X%20ChIP%20协议
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
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