主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 抗COX2/环氧合酶2的兔单克隆[EPR12012] 适用人群:WB、IP、ICC/IF、IHC-P 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR12012]到COX2/环氧合酶2 -
宿主 兔子 -
特异性 需要刺激才能检测到某些细胞系和组织中的COX2蛋白。 测试时最好同时使用阳性对照。 根据IHC结果推荐鼠种,我们不保证鼠的WB、IP和ICC/IF。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:A549、U-87 MG和HeLa细胞裂解物、小鼠脾组织裂解物。 IHC-P:人类结肠癌、肺癌、肝和结肠组织、大鼠肾组织、小鼠肾和肝组织。 IP:A549细胞裂解物。 ICC/IF:U-87 MG细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR12012(电子顺磁共振12012) -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
靶标
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功能 调节花生四烯酸中前列腺素的形成。 可能作为炎症的主要介质和/或在活动依赖性可塑性中前列腺素信号的作用。 -
通路 脂质代谢; 前列腺素生物合成。 -
序列相似性 属于前列腺素G/H合成酶家族。 包含1个类EGF域。 -
翻译后修饰 NOS2的S-亚硝基化(iNOS)激活了酶活性。 除了Cys-561外,S-亚硝基化可能发生在不同的Cys残基上。 -
细胞定位 微粒体膜。 内质网膜。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 5743 人类 Entrez基因: 19225 鼠标 Entrez基因: 29527 老鼠 Omim公司: 600262 人类 瑞士保护银行: 第35354页 人类 瑞士保护银行: 问题05769 鼠标 瑞士保护银行: 第35355页 老鼠 尤尼金: 196384 人类
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别名 COX 2抗体 COX-2抗体 COX2抗体
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图片
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1-3车道: 稀释1/1000的抗COX2/环氧合酶2抗体[EPR12012](ab179800) 4-6车道: 抗COX2/环氧合酶2抗体[RM1026]( ab283574号 )稀释度为1/1000 1号和4号车道: 野生型HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 2号和5号车道: PTGS2敲除HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 3号和6号车道: A549(人肺癌上皮细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 69千帕 暴露时间: 180秒 与ab179800相比 ab283574号 灵敏度更高,我们建议 ab283574号 作为在western blot中检测COX2的替代方法 -
所有车道: 稀释1/1000的抗COX2/环氧合酶2抗体[EPR12012](ab179800) 所有车道: A549(人肺癌上皮细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 69千帕 曝光时间:第一道:180秒,第二道:140秒。 我们建议使用更高灵敏度的ECL衬底来增加带强度 -
所有车道: 稀释1/1000的抗COX2/环氧合酶2抗体[EPR12012](ab179800) 车道1: RAW 264.7对照LPS(0 ng/mL,4 h)细胞裂解物 车道2: RAW 264.7处理过的LPS(100 ng/mL,4 h)细胞裂解物 3号车道: 野生型A549 ab277305型 细胞裂解产物 车道4: PTGS2淘汰赛A549 ab283802型 细胞裂解产物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 69千帕 观察到的频带大小: 69千帕 Western blot:抗-PTGS2抗体[EPR12012](ab179800)在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )1/2000稀释的负载对照染色,显示为红色。在蛋白质印迹中,ab179800显示与PTGS2特异性结合。 在野生型RAW 264.7细胞裂解液中观察到69kDa的条带,在PTGS2敲除细胞系中未观察到该大小的信号。 为了生成此图像,分析野生型和PTGS2敲除RAW 264.7细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在4°C下与一级抗体孵育过夜之前,在TBS-0.1%吐温®20(TBS-T)中的3%牛奶中封闭膜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗COX2/环氧合酶2抗体[EPR12012](ab179800) 车道1: B16-F10(小鼠皮肤黑色素瘤)全细胞裂解物 车道2: Raw 264.7(小鼠Abelson小鼠白血病病毒诱导的肿瘤巨噬细胞)全细胞裂解物 3号车道: 小鼠视网膜组织裂解物 车道4: 小鼠海马组织裂解物 车道5: 小鼠心脏组织裂解物 车道6: 小鼠肾组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 69千帕 观察到的频带大小: 72千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 60秒 阻塞缓冲液和浓度: 5%NFDM/TBST 稀释缓冲液和浓度: 5%NFDM/TBST COX2在Raw264.7、小鼠视网膜、海马、心脏、肾脏等组织中低水平表达(PMID:2205457,PMID:2601832,PMID:33045674,PMID:33737575)。 WB使用更高灵敏度的ECL基板。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗COX2/环氧合酶2抗体[EPR12012](ab179800) 车道1: PTGS2(COX2/环氧合酶2)KO A549(人肺癌上皮细胞)细胞裂解液与等体积0.1%TBS稀释的Intercept®(TBS)阻断缓冲液 车道2: 使用等体积0.1%TBS稀释的Intercept®(TBS)阻断缓冲液稀释的野生型A549细胞裂解液 3号车道: U-87 MG(人胶质母细胞瘤-星形细胞瘤上皮细胞)全细胞裂解液,使用等体积0.1%TBS稀释的Intercept®(TBS)Blocking Buffer 车道4: 用等体积0.1%TBS稀释的Intercept®(TBS)Blocking Buffer裂解MCF7(人乳腺癌上皮细胞)全细胞 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附( ab216773号 )稀释度为1/100000 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 69千帕 观察到的频带大小: 74千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阴性对照:MCF7(PMID:24325753,PMID:16997132) 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 Western blot假彩色图像:抗COX2/环氧合酶2抗体[EPR12012](ab179800)以1/1000稀释度染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度加载控制染色,以红色显示。 在Western blot中,ab179800被证明与COX2/环氧合酶2特异结合。 在野生型A549细胞裂解物中观察到74kDa的靶带,在COX2/环氧合酶2敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约280802 为了生成此图像,对野生型和COX2/环氧合酶2敲除A549细胞裂解物进行了分析。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗COX2/环氧合酶2抗体[EPR12012](ab179800) 车道1: 野生型A549细胞裂解物 车道2: PTGS2敲除A549细胞裂解物 3号车道: U-87 MG细胞裂解物 车道4: MOLT-4细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 69千帕 蛋白质印迹的假彩色图像:1/1000稀释的抗-COX2/环氧合酶2抗体[EP112012]染色,显示为绿色; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab179800显示与COX2/环氧合酶2特异性结合。 在野生型A549细胞裂解液中观察到75 kDa的条带,在PTGS2敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约280802 (敲除细胞裂解物 ab283825号 ). 为了生成此图像,分析了野生型和PTGS2敲除A549细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在4°C下与一级抗体孵育过夜之前,在荧光蛋白印迹(基于TBS)封闭溶液中封闭膜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗COX2/环氧合酶2抗体[EPR12012](ab179800) 车道1: A549细胞裂解物 车道2: U-87 MG细胞裂解物 3号车道: 野生型HeLa细胞裂解物 车道4: PTGS2敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 69千帕 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在75 kDa下观察到ab179800。 红色-装载控制, 约8245 在37 kDa时观察到。 ab179800在野生型HeLa细胞中显示与COX2/环氧合酶2反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255420美元 (敲除细胞裂解物 约263795 )已使用。 对野生型和COX2/环氧合酶2敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab179800和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析小鼠肾组织切片,用纯化的ab179800在1/4000稀释度(0.125µg/ml)下标记COX2/环氧合酶2。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行20分钟的热介导抗原检索。 兔特异性IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB( 约209101 )作为二级抗体。 阴性对照:仅二抗对照。 苏木精用作副染色。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析小鼠肝组织切片,用纯化的ab179800在1/4000稀释度(0.125µg/ml)下标记COX2/环氧合酶2。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行20分钟的热介导抗原检索。 兔特异性IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB( 约209101 )作为二级抗体。 阴性对照:仅二级抗体对照。 苏木精用作副染色。 -
所有车道: 抗COX2/环氧合酶2抗体[EPR12012](ab179800),稀释度为1/1000(纯化) 车道1: 含5%NFDM/TBST的U-87 MG(人胶质母细胞瘤-星形细胞瘤上皮细胞系)全细胞裂解液 车道2: HCT 116(人结直肠癌细胞系)全细胞裂解液与5%NFDM/TBST 3号车道: MCF7(人乳腺癌细胞系)含有5%NFDM/TBST的全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 69千帕 观察到的频带大小: 72千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间 车道1: 3.25秒 车道2和3: 180秒 在HCT 116和MCF7中观察到的表达谱与文献一致(PMID:14739610,PMID:24325753,PMID:16997132)。 阴性对照:HCT 116(PMID:14739610)和MCF7(PMID:24325753,PMID:16997132) -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析人结肠癌组织标记COX2/环氧合酶2,稀释度为1/250,未纯化ab179800。 在开始IHC染色方案之前,执行热介导抗原检索。 -
用稀释度为1/250的未纯化ab179800标记人结肠组织COX2/环氧合酶2的免疫组织化学(福尔马林/PFA固定石蜡包埋)分析。 在开始IHC染色方案之前,执行热介导抗原检索。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋)分析用稀释1/250的未纯化ab179800标记人肝组织COX2/环氧合酶2。 在开始IHC染色方案之前,执行热介导抗原检索。 -
1/5000稀释(纯化)的抗COX2/环氧合酶2抗体[EPR12012](ab179800)+20µg的小鼠脾组织裂解物 次要 HRP缀合的抗兔IgG,在1/50000稀释时对非还原形式的IgG特异性 预测的带宽大小: 69千帕 观察到的频带大小: 72千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
1/5000稀释(纯化)的抗COX2/环氧合酶2抗体[EPR12012](ab179800)+20µg的A549全细胞裂解液 次要 HRP-结合抗兔IgG,在1/50000稀释度下特异于非还原型IgG 预测的带宽大小: 69千帕 观察到的频带大小: 72千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析大鼠肾组织用纯化的ab179800标记COX2/环氧合酶2(1/100)。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG(H+L)作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精复染。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析人肺癌组织标记COX2/环氧合酶2,纯化ab179800为1/100。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG(H+L)作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精复染。 -
ab179800(纯化)在1/30免疫沉淀COX2的A549全细胞裂解液中。 通道1(输入):A549全细胞裂解液(10µg) 通道2(+):ab179800+A549全细胞裂解物。 通道3(-):兔单克隆IgG( 约172730 )而不是A549全细胞裂解液中的ab179800。 对于western blotting,HRP-结合的抗兔IgG,特异性的还原型IgG被用作二级抗体(1/1500)。 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
抗COX2/环氧合酶2抗体[EPR12012](ab179800)(1/1000稀释度)(未净化)+A549细胞裂解液(10µg) 预测的带宽大小: 69千帕 -
使用未纯化的ab179800对A549细胞裂解物免疫沉淀颗粒进行Western blot分析。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (127)
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