主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR3912]到BRG1 适用于:ChIC/CUT&RUN seq、ICC/IF、WB、IHC-P、Flow Cyt(Intra)、IP 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
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相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR3912]至BRG1 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HAP1、HEK-293T、K562、RAW264.7、NIH/3T3、PC-12和Molt-4细胞裂解物。 ICC/IF:HeLa细胞; SMARCA4-HAP1细胞。 IHC-P:人类结肠、膀胱移行癌、乳腺癌、膀胱癌、卵巢癌和正常扁桃体组织、小鼠和大鼠胃组织。 流式细胞仪(内部):HeLa细胞 IP:K562细胞裂解物,NIH/3T3细胞裂解物。 ChIC/CUT&RUN-Seq:HeLa细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
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纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR3912 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同种型对照 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
重组蛋白
应用
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靶标
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功能 转录辅激活子与核激素受体协同增强转录激活。 CREST-BRG1复合物的成分,这是一种多蛋白复合物,通过调控阻遏物复合物钙依赖性释放和激活物复合物招募来调节启动子激活。 在静息神经元中,c-FOS启动子的转录被磷酸化RB1-HDAC阻遏物复合体的BRG1依赖性募集抑制。 钙内流后,RB1被钙调神经磷酸酶去磷酸化,导致阻遏物复合物的释放。 同时,CREST依赖机制增加了CREBBP对启动子的招募,从而导致转录激活。 CREST-BRG1复合物也与NR2B启动子结合,NR2B表达的活性依赖性诱导涉及HDAC1的释放和CREBBP的招募。 属于神经前体特异染色质重塑复合体(npBAF复合体)和神经特异染色质重构复合体(nBAF复合物)。 在神经发育过程中,当神经元退出细胞周期并进入成年状态时,会发生从干/祖细胞到有丝分裂后染色质重塑机制的转变。 从增殖的神经干/祖细胞向有丝分裂后神经元的转变需要npBAF和nBAF复合体亚单位组成的转换。 当神经祖细胞退出有丝分裂并分化为神经元时,含有ACTL6A/BAF53A和PHF10/BAF45A的npBAF复合物被交换为神经元特异复合物(nBAF)中的同源替代ACTL6B/BAF53B和DPF1/BAF45B或DPF3/BAF45C亚基。 npBAF复合物对多能干细胞的自我更新/增殖能力至关重要。 nBAF复合物和CREST在调节树突生长所必需基因的活性方面发挥作用。 SMARCA4/BAF190A可通过增强Notch依赖性增殖信号促进神经干细胞自我更新/增殖,同时使神经干细胞对SHH依赖性分化线索不敏感(通过相似性)。 还通过与WINAC复合体的关联参与维生素D偶联转录调控,WINAC复合物是维生素D受体(VDR)招募的染色质重塑复合体,是配体结合VDR介导的CYP27B1基因反抑制所必需的。 作为ZEB1的辅抑制因子调节E-cadherin转录,并且是ZEB1诱导上皮-间充质转化(EMT)所必需的。 -
组织特异性 与ZEB1在已建立系的E-钙粘蛋白阴性细胞、正常结肠基质以及结直肠癌侵袭前沿的去分化上皮细胞(蛋白质水平)中进行结肠癌。 -
疾病相关 SMARCA4的缺陷是2型横纹肌样肿瘤易感综合征(RTPS2)的原因[MIM:613325]。 RTPS2是一种家族性癌症综合征,易患肾或肾外恶性横纹肌样肿瘤和多种中枢神经系统肿瘤,包括脉络丛癌、髓母细胞瘤和中枢原始神经外胚层肿瘤。 横纹肌样肿瘤是儿童早期发生的最具侵袭性和致命性的恶性肿瘤。 -
序列相似性 属于SNF2/RAD54解旋酶家族。 包含1个溴结构域。 包含1个解旋酶ATP结合结构域。 包含1个解旋酶C末端结构域。 包含1个HSA域。 -
翻译后修饰 DNA损伤后发生磷酸化,可能是ATM或ATR引起的。 -
细胞定位 核心。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 6597 人类 Entrez基因: 20586 鼠标 Entrez基因: 171379 老鼠 Omim公司: 603254 人类 瑞士保护: 第51532页 人类 瑞士保护: Q3TKT4号机组 鼠标 瑞士保护: Q8K1P7问题 老鼠 尤尼金: 327527 人类
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别名 ATP依赖性解旋酶SMARCA4抗体 ATP依赖性解旋酶SMARCA4抗体 BAF 190抗体
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图片
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BRG1是从NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)中免疫沉淀的,其全细胞裂解液用ab108318以1/30稀释(0.35mg裂解液中含有2µg)。 使用ab108318在1/1000稀释度下对免疫沉淀进行Western blot。 用于IP二级抗体(HRP)的VeriBlot( 阿布131366 )以1/5000的稀释度用作第二抗体。 车道1(输入): NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞),全细胞裂解物,10μg 车道2(+): NIH/3T3全细胞裂解物 车道3(-): 兔单克隆IgG( 约172730 )而不是NIH/3T3全细胞裂解液中的ab108318 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 观测MW:185 kDa。 -
BRG1是从K-562(人类慢性粒细胞白血病淋巴母细胞)全细胞裂解液中以1/30稀释度(0.35mg裂解液中2µg)用ab108318免疫沉淀而来。 使用ab108318在1/1000稀释度下对免疫沉淀进行Western blot。 用于IP二级抗体(HRP)的VeriBlot( 阿布131366 )以1/5000稀释度作为二级抗体。 车道1(输入): K-562(人类慢性粒细胞白血病淋巴细胞),全细胞裂解物,10μg 车道2(+): K-562全细胞裂解物 车道3(-): 兔单克隆IgG( 约172730 )而不是K-562全细胞裂解液中的ab108318 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 观测MW:185 kDa。 -
所有车道: 抗-BRG1抗体[EPR3912](ab108318),稀释度为1/10000 车道1: 野生型HEK-293T细胞裂解物 车道2: SMARCA4敲除HEK-293T细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 185千Da 观察到的频带大小: 185千Da 车道1-2: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在185 kDa时观察到ab108318。 124 kDa时观察到的红色抗V蛋白抗体[VIN-54]。 western blot显示ab108318在野生型HEK-293T细胞中与SMARCA4反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255432号 (敲除细胞裂解物 约263853 )已使用。 对野生型HEK-293T和SMARCA4敲除型HEK-29.3T细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab108318和抗-Vinculin抗体[VIN-54]在4°C下过夜,分别以1比10000和1比20000稀释。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析人膀胱癌组织切片,在1/500稀释度(0.23µg/ml)下用纯化的ab108318标记BRG1。 热介导抗原检索使用 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 免疫组织探针一步法HRP聚合物(即用型)用作二级抗体。 阴性对照:PBS代替一抗。 苏木精用作副染色。 -
所有车道: 1/1000稀释的抗-BRG1抗体[EPR3912](ab108318) 车道1: 野生型HAP1细胞裂解物 车道2: BRG1敲除HAP1细胞裂解物 3号车道: K562细胞裂解物 车道4: Molt-4细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 185千Da 其他波段位于: 185千Da。 我们不确定这些额外乐队的身份。 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 红色-装载控制, 约18058 (未净化),在124 kDa下观察到。 在野生型HAP1细胞中,ab108318与BRG1特异性反应,并伴有额外的交叉反应带。 使用BRG1敲除样品时未观察到条带。 对野生型和BRG1基因敲除样品进行SDS-PAGE、ab108318和 约18058 (对文丘林的负荷控制)分别稀释1/1000和1/10000,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1hr。 -
在1/20稀释度(10µg/ml)(红色)下用纯化ab108318标记BRG1的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞的细胞内流式细胞术分析。 细胞用4%多聚甲醛固定,用90%甲醇渗透。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488, 约150077 )2000年1月使用二级抗体。 同位素对照-兔单克隆IgG(黑色)。 未标记对照-未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞(蓝色)。 -
对不同批次的ab108318在K-562(人类慢性粒细胞白血病淋巴母细胞)裂解液中进行0.05µg/ml的测试。每条车道上装载15µg裂解液。 185 kDa时观察到的谱带。 -
所有车道: 1/1000稀释度下的抗-BRG1抗体[EPR3912](ab108318)(纯化) 车道1: K-562(人慢性粒细胞白血病淋巴细胞)全细胞裂解物 车道2: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解物 3号车道: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 185千Da 观察到的频带大小: 185千Da -
抗-BRG1抗体[EPR3912](ab108318)(1/10000稀释度)(纯化)+RAW264.7(小鼠Abelson小鼠白血病病毒诱导的肿瘤巨噬细胞)全细胞裂解物(20µg) 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 185千Da 观察到的频带大小: 185千Da -
大鼠胃组织切片的免疫组织化学(福尔马林/PFA固定石蜡包埋切片)分析,用1/500稀释(0.23µg/ml)的纯化ab108318标记BRG1。 热介导抗原检索使用 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 免疫组织探针一步法HRP聚合物(即用型)用作二级抗体。 阴性对照:PBS代替一抗。 苏木精用作副染色。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析小鼠胃组织切片,在1/500稀释度(0.23µg/ml)下用纯化ab108318标记BRG1。 热介导抗原检索使用 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 免疫组织探针一步法HRP聚合物(即用型)用作二级抗体。 阴性对照:PBS代替一抗。 苏木精用作副染色。 -
ab108318(未纯化)染色野生型HAP1细胞中的BRG1(顶部面板)和BRG1敲除HAP1的细胞(底部面板)。 细胞用4%甲醛固定(10分钟),用0.1%Triton X-100透化5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后用ab108318以1/500的稀释度培养细胞,并 约195889年 以1/250稀释度(以伪红色显示)在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )浓度为2μg/ml(显示为绿色)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
免疫组织化学分析中,使用ab108318在1/100稀释度下对福尔马林固定石蜡包埋的人类结肠组织进行BRG1染色。 在开始IHC染色方案之前,进行热介导抗原回收。 -
所有车道: 抗BRG1抗体[EPR3912](ab108318),稀释度为1/1000(未净化) 车道1: K562细胞裂解物 车道2: Molt-4细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 185千Da -
HeLa细胞中的ab108318(未纯化)染色BRG1。 细胞用4%甲醛固定(10分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab108318以1/500的稀释度培养细胞,并 约195889年 以1/250稀释度(以伪红色显示)在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )浓度为2μg/ml(显示为绿色)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
在免疫组化分析中,使用ab108318在1/100稀释度下对福尔马林固定石蜡包埋的人膀胱移行癌组织进行BRG1染色。 在开始IHC染色方案之前,进行热介导抗原回收。 -
免疫组化分析中,使用ab108318在1/100稀释度下对福尔马林固定石蜡包埋的人类泌尿系乳腺癌组织进行BRG1染色。 在开始IHC染色方案之前,进行热介导抗原回收。 -
免疫组化分析中,使用ab108318在1/100稀释度下对福尔马林固定石蜡包埋的人卵巢癌组织进行BRG1染色。 在开始IHC染色方案之前,进行热介导抗原回收。 -
免疫组织化学分析中,使用ab108318在1/100稀释度下对正常人扁桃体组织进行BRG1染色。 在开始IHC染色方案之前,进行热介导抗原回收。
数据表及文件
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文献 (7)
科芬克C 等。 选择性口服生物利用VHL招募PROTAC可在体内实现SMARCA2降解。 国家通讯社 13:5969 (2022). 公共医学:36216795 Chaudet K公司 等。 卵巢和腹膜后粘液性肿瘤中间变性癌中SWI/SNF蛋白和claudin-4的表达。 组织病理学 77:231-239 (2020). 公共医学:32268438 林迪 等。 SMARCA4失活定义了具有横纹肌样和小细胞特征以及种系突变关联的未分化子宫肉瘤子集。 病态 32:1675-1687 (2019). 公共医学:31190001 法纳比·W 等。 通过基于结构的PROTAC设计证明癌症中的BAF复杂漏洞。 自然化学生物 15:672-680 (2019). 公共医学:31178587 东Y 等。 HOXC-AS1-MYC调节环参与胃癌的生长和转移。 实验临床癌症研究杂志 38:502 (2019). 公共医学:31870402 杜德克AH 等。 通过半胱氨酸蛋白酶介导的裂解使病毒感染细胞中的染色质重塑子SMARCA2和SMARCA4部分失活。 J维罗尔 92:无(2018)。 公共医学:29848589 Vangamudi B公司 等。 SMARCA2/4 ATP酶结构域在SWI/SNF突变癌中超越溴代胺作为药物靶点:来自cDNA拯救和PFI-3抑制剂研究的见解。 癌症研究 75:3865-78 (2015). 公共医学:26139243