主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔ATG12单克隆抗体[EPR27485-89] 适用人群:IHC-P、ICC/IF、IP、WB 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR27485-89]至ATG12 -
宿主 兔子 -
特异性 不适合人类ICC。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 小鼠、大鼠、人类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:野生型和敲除型HAP1全细胞裂解物; HCT116、HeLa、293T、NIH/3T3、PC-12全细胞裂解物; 小鼠胰腺和睾丸&大鼠大脑和睾丸组织溶解物。 IHC-P:小鼠睾丸和乳腺癌; 大鼠睾丸; 人乳腺癌FFPE组织切片; 野生型和敲除型HAP1细胞颗粒。 ICC/IF:NIH/3T3细胞。 IP:Hela和NIH/3T3全细胞裂解物
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR27485-89型 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 自噬所需的泛素样蛋白。 与ATG3和ATG5结合。 -
组织特异性 无处不在的。 -
序列相似性 属于ATG12家族。 -
结构域 与泛素家族具有弱序列相似性,但包含一个“泛素超折叠”,并且C末端Gly是异肽连接所必需的。 -
细胞定位 细胞质。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 9140 人类 Entrez基因: 67526 鼠标 Entrez基因: 361321 老鼠 Omim公司: 609608 人类 瑞士保护银行: O94817号 人类 瑞士保护银行: 问题9CQY1 鼠标 瑞士保护银行: Q2TBJ5号 老鼠 尤尼金: 264482 人类
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别名 Apg12抗体 APG12样抗体 APG12L抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗-ATG12抗体[EPR27485-89](ab303488) 车道1: 小鼠胰腺组织裂解物 车道2: 小鼠睾丸组织裂解物 3号车道: 大鼠脑组织裂解物 车道4: 大鼠睾丸组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 52千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 26秒 阻塞/稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST 新鲜制备裂解液并立即用于蛋白质印迹,以尽量减少蛋白质降解。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-ATG12抗体[EPR27485-89](ab303488) 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: 293T(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 3号车道: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解物 车道4: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 52千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞/稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST 暴露时间: 1-2车道:125秒 3-4车道:26秒 新鲜制备裂解液并立即用于蛋白质印迹,以尽量减少蛋白质降解。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-ATG12抗体[EPR27485-89](ab303488) 车道1: 野生型HAP1(人类慢性粒细胞白血病近单倍体细胞系),全细胞裂解物 车道2: Atg12敲除HAP1全细胞裂解物 3号车道: HCT116(人结直肠癌上皮细胞),全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的频带大小: 52千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 180秒 阻塞/稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST 在Western blot中,ab303488被证明与Atg5结合的Atg12蛋白特异结合。 在野生型HAP1细胞裂解液的52kDa处观察到一条带,在Atg12敲除细胞系中未观察到该大小的信号。 -
从0.35 mg NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解液10µg中用ab303488以1/30稀释(0.35 mg裂解液中2 ug)免疫沉淀ATG12。 用ab303488在1/1000稀释度下对免疫沉淀进行Western blot。 用于IP二级抗体(HRP)的VeriBlot( 阿布131366 )以1/5000稀释度使用。 车道1 :NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解物10ug 车道2 :ab303488 IP in NIH/3T3全细胞裂解液 3号车道 :兔单克隆IgG( 约172730 )而不是NIH/3T3全细胞裂解液中的ab303488 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:180秒。 -
从0.35 mg Hela(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解液10µg中用ab303488以1/30稀释(0.35 mg裂解液中2 ug)免疫沉淀ATG12。 用ab303488在1/1000稀释度下对免疫沉淀进行Western blot。 用于IP二级抗体(HRP)的VeriBlot( 阿布131366 )以1/5000稀释度使用。 车道1 :Hela(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解液10ug 车道2 :ab303488 IP in Hela全细胞裂解液 3号车道 :兔单克隆IgG( 约172730 )而不是Hela全细胞裂解液中的ab303488 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:180秒。 -
(A)野生型HAP1(人类慢性粒细胞白血病近单倍体细胞)细胞沉淀和(B)ATG12敲除HAP1细胞沉淀石蜡包埋切片的免疫组织化学分析。 使用2000年1月使用的ab303488(0.246µg/ml),然后使用现成的徕卡DS9800(Bond™Polymer Refine Detection kit)。 (A)野生型HAP1细胞颗粒呈阳性染色,(B)ATG12敲除HAP1的细胞颗粒无染色。 该切片在室温下与ab303488孵育30分钟。 在莱卡生物系统BOND®RX仪器上进行免疫染色,苏木精对其进行复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的徕卡DS9800(Bond™Polymer Refine Detection)试剂盒。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟 -
用ab303488在1/100(4.91µg/ml)浓度下对石蜡包埋的人类乳腺癌组织标记ATG12进行免疫组织化学分析,然后使用现成的徕卡DS9800(Bond ™ 聚合物精制检测)套件。 人乳腺癌染色阳性。 将切片与ab303488在室温下孵育30分钟。 在徕卡生物系统BOND上进行免疫染色 ® RX仪器苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的徕卡DS9800(Bond ™ 聚合物精制检测)套件。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟 -
用ab303488在1/100(4.91µg/ml)浓度下对石蜡包埋的大鼠睾丸组织标记ATG12进行免疫组织化学分析,然后使用现成的徕卡DS9800(Bond ™ 聚合物精制检测)套件。 大鼠睾丸染色阳性。 该切片在室温下与ab303488孵育30分钟。 在徕卡生物系统BOND上进行免疫染色 ® RX仪器苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的徕卡DS9800(Bond ™ 聚合物精制检测)套件。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟 -
用ab303488在1/100(4.91µg/ml)浓度下标记ATG12的石蜡包埋小鼠乳腺癌组织,然后使用现成的徕卡DS9800(Bond ™ 聚合物精炼检测)试剂盒。 小鼠乳腺癌染色阳性。 该切片在室温下与ab303488孵育30分钟。 在徕卡生物系统BOND上进行免疫染色 ® RX仪器苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的徕卡DS9800(Bond ™ 聚合物精制检测)套件。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟 -
石蜡包埋小鼠睾丸组织的免疫组织化学分析,用1/100(4.91µg/ml)的ab303488标记ATG12,然后用现成的Leica DS9800(Bond ™ 聚合物精制检测)套件。 小鼠睾丸染色阳性。 该切片在室温下与ab303488孵育30分钟。 在徕卡生物系统BOND上进行免疫染色 ® RX仪器苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的徕卡DS9800(Bond ™ 聚合物精制检测)套件。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟 -
用ab303488以1/50(9.82µg/mL)的浓度标记ATG12的4%对甲醛固定、0.1%TritonX-100渗透NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)细胞进行免疫荧光分析,然后 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)预吸附抗体,浓度为1/1000 2µg/mL)(绿色)。 用氯喹(200µM)处理2小时的NIH/3T3细胞的共焦图像。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 约195889年 抗α-管蛋白小鼠单克隆抗体-微管标记(Alexa Fluor ® 594)用于在1/200稀释度(2.5µg/mL)下对微管蛋白进行复染(红色)。 核染色为DAPI(蓝色)。 仅二级抗体对照:二级抗体为 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)以1/1000稀释度(2µg/mL)预吸附。
实验方案
数据表及文件
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合格证书
文献 (1)
于H 等。 小胶质细胞的分子信号影响青光眼大胶质细胞自噬和神经元存活。 i科学 26:106839 (2023). 公共医学:37250793