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.2022年2月；13(2):3019-3028.
doi:10.1080/21655979.2021.2023994。

组织蛋白酶C下调通过抑制p38 MAPK/NF-κB通路减轻子痫前期患者内皮细胞功能障碍

范璐 1, 韩功 1, 侯康雷 1, 李娟 2
附属公司

组织蛋白酶C下调通过抑制p38 MAPK/NF-κB通路减轻子痫前期患者内皮细胞功能障碍

范璐等。 生物工程. 2022年2月.

摘要

内皮细胞功能障碍是先兆子痫（PE）的重要病理生理特征。据报道，组织蛋白酶C在PE患者的母体血管内皮中上调。p38 MAPK过度激活可导致多种疾病，包括PE。NF-κB通路可促进子宫胎盘功能障碍、内皮应激和PE的发展。此外，组织蛋白酶C可激活p38 MAPK/NF-κB途径。本研究建立了HUVEC缺氧/复氧（H/R）损伤模型，探讨组织蛋白酶C在内皮细胞功能障碍中的生物学功能，并阐明其潜在的分子机制。评估H/R刺激的HUVEC中组织蛋白酶C和p38 MAPK/NF-κB通路的相关性，以及组织蛋白酶C和p38 MAPK/NF--κB途径对HUVECs活力、凋亡、侵袭、体外血管生成和氧化应激的影响。结果表明，H/R损伤使HUVEC组织蛋白酶C表达升高，激活了p38 MAPK/NF-κB通路，组织蛋白酶C敲除抑制了H/R刺激的HUVECs中p38 MAPK/NF-激酶B通路的活性。组织蛋白酶C下调可提高H/R刺激的HUVEC的存活率、抑制凋亡和增强其侵袭性。此外，组织蛋白酶C的下调减轻了体外氧化应激并诱导更强的HUVEC血管生成。此外，组织蛋白酶C敲除对内皮细胞功能障碍的保护作用被p38 MAPK激活物茴香霉素逆转。换言之，组织蛋白酶C的下调可通过抑制p38 MAPK/NF-κB通路，提高H/R刺激的HUVEC的活性，增强其抗凋亡能力、抗氧化能力、侵袭能力以及血管生成潜能。

关键词：组织蛋白酶C；HUVEC；内皮细胞功能障碍；p38 MAPK/NF-κB通路；先兆子痫。

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利益冲突声明

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数字

图1。
图1。
H/R刺激的HUVEC组织蛋白酶C表达增强，p38 MAPK/NF-κB通路激活。（a） Western blot检测组织蛋白酶C的表达。（b） 采用Western blot分析检测p-p38 MAPK、p38 MAPK、p-NF-κb p65、NFκb p 65、p-Iκbα和Iκbα的表达。***p<0.001。
图2。
图2。
组织蛋白酶C下调抑制H/R刺激的HUVEC中p38 MAPK/NF-κB通路的活性。（a） 用si-capins C-1或si-capsin C-2转染HUVEC。Western blot检测组织蛋白酶C蛋白表达，验证转染效率。（b） 用si-capins C-1或si-capsin C-2转染HUVEC。RT-qPCR检测组织蛋白酶C mRNA水平以验证转染效率。（c） 采用Western blot分析检测p-p38 MAPK、p38 MAPK、p-NF-κB p65、NFκB p 65、p-IκBα和IκBα的表达p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。
图3。
图3。
组织蛋白酶C下调通过抑制p38 MAPK/NF-κB通路增强H/R刺激的HUVEC的活性并抑制其凋亡。（a） 采用CCK-8法检测HUVEC的活力。（b，c）采用流式细胞术分析来检测HUVECs的凋亡。（d） 采用Western blot分析检测Bcl-2、Bax、Birc5、裂解PARP和PARP的表达。*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。
图4。
图4。
组织蛋白酶C下调通过抑制p38 MAPK/NF-κB通路减轻H/R刺激的HUVEC中的氧化应激。（a） MDA检测试剂盒和SOD检测试剂盒检测MDA和SOD水平。（b） Western blot检测OXSR1、硝基酪氨酸、p-eNOS和eNOS的表达。*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。
图5。
图5。
组织蛋白酶C下调通过抑制p38 MAPK/NF-κB通路促进H/R刺激的HUVEC的侵袭。（a，b）采用Transwell分析检测HUVEC的侵袭。**p<0.01，***p<0.001。
图6。
图6。
组织蛋白酶C下调通过抑制p38 MAPK/NF-κB通路在体外诱导更强的HUVEC血管生成。（a，b）试管形成试验用于检测体外HUVEC血管生成。***p<0.001。
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