跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

政府意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2021年1月1日；11(6):2612-2633.
doi:10.7150/thno.52199。 eCollection 2021年。

CXCL12介导的HOXB5过表达通过反式激活CXCR4和ITGB3促进结直肠癌转移

微博冯 1, 黄文杰 2 3, 陈杰（音译） 1, 乔晨阳 1, 刘丹飞 2, 《小雨记》 2, 孟燮 2, 张彤岳（音） 2, 王一军（Yijun Wang） 2, 孙梦玉 2, 田院长 2, 戴明风扇 1, 聂永战 1, 吴开春 1, 夏利民 1 2
附属公司

CXCL12介导的HOXB5过表达通过反式激活CXCR4和ITGB3促进结直肠癌转移

微博冯等。 治疗诊断科技. .

摘要

背景：转移是结直肠癌高死亡率的主要原因。然而，CRC转移的分子机制尚不清楚。在这里，我们报道了HOX家族成员同源异型盒B5（HOXB5）在促进CRC转移中的新作用。方法：用免疫组织化学方法检测HOXB5及其靶基因在人CRC中的表达。通过染色质免疫沉淀和荧光素酶报告子分析来测量HOXB5对靶基因的转录调控。通过以下方法评估CRC细胞的转移能力体内肺和肝转移模型。结果：HOXB5的高表达与CRC患者的远处转移、AJCC分期增高和预后不良呈正相关。HOXB5表达是CRC患者复发和生存的独立且显著的危险因素。HOXB5的过度表达通过反式激活转移相关基因、C-X-C基序趋化因子受体4（CXCR4）和整合素亚基β3（ITGB3）促进CRC转移。C-X-C基序趋化因子配体12（CXCL12）是CXCR4的配体，通过细胞外调节蛋白激酶（ERK）/ETS原癌基因1、转录因子（ETS1）途径上调HOXB5的表达。HOXB5的敲低降低了CXCL12增强的CRC转移。此外，特异性CXCR4抑制剂AMD3100显著抑制HOXB5介导的CRC转移。HOXB5的表达与人CRC组织中CXCR4和ITGB3的表达呈正相关，HOXB5/CXCR4或HOXB4/ITGB3共同表达阳性的患者预后最差。结论：我们的研究表明HOXB5是CRC的预后生物标志物，并定义了CXCL12-HOXB5-CXCR4正反馈回路，该回路在促进CRC转移中发挥重要作用。

关键词：AMD3100；C-X-C基序趋化因子受体4；大肠癌；同源盒B5；转移。

PubMed免责声明

利益冲突声明

竞争利益：作者声明不存在竞争利益。

数字

图1
图1
HOXB5的高表达促进CRC的侵袭和转移，并预测人类CRC的不良预后。（A）左：HOXB5在邻近非肿瘤组织和CRC组织中的IHC染色代表性图像。比例尺代表200µm（低倍率）和50µm。右：通过两个独立队列的IHC评分评估CRC样本和配对相邻非肿瘤样本中HOXB5蛋白水平。（B）Kaplan-Meier分析HOXB5表达与两个独立队列CRC患者复发率或总生存时间之间的相关性。（C）左：实时PCR分析HOXB5型mRNA在正常结肠上皮组织（n=20）和120对相邻非肿瘤组织及原发性CRC组织中的表达。中：相对mRNA表达HOXB5型复发（69例）或无复发（51例）患者的CRC样本。右：相对mRNA表达HOXB5型在有转移（n=44）或无转移（n=38）患者的CRC样本中。（D）蛋白质和mRNA水平HOXB5型通过IHC和实时PCR在20对正常结肠上皮组织、原发性CRC组织和匹配的转移性CRC组中检测到。正常结肠上皮组织、原发性CRC组织和匹配的转移性CRC组中HOXB5表达的IHC染色代表性图像（左）和实时PCR分析（右）。比例尺代表600µm（低倍率）和60µm。（E）建立的人CRC细胞系中HOXB5蛋白表达的Western blotting分析。（F）慢病毒转染后显示的CRC细胞系中HOXB5蛋白表达的Western blotting分析。（G）Transwell分析显示的CRC细胞系的迁移和侵袭能力。（H-L） 体内肺转移测定。将四种稳定的细胞系注射到裸鼠的尾静脉中（每组10只）。（H） 显示了植入后9周不同组的典型生物发光图像以及肺转移的发生率。（一） 连续9周记录的生物发光信号强度。（J） 肺转移结节的数量。（K） 不同组裸鼠的总体存活率。（五十） 显示了不同组肺组织H&E染色的代表性图像。比例尺代表1 mm（低倍率）和100µm（高倍率）。（M-Q） 体内肝转移检测。将四种稳定的细胞系注射到裸鼠的脾脏中（每组10只小鼠）。（M） 显示了植入后9周不同组的典型生物发光图像以及肝转移的发生率。（N） 连续9周记录的生物发光信号强度。（O） 肝转移结节的数量。（P） 不同组裸鼠的总体存活率。（Q） 显示了来自不同组的肝组织的H&E染色的代表性图像。比例尺代表500µm（低倍率）和100µm。所有数据均显示为平均值±标准差*P（P）< 0.05 **P（P）˂ 0.01.
图1
图1
HOXB5的高表达促进CRC的侵袭和转移，并预测人类CRC的不良预后。（A）左：HOXB5在邻近非肿瘤组织和CRC组织中的IHC染色代表性图像。比例尺代表200µm（低倍率）和50µm。右：通过两个独立队列的IHC评分评估CRC样本和配对相邻非肿瘤样本中HOXB5蛋白水平。（B）Kaplan-Meier分析HOXB5表达与两个独立队列CRC患者复发率或总生存时间之间的相关性。（C）左：实时PCR分析HOXB5型mRNA在正常结肠上皮组织（n=20）和120对相邻非肿瘤组织及原发性CRC组织中的表达。中：相对mRNA表达HOXB5型复发（69例）或无复发（51例）患者的CRC样本。右：相对mRNA表达HOXB5型在有转移（n=44）或无转移（n=38）患者的CRC样本中。（D）蛋白质和mRNA水平HOXB5型通过IHC和实时PCR在20对正常结肠上皮组织、原发性CRC组织和匹配的转移性CRC组中检测到。正常结肠上皮组织、原发性CRC组织和匹配的转移性CRC组中HOXB5表达的IHC染色代表性图像（左）和实时PCR分析（右）。比例尺代表600µm（低倍率）和60µm。（E）建立的人CRC细胞系中HOXB5蛋白表达的Western blotting分析。（F）慢病毒转染后显示的CRC细胞系中HOXB5蛋白表达的Western blotting分析。（G）Transwell分析显示的CRC细胞系的迁移和侵袭能力。（H-L） 体内肺转移测定。将四种稳定的细胞系注射到裸鼠的尾静脉中（每组10只）。（H） 显示了植入后9周不同组的典型生物发光图像以及肺转移的发生率。（一） 连续9周记录的生物发光信号强度。（J） 肺转移结节的数量。（K） 不同组裸鼠的总体存活率。（五十） 显示了不同组肺组织H&E染色的代表性图像。比例尺代表1 mm（低倍率）和100µm（高倍率）。（M-Q） 体内肝转移检测。将四种稳定的细胞系注射到裸鼠的脾脏中（每组10只小鼠）。（M） 显示了植入后9周不同组的典型生物发光图像以及肝转移的发生率。（N） 连续9周记录的生物发光信号强度。（O） 肝转移结节的数量。（P） 不同组裸鼠的总体存活率。（Q） 显示了来自不同组的肝组织的H&E染色的代表性图像。比例尺代表500µm（低倍率）和100µm。所有数据均显示为平均值±标准差*P（P）< 0.05 **P（P）˂ 0.01.
图2
图2
HOXB5通过上调CXCR4和ITGB3的表达促进CRC转移。（A）通过慢病毒转染操纵HOXB5表达后，所指示的CRC细胞系中CXCR4和ITGB3表达的蛋白质印迹分析。（B）实时PCR分析CXCR4系列和ITGB3标准所示CRC细胞系中的mRNA表达。（C）HOXB5交易CXCR4系列和ITGB3标准发起人。Caco-2细胞与pCMV-HOXB5和CXCR4系列或ITGB3标准构建启动子荧光素酶，然后通过荧光素素酶报告子分析检测启动子活性。（D-E）缺失和选择性突变分析确定了HOXB5应答区域CXCR4系列（D） 或ITGB3标准（E） 启动程序。含有连续截断或突变的PGL3-核糖核酸酶报告质粒CXCR4系列或ITGB3标准启动子构建物与pCMV-HOXB5共转染Caco-2细胞，检测荧光素酶活性。（F-G）CHIP分析表明HOXB5与CXCR4系列启动子（F）和ITGB3标准Caco-2-HOXB5细胞和人类原发性CRC组织中的启动子（G）。细胞被交联，染色质被抗HOXB5或对照抗体免疫沉淀。然后进行实时PCR，通过在CXCR4系列或ITGB3标准发起人。（H）慢病毒转染后Caco-2和SW620细胞中CXCR4和ITGB3表达的Western blotting分析。（一）Transwell分析表明，CXCR4和ITGB3的下调抑制了Caco-2-HOXB5细胞的迁移和侵袭能力，而CXCR4或ITGB3上调促进了SW620-shHOXB6细胞迁移和侵袭潜能。（J-O） 体内肺转移测定。将指示细胞系注射到裸鼠的尾静脉中（每组10只小鼠）。（J） 显示了植入后9周不同组的代表性生物发光图像。（K） 给出了不同组连续9周记录的生物发光信号强度。（五十） 不同组的肺转移发生率。（M） 不同组的肺转移结节数。（N） 不同组裸鼠的总生存时间。（O） 显示了不同组肺组织H&E染色的代表性图像。比例尺代表1 mm（低倍率）和100µm（高倍率）。（P-U） 体内肝转移检测。将指示细胞系注射到裸鼠的脾脏中（每组10只小鼠）。（P） 显示了植入后9周不同组的典型生物发光图像。（Q） 细胞植入后连续9周记录各组的生物发光信号。（R） 不同组的肝转移发生率。（S） 计算肝脏转移结节的数量。（T） 不同组裸鼠的总生存时间。（U） 显示了不同组肝组织H&E染色的代表性图像。比例尺代表500µm（低倍率）和100µm。所有数据均显示为平均值±标准差*P（P）< 0.05 **P（P）˂ 0.01.
图2
图2
HOXB5通过上调CXCR4和ITGB3的表达促进CRC转移。（A）通过慢病毒转染操纵HOXB5表达后，所指示的CRC细胞系中CXCR4和ITGB3表达的蛋白质印迹分析。（B）实时PCR分析CXCR4系列和ITGB3标准所示CRC细胞系中的mRNA表达。（C）HOXB5交易CXCR4系列和ITGB3标准发起人。Caco-2细胞与pCMV-HOXB5和CXCR4系列或ITGB3标准构建启动子荧光素酶，然后通过荧光素素酶报告子分析检测启动子活性。（D-E）缺失和选择性突变分析确定了HOXB5应答区域CXCR4系列（D） 或ITGB3标准（E） 启动程序。含有连续截断或突变的PGL3-核糖核酸酶报告质粒CXCR4系列或ITGB3标准启动子构建物与pCMV-HOXB5共转染Caco-2细胞，检测荧光素酶活性。（F-G）CHIP分析表明HOXB5与CXCR4系列启动子（F）和ITGB3标准Caco-2-HOXB5细胞和人类原发性CRC组织中的启动子（G）。细胞被交联，染色质被抗HOXB5或对照抗体免疫沉淀。然后进行实时PCR，通过在CXCR4系列或ITGB3标准发起人。（H）慢病毒转染后Caco-2和SW620细胞中CXCR4和ITGB3表达的Western blotting分析。（一）Transwell分析表明，CXCR4和ITGB3的下调抑制了Caco-2-HOXB5细胞的迁移和侵袭能力，而CXCR4或ITGB3上调促进了SW620-shHOXB6细胞迁移和侵袭潜能。（J-O） 体内肺转移测定。将指示细胞系注射到裸鼠的尾静脉中（每组10只小鼠）。（J） 显示了植入后9周不同组的代表性生物发光图像。（K） 给出了不同组连续9周记录的生物发光信号强度。（五十） 不同组的肺转移发生率。（M） 不同组的肺转移结节数。（N） 不同组裸鼠的总生存时间。（O） 显示了不同组肺组织H&E染色的代表性图像。比例尺代表1 mm（低倍率）和100µm（高倍率）。（P-U） 体内肝转移检测。将指示细胞系注射到裸鼠的脾脏中（每组10只小鼠）。（P） 显示了植入后9周不同组的典型生物发光图像。（Q） 细胞植入后连续9周记录各组的生物发光信号。（R） 不同组的肝转移发生率。（S） 计算肝脏转移结节的数量。（T） 不同组裸鼠的总生存时间。（U） 显示了不同组肝组织H&E染色的代表性图像。比例尺代表500µm（低倍率）和100µm。所有数据均显示为平均值±标准差*P（P）< 0.05 **P（P）˂ 0.01.
图2
图2
HOXB5通过上调CXCR4和ITGB3的表达促进CRC转移。（A）通过慢病毒转染操纵HOXB5表达后，所指示的CRC细胞系中CXCR4和ITGB3表达的蛋白质印迹分析。（B）实时PCR分析CXCR4系列和ITGB3标准所示CRC细胞系中的mRNA表达。（C）HOXB5交易CXCR4系列和ITGB3标准发起人。Caco-2细胞与pCMV-HOXB5和CXCR4系列或ITGB3标准构建启动子荧光素酶，然后通过荧光素素酶报告子分析检测启动子活性。（D-E）缺失和选择性突变分析确定了HOXB5应答区域CXCR4系列（D） 或ITGB3标准（E） 启动程序。含有连续截断或突变的PGL3-核糖核酸酶报告质粒CXCR4系列或ITGB3标准启动子构建物与pCMV-HOXB5共转染Caco-2细胞，检测荧光素酶活性。（F-G）CHIP分析表明HOXB5与CXCR4系列启动子（F）和ITGB3标准Caco-2-HOXB5细胞和人类原发性CRC组织中的启动子（G）。细胞被交联，染色质被抗HOXB5或对照抗体免疫沉淀。然后进行实时PCR，通过在CXCR4系列或ITGB3标准发起人。（H）慢病毒转染后Caco-2和SW620细胞中CXCR4和ITGB3表达的Western blotting分析。（一）Transwell分析表明，CXCR4和ITGB3的下调抑制了Caco-2-HOXB5细胞的迁移和侵袭能力，而CXCR4或ITGB3上调促进了SW620-shHOXB6细胞迁移和侵袭潜能。（J-O） 体内肺转移测定。将指示细胞系注射到裸鼠的尾静脉中（每组10只小鼠）。（J） 显示了植入后9周不同组的代表性生物发光图像。（K） 给出了不同组连续9周记录的生物发光信号强度。（五十） 不同组的肺转移发生率。（M） 不同组的肺转移结节数。（N） 不同组裸鼠的总生存时间。（O） 显示了不同组肺组织H&E染色的代表性图像。比例尺代表1 mm（低倍率）和100µm（高倍率）。（P-U） 体内肝转移检测。将指示细胞系注射到裸鼠的脾脏中（每组10只小鼠）。（P） 显示了植入后9周不同组的典型生物发光图像。（Q） 细胞植入后连续9周记录各组的生物发光信号。（R） 不同组的肝转移发生率。（S） 计算肝脏转移结节的数量。（T） 不同组裸鼠的总生存时间。（U） 显示了不同组肝组织H&E染色的代表性图像。比例尺代表500µm（低倍率）和100µm。所有数据均显示为平均值±标准差*P（P）< 0.05 **P（P）˂ 0.01.
图2
图2
HOXB5通过上调CXCR4和ITGB3的表达促进CRC转移。（A）通过慢病毒转染操纵HOXB5表达后，所指示的CRC细胞系中CXCR4和ITGB3表达的蛋白质印迹分析。（B）实时PCR分析CXCR4系列和ITGB3标准所示CRC细胞系中的mRNA表达。（C）HOXB5交易CXCR4系列和ITGB3标准发起人。Caco-2细胞与pCMV-HOXB5和CXCR4系列或ITGB3标准构建启动子荧光素酶，然后通过荧光素素酶报告子分析检测启动子活性。（D-E）缺失和选择性突变分析确定了HOXB5应答区域CXCR4系列（D） 或ITGB3标准（E） 启动程序。含有连续截断或突变的PGL3-核糖核酸酶报告质粒CXCR4系列或ITGB3标准启动子构建物与pCMV-HOXB5共转染Caco-2细胞，检测荧光素酶活性。（F-G）CHIP分析表明HOXB5与CXCR4系列启动子（F）和ITGB3标准Caco-2-HOXB5细胞和人类原发性CRC组织中的启动子（G）。细胞被交联，染色质被抗HOXB5或对照抗体免疫沉淀。然后进行实时PCR，通过在CXCR4系列或ITGB3标准发起人。（H）慢病毒转染后Caco-2和SW620细胞中CXCR4和ITGB3表达的Western blotting分析。（一）Transwell分析表明，CXCR4和ITGB3的下调抑制了Caco-2-HOXB5细胞的迁移和侵袭能力，而CXCR4或ITGB3上调促进了SW620-shHOXB6细胞迁移和侵袭潜能。（J-O） 体内肺转移测定。将指示细胞系注射到裸鼠的尾静脉中（每组10只小鼠）。（J） 显示了植入后9周不同组的代表性生物发光图像。（K） 给出了不同组连续9周记录的生物发光信号强度。（五十） 不同组的肺转移发生率。（M） 不同组的肺转移结节数。（N） 不同组裸鼠的总生存时间。（O） 显示了不同组肺组织H&E染色的代表性图像。比例尺代表1 mm（低倍率）和100µm（高倍率）。（P-U） 体内肝转移检测。将指示细胞系注射到裸鼠的脾脏中（每组10只小鼠）。（P） 显示了植入后9周不同组的典型生物发光图像。（Q） 细胞植入后连续9周记录各组的生物发光信号。（R） 不同组的肝转移发生率。（S） 计算肝脏转移结节的数量。（T） 不同组裸鼠的总生存时间。（U） 显示了不同组肝组织H&E染色的代表性图像。比例尺代表500µm（低倍率）和100µm。所有数据均显示为平均值±标准差*P（P）< 0.05 **P（P）˂ 0.01.
图3
图3
HOXB5的表达与人CRC组织中CXCR4和ITGB3的表达呈正相关。（A）显示了CRC组织和邻近非肿瘤组织中HOXB5、CXCR4和ITGB3表达的IHC染色的代表性图像。比例尺代表200µm（低倍率）和50µm。（B-C）队列I（B）和队列II（C）CRC组织中HOXB5表达与CXCR4或ITGB3表达的相关性分析。（D）Kaplan-Meier对第一队列CRC患者CXCR4表达（左）或ITGB3表达（右）与复发或总生存率之间的相关性的分析。（E）队列I中HOXB5/CXCR4共表达（左）或HOXB5/ITGB3共表达（右）与CRC患者复发或总生存率之间相关性的Kaplan-Meier分析。（F）Kaplan-Meier对队列II中CXCR4表达（左）或ITGB3表达（右）与CRC患者复发或总生存率之间的相关性的分析。（G）Kaplan-Meier对HOXB5/CXCR4联合表达（左）或HOXB5/ITGB3联合表达（右）与第二队列CRC患者复发或总生存率之间的相关性的分析。
图4
图4
CXCL12通过CXCR4-ERK1/2-ETS1信号通路上调HOXB5的表达。（A）用梯度浓度的CXCL12处理Caco-2细胞24小时，然后HOXB5型蛋白和mRNA的表达通过western blotting和real-time PCR检测。（B）在转染了HOXB5型CXCL12孵育（100 ng/ml）24小时后的启动子荧光素酶报告子。（C）用ERK、PI3K、mTOR、PKA或PKC的特异性抑制剂培养Caco-2细胞，然后用或不用CXCL12处理（100 ng/ml，24小时）。Western blotting检测HOXB5、总ERK、AKT、P70S6K、PKC和PKA的蛋白水平。（D）缺失和选择性突变分析表明，ETS1结合区位于HOXB5型启动子负责CXCL12介导的HOXB5表达。用连续截短或突变的方法转染Caco-2细胞HOXB5型构建启动子荧光素酶，并与CXCL12（100 ng/ml）孵育24小时，然后测定荧光素酶活性。（E-F）ETS1基因敲除损害CXCL12-介导的HOXB5表达。用ETS1 siRNA或对照siRNA转染Caco-2细胞，然后用或不用CXCL12处理（100 ng/ml，24小时）。通过Western blotting和实时PCR（E）检测HOXB5的表达。的活动HOXB5型启动子通过荧光素酶报告分析（F）进行检测。（G）CHIP分析表明ETS1与HOXB5型Caco-2细胞和人原发性CRC组织中的启动子。（H）Caco-2细胞在有或无ERK抑制剂的情况下培养，然后用或不用CXCL12处理（100 ng/ml，24小时）。Western blotting分析检测HOXB5、ERK、ETS1、磷酸化ERK和磷酸化ETS1的蛋白水平。
图5
图5
HOXB5对CXCL12介导的CRC转移至关重要。（A）用LV-shcontrol或LV-shHOXB5慢病毒载体转染Caco-2细胞，然后用或不用CXCL12处理（100 ng/ml，24小时）。接下来，通过Western blotting检测HOXB5蛋白的表达。（B）Transwell分析表明，CXCL12处理显著增加了Caco-2细胞的迁移和侵袭能力，而HOXB5敲除降低了CXCL12增强了Caco-3细胞的迁移与侵袭能力。（C）用慢病毒载体转染Caco-2细胞，构建过表达CXCL12-Caco-2的细胞（Caco-2-CXCL12），并通过慢病毒转染进一步敲除Caco-2-CXCL12细胞中HOXB5的表达。通过蛋白质印迹检测所指示的细胞系中CXCL12和HOXB5的表达。（D）Transwell分析显示，CXCL12过度表达显著促进Caco-2细胞的迁移和侵袭，HOXB5敲除显著降低Caco-2-CXCL12细胞增强的迁移和侵入潜能。（E-I） 体内肺转移试验表明HOXB5敲除抑制CXCL12介导的CRC转移。将四种稳定的细胞系注射到裸鼠的尾静脉中（每组10只）。（E） 显示了植入后9周不同组的典型生物发光图像以及肺转移的发生率。（F） 不同组连续9周的生物发光信号强度。（G） 不同组的肺转移灶数量。（H） 不同组裸鼠的总生存时间。（I） 来自不同组的肺组织的H&E染色的代表性图像。比例尺代表1 mm（低倍率）和100µm（高倍率）。（J-N）体内肝转移检测。将四种稳定的细胞系注射到裸鼠的脾脏中（每组10只小鼠）。（J） 植入后9周不同组的典型生物发光图像和肝转移的发生率。（K） 细胞植入后连续9周记录各组的生物发光信号。（五十） 四组肝脏转移结节的数量。（M） 不同组裸鼠的总生存时间。（N） 不同组肝组织H&E染色的代表性图像。比例尺代表500µm（低倍率）和100µm。所有数据均显示为平均值±标准差*P（P）< 0.05, **P（P）˂ 0.01.
图6
图6
CXCR4抑制剂AMD3100抑制HOXB5介导的CRC转移。（A）慢病毒转染（LV-HOXB5）后，将Caco-2细胞与载体或AMD3100（1µg/ml，24小时）孵育，然后进行Western blotting分析以测量所示细胞系中CXCL12、HOXB5、CXCR4、p-ERK和p-ETS1的蛋白水平。（B）Transwell分析表明，AMD3100处理（1µg/ml，24小时）显著降低Caco-2-HOXB5细胞的迁移和侵袭。（中-英）体内肺转移试验表明，AMD3100给药显著抑制HOXB5介导的CRC转移。裸鼠尾静脉注射肿瘤细胞（每组10只）。（C） 从植入后第8天到第63天，每两天向裸鼠腹腔注射AMD3100或载体（3 mg/kg）。（D） 显示植入后9周的代表性生物发光成像、连续9周的生物发光信号强度和肺转移的发生率（E）裸鼠的总生存时间、肺转移结节的数量和两组肺组织H&E染色的代表性图像。比例尺代表1 mm（低倍率）和100µm（高倍率）。（F-H） 体内肝转移试验表明，AMD3100治疗显著降低了HOXB5介导的CRC转移。将肿瘤细胞注射到裸鼠的脾脏中（每组10只）。（F） 从植入后第8天到第63天，每两天向裸鼠腹腔注射AMD3100或载体（3 mg/kg）。（G） 9周时有代表性的生物发光成像，连续9周记录两组的生物发光信号，并显示肝转移的发生率。（H） 介绍了裸鼠的总生存时间、肝脏转移结节的数量以及两组肝组织的H&E染色的代表性的。比例尺代表500µm（低倍率）和100µm。所有数据均显示为平均值±标准差*P（P）< 0.05, **P（P）<0.01。（一）CXCL12-HOXB5-CXCR4正反馈回路在CRC转移中的作用示意图。CXCL12-CXCR4轴通过激活ERK1/2-ETS1信号通路上调HOXB5的表达。HOXB5过表达通过反式激活CXCR4和ITGB3表达促进CRC侵袭和转移。AMD3100是一种特异性CXCR4抑制剂，其给药可有效干扰CXCL12-HOXB5-CXCR4反馈回路，并抑制HOXB5介导的CRC侵袭和转移。
图6
图6
CXCR4抑制剂AMD3100抑制HOXB5介导的CRC转移。（A）慢病毒转染（LV-HOXB5）后，将Caco-2细胞与载体或AMD3100（1µg/ml，24小时）孵育，然后进行Western blotting分析以测量所示细胞系中CXCL12、HOXB5、CXCR4、p-ERK和p-ETS1的蛋白水平。（B）Transwell分析表明，AMD3100处理（1µg/ml，24小时）显著降低Caco-2-HOXB5细胞的迁移和侵袭。（中-英）体内肺转移试验表明，AMD3100给药显著抑制HOXB5介导的CRC转移。裸鼠尾静脉注射肿瘤细胞（每组10只）。（C） 从植入后第8天到第63天，每两天向裸鼠腹腔注射AMD3100或载体（3 mg/kg）。（D） 显示植入后9周的代表性生物发光成像、连续9周的生物发光信号强度和肺转移的发生率（E）裸鼠的总生存时间、肺转移结节的数量和两组肺组织H&E染色的代表性图像。比例尺代表1 mm（低倍率）和100µm（高倍率）。（F-H） 体内肝转移试验表明，AMD3100治疗显著降低了HOXB5介导的CRC转移。将肿瘤细胞注射到裸鼠的脾脏中（每组10只）。（F） 从植入后第8天到第63天，每两天向裸鼠腹腔注射AMD3100或载体（3 mg/kg）。（G） 9周时有代表性的生物发光成像，连续9周记录两组的生物发光信号，并显示肝转移的发生率。（H） 介绍了裸鼠的总生存时间、肝脏转移结节的数量以及两组肝组织的H&E染色的代表性的。比例尺代表500µm（低倍率）和100µm。所有数据均显示为平均值±标准差*P（P）< 0.05, **P（P）<0.01。（一）CXCL12-HOXB5-CXCR4正反馈回路在CRC转移中的作用示意图。CXCL12-CXCR4轴通过激活ERK1/2-ETS1信号通路上调HOXB5的表达。HOXB5过表达通过反式激活CXCR4和ITGB3表达促进CRC侵袭和转移。AMD3100是一种特异性CXCR4抑制剂，其给药可有效干扰CXCL12-HOXB5-CXCR4反馈回路，并抑制HOXB5介导的CRC侵袭和转移。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Bray F、Ferlay J、Soerjomataram I、Siegel RL、Torre LA、Jemal A.2018年全球癌症统计：GLOBOCAN对185个国家36种癌症的全球发病率和死亡率的估计。CA癌症临床杂志。2018;68:394–424.-公共医学
    1. Dekker E、Tanis PJ、Vleugels JLA、Kasi PM、Wallace MB。大肠癌。柳叶刀。2019;394:1467–80.-公共医学
    1. 李斌，黄Q，魏国宏。HOX转录因子在癌症易感和进展中的作用。2019年癌症（巴塞尔）。11-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Shah N，Sukumar S.Hox基因及其在肿瘤发生中的作用。Nat Rev癌症。2010;10:361–71.-公共医学
    1. Lee J-Y、Hur H、Yun HJ、Kim Y、Yang S、Kim SI等。HOXB5促进乳腺癌细胞的增殖和侵袭。国际生物科学杂志。2015;11:701–11.-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型

MeSH术语