跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

政府意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2020年3月6日20:73。
doi:10.1186/s12935-020-1152-z。 eCollection 2020。

Sirtuin 1通过与Toll样受体4核因子κB活性氧信号转导轴的相互作用抑制慢性粒细胞白血病k562细胞脂多糖诱导的炎症

王磊（Lei Wang） 1, 王明明（Mingming Wang） 1, 红桔豆 1, 林文杰 1, 邹丽芳 1
附属公司

Sirtuin 1通过与Toll样受体4核因子κB活性氧信号转导轴的相互作用抑制慢性粒细胞白血病k562细胞脂多糖诱导的炎症

王磊（Lei Wang）等。 癌细胞Int. .

摘要

背景：慢性粒细胞白血病（CML）是由BCR-ABL转化的造血干细胞引起的克隆性骨髓增生性肿瘤。先前的研究表明，多功能炎症因子参与CML的发展。据报道，Sirtuin 1（SIRT1）以及ADP核糖基转移酶和脱乙酰酶可能影响CML细胞的活力和炎症。

方法：本研究旨在探讨SIRT1参与脂多糖（LPS）触发CML k562细胞炎症的机制。

结果：在我们的研究中，LPS诱导的k562细胞炎症反应是多种炎症细胞因子水平的增加，包括白细胞介素（IL）-10、IL-1β、IL-6、干扰素-γ、肿瘤坏死因子（TNF）-α和TNF-β。LPS还降低了k562细胞中SIRT1的表达和细胞核定位。此外，SIRT1过度表达抑制了LPS处理细胞中上述细胞因子的释放。我们还确定LPS刺激可以激活Toll样受体4（TLR4）、核因子κB（NFκB）亚单位和p65，并在k562细胞中产生活性氧物种（ROS）。然而，SIRT1过度表达降低了TLR4的表达，从而抑制了NFκB亚单位和p65的磷酸化，并降低了ROS的生成。

结论：这些发现表明SIRT1是通过TLR4-NFκB-ROS信号轴减轻LPS诱导炎症的潜在治疗靶点。

关键词：CML；炎症；核因子κB；活性氧；SIRT1；TLR4。

PubMed免责声明

利益冲突声明

竞争性利益作者声明他们没有竞争性利益。

数字

图1
图1
LPS刺激k562细胞产生促炎细胞因子。用qPCR、ELISA和WB检测LPS处理的k562细胞中的细胞因子和趋化因子。一通过qPCR测定LPS处理对k562细胞炎症细胞因子mRNA表达的影响。b条qPCR检测LPS处理后k562细胞中炎性细胞因子mRNA的表达。在qPCR中，各组的基因表达首先归一化为GAPDH基因，然后归一化到对照组的数据。c（c）通过ELISA测定LPS处理对k562细胞炎性细胞因子蛋白表达的影响。d日,e（电子）通过WB分析测定LPS处理对k562和KU812细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白水平的影响。数据表示为平均值 ± 标准偏差*P（P） < 0.05，**P < 相对于对照组0.01
图2
图2
LPS处理的k562细胞中SIRT1的表达。一qPCR检测LPS处理后0、4、8和12h k562细胞SIRT1 mRNA的表达。b条,c（c）WB检测LPS处理后k562和KU812细胞SIRT1蛋白水平。d日用IFA检测LPS处理的k562细胞中SIRT1的亚细胞定位。使用抗SIRT1抗体（红色）将SIRT1染色为红色，而使用DAPI（蓝色）将核DNA反染为蓝色。合并后的图像显示SIRT1的核定位。e（电子）细胞分馏分析显示SIRT1在细胞核和细胞质组分中的位置。（f）在整个细胞裂解液中检测到SIRT1活性。数据表示为平均值 ± 标准偏差*P（P） < 0.05，**P < 相对于对照组0.01
图3
图3
SIRT1过度表达对k562细胞炎症反应的影响。一将SIRT6表达质粒/空质粒转染k562细胞，然后暴露于10μg/mL LPS中4h或不暴露于LPS中。qPCR显示不同转染和培养的k562细胞中SIRT1的mRNA表达。b条,c（c）使用qPCR和ELISA测定LPS治疗和SIRT1过度表达对炎症调节因子mRNA和蛋白表达的影响。在qPCR中，各组的基因表达首先归一化为GAPDH基因，然后归一化到对照组的数据。d日WB用于评估SIRT1、IL-1β、IL-6和TNF-α的蛋白表达。e（电子）将siRNA-NC或siRNA-SIRT1转染k562细胞，然后暴露于10μg/mL LPS中4h或不暴露于LPS中。通过qPCR检测LPS治疗和SIRT1沉默对炎症调节因子mRNA表达的影响。（f）将SIRT6表达质粒/空质粒转染KU812细胞，然后暴露于10μg/mL LPS中4h或不暴露于LPS中。通过qPCR检测LPS治疗和SIRT1过度表达对KU812细胞炎症调节因子mRNA表达的影响。数据表示为平均值 ± 标准偏差*P（P） < 0.05，**P < 0.01和#P（P） < 0.05,##P（P） < 相对于对照组0.01 + pCDNA/siNC组和LPS + pCDNA/siNC组
图4
图4
SIRT1过表达在LPS处理的k562细胞中激活TLR4–NFκB–ROS轴中的作用。这里，用SIRT6表达质粒/空质粒转染k562细胞，然后暴露于10μg/mL LPS或不暴露于LPS 4小时。一,b条qPCR检测TLR4和p65的mRNA表达。首先将各组的基因表达归一化为GAPDH基因，然后将其归一化成LPS-pCDNA组的数据。c（c）使用WB评估SIRT1过表达对TLR4、p65和p65磷酸化的影响。d日通过DCF荧光强度测定LPS处理细胞中ROS的产生。数据表示为平均值 ± 标准偏差*P（P） < 相对于对照组0.05 + pCDNA组；#P（P） < 相对于LPS 0.05 + pCDNA组
图5
图5
ROS的产生与SIRT1介导的k562细胞炎症有关。此处，将k562细胞置于5μM NAC和10μg/mL LPS下4h。一通过DCF荧光强度来反映k562细胞中ROS的产生。b条–d日qPCR检测k562细胞中SIRT1、TLR4和p65的mRNA水平。e（电子）WB检测k562细胞中SIRT1、TLR4和p65的蛋白水平。（f）qPCR检测k562细胞中IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA水平。各组的基因表达首先归一化为GAPDH基因，然后归一化到对照组的数据。克通过IFA检测LPS处理的k562细胞中SIRT1的亚细胞定位。SIRT1通过抗SIRT1抗体（红色）染色为红色，而细胞核DNA通过DAPI（蓝色）被反染为蓝色。合并后的图像显示SIRT1的核定位。小时细胞分馏分析显示SIRT1在细胞核和细胞质组分中的位置。数据表示为平均值 ± 标准偏差*P（P） < 0.05，**P < 0.01和#P（P） < 0.05,##P（P） < 与对照组和LPS组相比分别为0.01
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

参考文献

    1. 莱斯LG。骨质疏松症的发病机制：概念、冲突和前景。临床投资杂志。2005;115:3318–3325. doi:10.1172/JCI27071。-DOI程序-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Rea D，Mahon FX公司。我如何在停止酪氨酸激酶抑制剂治疗后管理慢性髓性白血病的复发。英国血液学杂志。2018;180:24–32. doi:10.1111/bjh.14973。-DOI程序-公共医学
    1. Ross DM、Branford S、Seymour JF、Schwarer AP、Arthur C、Yeung DT等。伊马替尼停药治疗慢性粒细胞白血病（CML）患者的安全性和疗效：TWISTER研究结果。鲜血。2013;122:515–522. doi:10.1182/bloud-2013-02-483750。-DOI程序-公共医学
    1. Chalkiadaki A，Guarente L.sirtuins在癌症中的多方面功能。Nat Rev癌症。2015;15:608. doi:10.1038/nrc3985。-DOI程序-公共医学
    1. Brooks CL，Gu W.SIRT1如何影响新陈代谢、衰老和癌症？Nat Rev癌症。2009;9:123. doi:10.1038/nrc2562。-DOI程序-项目管理咨询公司-公共医学