MyD88 mediates colorectal cancer cell proliferation, migration and invasion via NF‑κB/AP‑1 signaling pathway

doi:10.3892/ijmm.2019.4390

.2020年1月；45(1):131-140.

doi:10.3892/ijmm.2019.4390。 Epub 2019年10月31日。

MyD88通过NF-κB/AP‑1信号通路介导结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭

朱光伟^#¹, 程志斌（Zhibin Cheng）^#¹, 黄永健¹, 魏征¹, 杨淑刚¹, 林春林¹, 叶建新¹

附属公司

PMID： 31746347
PMCID公司：项目经理6889924
内政部： 10.3892/ijmm.2019.4390

MyD88通过NF‑κB/AP‑1信号通路介导结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭

朱光伟等。国际分子医学杂志. 2020年1月.

.2020年1月；45(1):131-140.

doi:10.3892/ijmm.2019.4390。 Epub 2019年10月31日。

作者

朱光伟^#¹, 程志斌（Zhibin Cheng）^#¹, 黄永健¹, 魏征¹, 杨树刚¹, 林春林¹, 叶建新¹

附属

¹福建医科大学附属第一医院消化外科二科，福建福州350005。

^#贡献均等。

PMID： 31746347
PMCID公司：项目经理6889924
内政部： 10.3892年1月20日194390

摘要

髓样分化因子88（MyD88）在恶性肿瘤中的作用尚不清楚。因此，在本研究中，我们旨在使用SW480和HCT116细胞系在体外和使用裸鼠模型在体内检测MyD88在结直肠癌中的功能和潜在机制。SW480和HCT116细胞感染了一种基于慢病毒的有效MyD88 siRNA病毒。采用CCK‑8和集落形成试验评估细胞增殖。采用Transwell和刮擦试验检测结直肠癌细胞的迁移，并进一步利用Transwell试验分析结直肠癌的侵袭性。Western blotting分析MyD88调控的潜在机制。体外实验表明，沉默SW480和HCT116细胞中的MyD88可显著抑制生长和侵袭。此外，MyD88敲除影响SW480和HCT116细胞中的MyD88‑NF‑κB/AP‑1信号通路。体内，MyD88敲除抑制HCT116细胞皮下裸体模型中的肿瘤生长。我们发现，敲除MyD88基因可以影响结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移。我们进一步验证了MyD88敲除可以降低NF‑κB和AP‑1通路的活性。这些结果表明，MyD88基因在大肠癌的发生发展中起着重要作用，可以作为一种潜在的大肠癌诊断和预后生物标志物。

关键词：髓系分化因子88；大肠癌；增殖；迁移；入侵。

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数字

图1
击倒*我的D88*在SW480和HCT116细胞中。（A）使用NC、siRNA-1、siRNA2和siRNA-3序列转染SW480和HCT116细胞后的总RNA通过RT-qPCR使用*我的D88*引物。*GAPDH公司*被放大以进行内部控制。siRNA-1和siRNA-3序列导致高水平的抑制*我的D88*mRNA。（B）*我的D88*通过蛋白质印迹检测使用NC、siRNA-1、siRNA-2和siRNA-3序列转染后SW480和HCT116细胞中的蛋白质。*GAPDH公司*蛋白质被用作内部对照。（C）半定量分析表明*我的D88*与NC和siRNA-2细胞相比，siRNA-1和siRNA3细胞中的蛋白质水平显著降低。MyD88在SW480 NC组和HCT116 NC组细胞中的mRNA表达为1。误差条代表三个实验的平均值±SEM，^*P<0.05，^**P<0.01。

图2
下调*我的D88*慢病毒介导的mRNA和蛋白表达*我的D88*SW480和HCT116细胞中的siRNA。（A） pLKO.1、pLKO.1-sh1和pLKO-1-sh3慢病毒感染SW480和HCT116细胞。感染72小时后，荧光显微镜显示绿色荧光蛋白（GFP）。（B）用RT-qPCR和western blot分析慢病毒感染SW480和HCT116细胞后mRNA和（C）蛋白的表达。*GAPDH公司*被用作内部控制。（D）半定量分析表明*我的D88*在SW480和HCT116细胞中，pLKO.1-sh1和pLKO.1.-sh3显著抑制蛋白表达。mRNA表达*我的D88*SW480 pLKO.1组和HCT116 pLKO-1组细胞取1。误差条代表三个实验的平均值±SEM。^*P<0.05，^**P<0.01。

图3
的影响*siMyD88型*pLKO.1、pLKO.1-sh1和pLKO-1-sh3在SW480和HCT116细胞中的活性。（A和B）下调*我的D88*在SW480和HCT116细胞中的集落形成测定中减少了集落数量。（C） CCK-8分析显示*我的D88*敲除抑制SW480和HCT116细胞的增殖。误差条代表三个实验的平均值±SEM。^*P<0.05，^**P<0.01，^***P<0.001。

图4
的影响*siMyD88基因*pLKO.1、pLKO.1-sh1和pLKO-1-sh3在SW480和HCT116细胞中的迁移。（A）在SW480细胞中，在刮擦细胞表面0和48小时后拍摄pLKO.1、pLKO.1-sh1和pLKO.1-sh3细胞伤口愈合的代表性图像和显微镜观察。（B）使用SW480细胞中的直方图分析划痕的宽度。（C）在HCT116细胞中，刮伤细胞表面后0和48小时拍摄pLKO.1、pLKO.1-sh1和pLKO-1-sh3细胞伤口愈合的代表性图像和显微镜观察。（D）使用HCT116细胞中的直方图分析划痕的宽度。误差条代表三个实验的平均值±SEM。^*P<0.05，^***P<0.001。

图5
的影响*siMyD88型*对SW480和HCT116细胞迁移和侵袭的影响。（A） pLKO.1、pLKO.1-sh1和pLKO-1-sh3在SW480和HCT116细胞中的迁移能力。（B） SW480和HCT116细胞中pLKO.1、pLKO.1-sh1和pLKO-1-sh3组的迁移细胞数。（C） pLKO.1、pLKO.1-sh1和pLKO-1-sh3对SW480和HCT116细胞的侵袭能力。（D） SW480和HCT116细胞中pLKO.1、pLKO.1-sh1和pLKO-1-sh3组的侵入细胞数。误差条代表三个实验的平均值±SEM。^*P<0.05，^**P<0.01，^***P<0.001。

图6
Western blot分析显示*我的D88*明显抑制表达*NF-κB（p65）*,*p-NF-κB（p-p65）、AP-1（c-jun）*和*p-AP-1（p-c-jun）*SW480和HCT116细胞中的蛋白质。（A）蛋白质电泳图显示了*NF-κB（p65）*,*p-NF-κB（p-p65）*,*AP-1（c-jun）*,*p-AP-1（p-c-jun）*和*我的D88*在SW480细胞中，pLKO.1组、pLKO.1-sh1组和pLKO.1.-sh3组。（B）使用直方图分析SW480细胞中pLKO.1、pLKO.1-sh1和pLKO-1-sh3组的蛋白表达。（C）使用电泳图来显示*NF-κB（p65）*,*p-NF-κB（p-p65）*,*AP-1（c-jun）*,*p-AP-1（p-c-jun）*和*我的D88*在HCT116细胞中，pLKO.1、pLKO.1-sh1和pLKO.1.-sh3组。（D）使用直方图分析HCT116细胞中pLKO.1、pLKO.1-sh1和pLKO-1-sh3组的蛋白表达。误差条代表三个实验的平均值±SEM。^*P<0.05，^**P<0.01，^***P<0.001。

图7
通过沉默*我的D88*HCT116细胞皮下异种移植中的基因。三组（pLKO.1和pLKO.1-sh3组）皮下异种移植于裸鼠。（A）与pLKO.1组相比，pLKO.1-sh3组的肿瘤生长受到明显抑制。（B）每4天测量一次原发肿瘤的大小。5周后处死小鼠。（C）称重肿瘤的重量。pLKO.1和pLKO.1-sh3组之间存在显著差异。（D）免疫组织化学分析*我的D88*HCT116细胞皮下异种移植瘤。染色显示*我的D88*pLKO.1和pLKO.1-sh3组（×100和×200）。（E）定量评估*我的D88*。条形图显示*我的D88*染色面积比率/每场。pLKO.1和pLKO.1-sh3组之间存在显著差异。^*P<0.05，^**P<0.01。

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1. Testa U，Pelosi E，Castelli G.大肠癌：基因异常，肿瘤进展，肿瘤异质性，克隆进化和肿瘤起始细胞。2018年医学科学（巴塞尔）；6:E31。-项目管理委员会-公共医学
1. Okugawa Y，Grady WM，Goel A.结直肠癌的表观遗传改变：新兴生物标记物。胃肠病学。2015;149:1204–1225.e12。doi:10.1053/j.gastro.2015.07.011。-内政部-项目管理委员会-公共医学
1. Yaghoubi N，Soltani A，Ghazvini K，Hassanian SM，Hashemy SI。PD-1/PD-L1阻断作为结直肠癌的一种新的治疗方法。生物药物治疗。2019;110:312–318. doi:10.1016/j.biopha.2018.11.105。-内政部-公共医学
1. Marmol I、Sánchez-de-Digo C、Pradilla Dieste A、Cerrada E、Rodriguez Yoldi MJ。结直肠癌：结直肠癌的概述和未来展望。国际分子科学杂志。2017;18:E197。doi:10.3390/ijms18010197。-内政部-项目管理委员会-公共医学
1. Lingel A，Ehlers E，Wang Q，Cao M，Wood C，Lin R，Zhang L.Kaposi的肉瘤相关疱疹病毒通过调节RNA降低细胞骨髓分化原反应基因88（MyD88）的表达。J病毒。2016;90:180–188. doi:10.128/JVI.02342-15。-内政部-项目管理委员会-公共医学

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[1] Testa U，Pelosi E，Castelli G.大肠癌：基因异常，肿瘤进展，肿瘤异质性，克隆进化和肿瘤起始细胞。2018年医学科学（巴塞尔）；6:E31。-项目管理委员会-公共医学

[2] Testa U，Pelosi E，Castelli G.大肠癌：基因异常，肿瘤进展，肿瘤异质性，克隆进化和肿瘤起始细胞。2018年医学科学（巴塞尔）；6:E31。-项目管理委员会-公共医学

[3] Okugawa Y，Grady WM，Goel A.结直肠癌的表观遗传改变：新兴生物标记物。胃肠病学。2015;149:1204–1225.e12。doi:10.1053/j.gastro.2015.07.011。-内政部-项目管理委员会-公共医学

[4] Okugawa Y，Grady WM，Goel A.结直肠癌的表观遗传改变：新兴生物标记物。胃肠病学。2015;149:1204–1225.e12。doi:10.1053/j.gastro.2015.07.011。-内政部-项目管理委员会-公共医学

[5] Yaghoubi N，Soltani A，Ghazvini K，Hassanian SM，Hashemy SI。PD-1/PD-L1阻断作为结直肠癌的一种新的治疗方法。生物药物治疗。2019;110:312–318. doi:10.1016/j.biopha.2018.11.105。-内政部-公共医学

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