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.2018年1月6日；19(1):165.
doi:10.3390/ijms19010165。

过度内质网应激与肝脏和脂肪组织线粒体动力学、线粒体吞噬和细胞凋亡受损相关，但与肌肉无关

Krzysztof Marycz公司 1 2, 卡塔兹娜·科尔尼卡 三, Jolanta Szlapka-Kosarzewska公司 4, 克里斯汀·韦斯 5
附属公司

过度内质网应激与肝脏和脂肪组织线粒体动力学、线粒体吞噬和细胞凋亡受损相关，但与肌肉无关

Krzysztof Marycz公司等。 国际分子科学杂志. .

摘要

如今，内分泌疾病在人类和兽医中变得越来越常见。马的体力活动减少，再加上碳水化合物和糖过载，可能会导致所谓的马代谢综合征（EMS）的发展。EMS的特点是胰岛素抵抗、高胰岛素血症、血甘油三酯浓度升高，通常是肥胖。尽管EMS个体的表型特征众所周知，但疾病发展的分子机制仍不清楚。因此，在本研究中，我们分析了胰岛素敏感组织，即肌肉、肝脏和脂肪组织，以评估胰岛素抵抗和凋亡。此外，我们评估了这些组织中的线粒体动力学和线粒体吞噬，因为线粒体功能障碍与代谢综合征的发生有关。我们通过RT-PCR和Western blot的线粒体吞噬实验确定了胰岛素抵抗、内质网应激和线粒体清除相关基因的表达。用电子透射显微镜观察细胞超微结构。结果表明，EMS马的脂肪组织和肝脏的特点是线粒体损伤和有丝分裂增加，随后由于有丝分裂无法恢复细胞内稳态而触发细胞凋亡。然而，在肌肉中，细胞凋亡减少，这表明存在一种保护机制，允许该组织维持体内平衡。

关键词：细胞凋亡；自噬；胰岛素抵抗；代谢综合征；线粒体。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明没有利益冲突。

数字

图1
图1
健康（CTRL）和EMS马血清中的氧化应激和细胞因子水平。使用市售分光光度分析法，ROS(A类)，否(B类)和SOD(C类)对活动进行了评估。用ELISA检测IL-10评估细胞因子谱(D类)，肿瘤坏死因子-α(E类)和IL-1β(F类). 结果表示为平均值±标准偏差（S.D.）**第页< 0.01, ***第页< 0.001.
图2
图2
马肌肉、脂肪组织和肝脏中胰岛素抵抗相关基因的表达。使用RT-PCR，IR的表达(A类)，美国国税局(B类)，S6K1系列(C类)，GLUT-4型(D类)、RBP4(E类)和SREBP1C(F类)已进行调查。结果表示为平均值±S.D*第页< 0.05, **第页< 0.01, ***第页< 0.001.
图3
图3
健康（CTRL）和EMS个体肌肉、脂肪组织和肝脏中细胞凋亡的评估。使用RT-PCR，我们评估了p53的表达(A类)，第21页(B类)，BAX（行李）(C类)，Bcl-2型(D类)和Bcl-2/BAX比率(E类). 此外，通过蛋白质印迹分析确定了样品中胱天蛋白酶-3的含量(F类). 结果表示为平均值±S.D*第页< 0.05, **第页< 0.01, ***第页< 0.001.
图4
图4
健康和EMS马组织内质网应激的研究。使用RT-PCR，CHOP的表达(A类)、PERK(B类)和IL-13(C类)已检查。此外，TEM图像可以显示细胞超微结构和检测细胞器损伤(D类). 缩写：ER，内质网；eER，扩大的内质网；LD，脂滴；PN，核固缩。结果表示为平均值±S.D*第页< 0.05, **第页< 0.01, ***第页< 0.001.
图5
图5
健康和EMS个体肌肉、脂肪组织和肝脏自噬的评估。使用RT-PCR，mTOR的表达(A类)，PI3K(B类)、AKT(C类)，贝克林-3(D类)，LC3(E类)，Beclin/LAMP2的比率(F类)和LAMP2(G公司)已进行调查。利用免疫荧光技术检测样品中LAMP2的细胞内定位(H（H）). TEM分析可以可视化自噬体的形成（用红色箭头表示(我)). LD，脂滴；AP，自噬体。结果表示为平均值±S.D*第页< 0.05, **第页< 0.01, ***第页< 0.001. 比例尺：共聚焦20µm，透射电子显微镜（TEM）200 nm。
图5
图5
健康和EMS个体肌肉、脂肪组织和肝脏自噬的评估。使用RT-PCR，mTOR的表达(A类)，PI3K(B类)、AKT(C类)，贝克林-3(D类)，LC3(E类)，Beclin/LAMP2的比值(F类)和LAMP2(G公司)已进行调查。利用免疫荧光技术检测样品中LAMP2的细胞内定位(H（H）). TEM分析可以可视化自噬体的形成（用红色箭头表示(我)). LD，脂滴；AP，自噬体。结果表示为平均值±S.D*第页< 0.05, **第页< 0.01, ***第页< 0.001. 比例尺：共聚焦20µm，透射电子显微镜（TEM）200 nm。
图6
图6
健康和EMS诊断马组织中线粒体自噬和线粒体动力学的评估。使用RT-PCR，PINK的表达(A类)，停车场(B类)，多国部队(C类)和FIS(D类)已进行调查。用Western blot检测PARKIN量(E类)和免疫荧光染色(F类). TEM成像(F类)允许观察线粒体形成（用黄色箭头表示）和线粒体形态损伤（用红色箭头表示）。MP，线粒体；IM，线粒体受损。结果表示为平均值±S.D**第页< 0.01, ***第页< 0.001. 比例尺：共焦20µm，TEM 100 nm。
图6
图6
健康马和EMS诊断马组织中的线粒体吞噬和线粒体动力学评估。使用RT-PCR，PINK的表达(A类)，停车场(B类)，多国部队(C类)和FIS(D类)已进行调查。用Western blot检测PARKIN量(E类)和免疫荧光染色(F类). TEM成像(F类)允许观察线粒体形成（用黄色箭头表示）和线粒体形态损伤（用红色箭头表示）。MP，线粒体；IM，线粒体受损。结果表示为平均值±S.D**第页< 0.01, ***第页< 0.001. 比例尺：共焦20µm，透射电镜100 nm。
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