跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2018年6月；17(2):511-523.
doi:10.1177/1534735417696702。 Epub 2017年3月9日。

槲皮素通过调节NF-κb、PKC-δ、ERK1/2和AMPKα阻断uPA/uPAR功能对胃癌细胞的抗转移作用

海丽 1, 陈晨 2
附属公司

槲皮素通过调节NF-κb、PKC-δ、ERK1/2和AMPKα阻断uPA/uPAR功能对胃癌细胞的抗转移作用

海丽等。 Integr癌症治疗. 2018年6月.

摘要

胃癌是一种恶性肿瘤，发生转移后几乎没有有效的治疗方案。槲皮素（Qu）的摄入与GC的发病率降低和发展缓慢有关，可能是由于其抗增殖和凋亡作用，但Qu是否能抑制转移活性尚不清楚。尿激酶纤溶酶原激活物（uPA）/uPA受体（uPAR）系统在肿瘤转移中起重要作用。在本研究中，我们测量了uPA活性和uPAR在GC和癌周组织中的表达，并研究了uPAR表达与各种GC细胞系的迁移和侵袭活动之间的相关性。在评估细胞转移之前，用10μM Qu处理GC BGC823和AGS细胞72小时，并单独或联合敲除uPAR。结果表明，胃癌组织中uPA活性和uPAR表达高于癌周组织。GC细胞系的迁移和侵袭活性与uPAR表达呈正相关。Qu处理降低了BGC823和AGS细胞的迁移和侵袭，同时降低了uPA和uPAR蛋白的表达。Qu治疗和uPAR敲除均降低基质金属蛋白酶-2和-9的活性，并阻断Pak1-Limk1-cofilin信号传导。Qu治疗与NF-κb、PKC-δ和ERK1/2的抑制以及AMPKα的激活有关。NF-κb、PKC和ERK1/2的特异性抑制剂和AMPKα激活剂抑制GC细胞中uPA和uPAR的表达。总的来说，Qu通过阻断uPA/uPAR功能和调节NF-κb、PKC-δ、ERK1/2和AMPKα对GC细胞显示出抗转移作用。这表明曲是一种很有希望的抗胃癌转移的药物。

关键词：胃癌；转移；槲皮素；uPA受体；尿激酶纤溶酶原激活剂。

PubMed免责声明

利益冲突声明

利益冲突声明：作者声明，与本文的研究、作者身份和/或出版没有潜在的利益冲突。

数字

图1。
图1。
GC和癌旁组织中的uPA活性、uPAR表达和Pak1磷酸化。（A） 使用商业检测试剂盒检测胃癌（GC）和癌旁组织（n=35）中的uPA活性。与癌旁组织相比，GC组织中uPA活性显著升高。（B） 典型的Western blot图像显示了GC和癌旁组织中uPAR和p-Pak1的相对蛋白水平（n=35）。uPAR和p-Pak1在GC组织中的表达高于癌旁组织*P（P）<0.05与对照组。癌症、GC组织；GC正常、癌周组织；尿激酶纤溶酶原激活剂；uPAR，uPA受体；Pak1，p21-激活激酶-1；GAPDH，甘油醛-3-磷酸脱氢酶。
图2。
图2。
uPAR和p-Pak1蛋白水平与GC细胞迁移和侵袭的相关性。（A） GC细胞系（包括MGC803、GC7901、BGC823、AGS和N87）以及胃粘膜细胞系GES-1中的uPAR和p-Pak1蛋白水平。（B） 伤口愈合试验显示GC和胃粘膜细胞的迁移。（C） Transwell小室分析显示GC和胃粘膜细胞浸润。GC细胞系的迁移和侵袭与uPAR和p-Pak1表达呈正相关。代表3个独立测试数据平均值的条形图。不共享公用字母的横线不同(P（P）<.05）。uPAR，uPA受体；Pak1，p21-激活激酶-1；GAPDH，甘油醛-3-磷酸脱氢酶。
图3。
图3。
Qu治疗抑制GC细胞活性，可能与uPAR无关。用10μM Qu处理GC BGC823和AGS细胞72小时，以确定Qu对细胞活力的影响。在Qu存在或不存在的情况下，进行shRNA-介导的uPAR敲除，以确定Qu对细胞活力的抑制作用是否与uPA/uPAR功能有关。采用MTT法评估细胞活力。接触10μM Qu 72小时后，GC BGC823和AGS细胞活力显著降低。uPAR敲除不能削弱细胞活力。代表5个独立测试数据平均值的条形图*P（P）<0.05与对照组。Qu，槲皮素；非靶向siRNA，用非靶向小iRNA转染细胞；ShRNA-uPAR、uPAR通过ShRNA-uPAR转染被敲除；在Qu治疗前，ShRNA-uPAR+Qu，uPAR通过ShRNA-uPAR转染被敲除。
图4。
图4。
用Qu和uPAR敲除抑制GC细胞的转移活性。用10μM Qu处理GC BGC823和AGS细胞72小时。shRNA-介导的uPAR敲除在存在或不存在Qu治疗的情况下进行。（A） 伤口愈合试验显示BGC823和AGS细胞在各种治疗后迁移。（B） Transwell小室分析显示BGC823和AGS细胞在不同处理后侵袭。（C） 明胶酶谱分析显示不同处理后BGC823和AGS细胞中MMP-2和MMP-9的活性。Qu处理和uPAR敲除可单独或联合降低BGC823和AGS细胞的迁移和侵袭。代表3个独立测试数据平均值的条形图*P（P）＜0.05**P（P）<0.01与对照组。Qu，槲皮素；ShRNA-uPAR、uPAR通过ShRNA-uPAR转染被敲除；在Qu治疗前，ShRNA-uPAR+Qu，uPAR通过ShRNA-uPAR转染被敲除。
图5。
图5。
Qu对uPA、uPAR及其下游靶点的表达具有抑制作用。用10μM Qu处理GC BGC823和AGS细胞72小时。shRNA-介导的uPAR敲除在存在或不存在Qu治疗的情况下进行。采用蛋白质印迹法测定不同处理后所示蛋白的表达水平。Qu治疗和uPAR敲除均降低MMP-2和-9活性，并阻断Pak1-Limk1-cofilin信号传导。代表3个独立测试数据平均值的条形图*P（P）＜0.05**P（P）<0.01与对照组。Qu，槲皮素；ShRNA-uPAR、uPAR通过ShRNA-uPAR转染被敲除；ShRNA uPAR+Qu，uPAR在Qu处理前通过ShRNA uPAR转染被敲除；尿激酶纤溶酶原激活剂；uPAR，uPA受体；Pak1，p21-激活激酶-1；GAPDH，甘油醛-3-磷酸脱氢酶。
图6。
图6。
Qu对uPA/uPAR系统的抑制可能由NF-κb、PKC-δ、ERK1/2和AMPKα介导。（A） 用10μM Qu处理72小时后，用Western blotting法检测BGC823和AGS细胞中NF-κb（p65）、PKC-α、PKC--β、PKCδ、ERK1/2和AMPKα的磷酸化水平。Qu治疗与NF-κb、PKC-δ和ERK1/2活性的抑制以及AMPKα的激活有关。（B） 使用NF-κB（p65）、PKC和ERK1/2的特异性抑制剂以及AMPKα的激活剂来评估它们在uPA和uPAR调节中的作用。BGC823和AGS细胞与9μM JSH-23、10 nM Go6983、12μM SCH772984或4.5μM A-769662孵育72小时。与Qu类似，NF-κb、PKC和ERK1/2的特异性抑制剂以及AMPKα激活剂抑制GC细胞中uPA和uPAR的表达。代表3个独立测试数据平均值的条形图*P（P）＜0.05**P（P）< .01,#P（P）< .05,##P（P）<0.01与对照组。Qu，槲皮素；尿激酶纤溶酶原激活剂；uPAR，uPA受体；GAPDH，甘油醛-3-磷酸脱氢酶；核因子-κb；蛋白激酶C；ERK1/2，细胞外信号调节激酶1/2；AMPKα，腺苷一磷酸活化蛋白激酶α；NF-κb（−），抑制剂对NFκb的抑制；PKC（−），抑制剂对PKC的抑制作用；ERK1/2（−），ERK1/2抑制剂抑制；AMPKα（+），用活化剂激活AMPK。
图7。
图7。
Qu抑制GC转移的可能机制。Qu抑制uPA/uPAR功能可能是通过抑制NF-κb、PKC-δ和ERK1/2以及AMPKα的激活。uPA/uPAR系统通过调节MMPs、Pak1/Limk1/cofilin信号通路以及FAK、TGF-β和VEGF，参与GC转移所必需的多种过程，包括ECM降解细胞运动、细胞形态变化和血管生成。因此，Qu抑制uPA/uPAR功能，导致GC转移抑制。Qu，槲皮素；尿激酶纤溶酶原激活剂；uPAR，uPA受体；基质金属蛋白酶；Pak1、p21活化激酶-1；FAK，粘着斑激酶；血管内皮生长因子；转化生长因子-β；核因子-κb；蛋白激酶C；ERK1/2，细胞外信号调节激酶1/2；AMPKα，腺苷一磷酸活化蛋白激酶α。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Lee KH，Kim SW，Kim JR。胃癌细胞经肝细胞生长因子治疗后，活性氧通过丝裂原活化蛋白激酶途径调节尿激酶纤溶酶原激活物的表达和细胞侵袭。《实验与临床癌症研究杂志》2009；28:73.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Wang Y，Zeng J，Pan J，等。MiR-320a通过靶向FoxM1-P27KIP1轴的活性抑制胃癌。Oncotarget公司。2016;7:29275-29286.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. 丁勇，张H，钟M，等。uPA系统在胃癌腹膜转移中的临床意义。2013年欧洲医学研究杂志；18:28.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Noh H，Hong S，Huang S.尿激酶受体在肿瘤进展和发展中的作用。热学。2013年；3:487-495.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Briassouli P，Rifkin D，Clancy RM，Buyon JP。抗SSA抗体与凋亡胎儿心肌细胞的结合刺激尿激酶纤溶酶原激活物（uPA）/uPA受体依赖性TGF-β的激活，并增强纤维化。免疫学杂志。2011;187:5392-5401。-项目管理咨询公司-公共医学