跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2017年5月31日：8:651。
doi:10.3389/fimmu.2017.00651。 2017年电子收集。

TWEAK/Fn14激活参与皮肤红斑狼疮Ro52介导的光敏化

耶鲁·刘 1, 徐美峰 1, 小云敏 2, 吴坤仪 2, Ting Zhang（张婷） 2, 柯莉 2, 圣香晓 1, 夏玉敏 1
附属机构

TWEAK/Fn14激活参与皮肤红斑狼疮Ro52介导的光敏化

耶鲁·刘等。 前部免疫. .

摘要

肿瘤坏死因子（TNF）样弱凋亡诱导剂（TWEAK）与其唯一受体成纤维细胞生长因子诱导14（Fn14）结合，参与各种炎症反应。最近，在皮肤红斑狼疮（CLE）皮损中发现TWEAK/Fn14激活显著。本研究旨在进一步揭示该途径在Ro52介导的光敏化中的潜在作用。测定CLE患者皮损中的TWEAK、Fn14和Ro52。小鼠角质形成细胞接受紫外线B（UVB）照射或加上TWEAK刺激，并检测Ro52和促炎细胞因子。通过TWEAK刺激共培养的角质形成细胞来评估J774.2巨噬细胞的趋化性。我们发现TWEAK、Fn14和下游细胞因子在过度表达Ro52的CLE病变中高度表达。此外，TWEAK增强了UVB诱导的小鼠角质形成细胞Ro52的上调。同时，TWEAK刺激角质形成细胞通过促进趋化因子C-C基序配体17和22的产生，有利于巨噬细胞的迁移。此外，Fn14 siRNA转染或核因子κB（NF-κB）抑制剂可消除角质形成细胞中Ro52表达的TWEAK增强。类似地，TNF受体相关因子2（TRAF2）siRNA在TWEAK刺激下降低了这些细胞中Ro52的蛋白水平。有趣的是，紫外线照射增加了角质形成细胞中TNF受体1型（TNFR1）的表达，但不影响TNFR2的表达。总之，TWEAK/Fn14信号通路参与Ro52介导的光敏化，涉及NF-κB通路的激活以及TRAF2/TNFR伙伴的功能。

关键词：Fn14；Ro52；扭；皮肤红斑狼疮；角质形成细胞；光敏化；肿瘤坏死因子受体；紫外线B。

PubMed免责声明

数字

图1
图1
皮肤红斑狼疮皮损中TWEAK和Fn14表达增加。（A）通过免疫组织化学方法，在石蜡切片中检测TWEAK和Fn14的表达。（B）对染色切片进行每平方毫米阳性百分比值的量化。（C）测定新鲜组织中TWEAK和Fn14的mRNA表达水平。（D）在这些组织中还测定了调节激活正常T细胞表达和分泌（RANTES）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）和干扰素γ诱导蛋白10（IP-10）的mRNA水平。（E）对病变皮肤中Ro52和Fn14的表达进行共聚焦显微镜检查。正常样本数===========================================================================10，非病变样本数量===========================================================================15、病变样本数===========================================================================15.数据点和误差条代表平均值 ± SEM。显示了具有代表性的图像。酒吧===========================================================================50 微米*第页 < 0.05, **第页 < 0.01.
图2
图2
TWEAK增强UVB照射后角质形成细胞中促炎细胞因子的产生。培养PAM212角质形成细胞在体外并接受UVB照射或牛血清白蛋白（BSA）或TWEAK刺激。定量逆转录聚合酶链反应检测Fn14的mRNA表达水平（A），对正常T细胞表达和分泌（RANTES）的激活进行调节（B），单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）（C）和干扰素γ诱导蛋白10（IP-10）（D）角质形成细胞中。数据来自三个独立的实验。数据点和误差条表示平均值 ± 扫描电镜*第页 < 0.05; **第页 < 0.01.
图3
图3
TWEAK促进小鼠角质形成细胞中Ro52的表达。培养PAM212细胞在体外并接受紫外线B（UVB）照射或牛血清白蛋白（BSA）或TWEAK刺激。（A）测定角质形成细胞中Ro52的mRNA表达水平。（B）Western blotting检测上清液和细胞裂解液中的Ro52蛋白。（C、D）测量蛋白质印迹带的强度，然后将其归一化为β-肌动蛋白的值。（E、F）通过Western blotting，用因子诱导14（Fn14）或对照siRNA转染细胞，然后接受UVB+TWEAK处理，检测Ro52蛋白。使用ImageJ软件测量条带，然后将其归一化为β-肌动蛋白值。（G）通过免疫荧光，在接受不同处理的角质形成细胞中检测到Ro52。（H）同样，在这些细胞中也通过免疫荧光检测到Fn14。数据来自三个独立的实验。数据点和误差条代表平均值 ± SEM。显示了代表性图像。酒吧===========================================================================5 微米*第页 < 0.05, **第页 < 0.01, ***第页 < 0.001.
图4
图4
通路抑制剂影响小鼠角质形成细胞中Ro52的TWEAK/Fn14调节。培养PAM212细胞在体外接受紫外线B照射和TWEAK刺激。一些细胞分别用核因子-κB（JSH-23）、有丝分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶（U0126）和磷脂酰肌醇3-激酶（沃特曼）的途径抑制剂进行预处理。（A）对Ro52的mRNA表达水平进行定量逆转录聚合酶链反应。（B）因此，在上清液和细胞裂解液中测定Ro52的蛋白表达水平。（C）使用ImageJ测量Western印迹条带的强度，然后将其归一化为β-actin值。数据来自三个独立的实验。数据点和误差条代表平均值 ± SEM。显示了具有代表性的图像*第页 < 0.05, **第页 < 0.01.
图5
图5
通路抑制剂影响小鼠角质形成细胞中促炎细胞因子的TWEAK调节。培养PAM212细胞在体外接受紫外线B照射和TWEAK刺激。用核因子-κB（JSH-23）、有丝分裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶（U0126）和磷脂酰肌醇3-激酶（沃特曼）途径的特异性抑制剂对一些细胞进行预处理。定量逆转录聚合酶链反应用于测定调节激活正常T细胞表达和分泌（RANTES）的mRNA表达水平（A），单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）（B）和干扰素γ诱导蛋白10（IP-10）（C）数据来自三个独立的实验。数据点和误差条代表平均值 ± 扫描电镜**第页 < 0.01.
图6
图6
角质形成细胞中TWEAK/Fn14的激活诱导巨噬细胞趋化。在设计的transwell系统中，用TWEAK或牛血清白蛋白（BSA）刺激外插入物中的小鼠PAM212角质形成细胞。观察培养在内插入物中的小鼠J774.2巨噬细胞的迁移。根据结晶紫染色细胞占总细胞的百分比来确定迁移量。（A）评估迁移巨噬细胞的百分比。（B）在TWEAK刺激的角质形成细胞中测定CCL17和CCL22的mRNA表达水平。（C）通过酶联免疫吸附试验，在TWEAK刺激的角质形成细胞上清液中检测CCL17和CCL22蛋白。数据来自三个独立的实验。数据点和误差条代表平均值 ± SEM。显示了具有代表性的图像*第页 < 0.05, **第页 < 0.01.
图7
图7
紫外线B（UVB）照射增强小鼠角质形成细胞中TNF受体1型（TNFR1）的表达。培养PAM212细胞在体外并接受UVB照射。（A）通过定量逆转录聚合酶链反应定量角质形成细胞中TNFR1和TNFR2的mRNA表达水平。（B）对细胞裂解液中的TNFR1和TNFR2蛋白进行蛋白质印迹。（C、D）通过流式细胞术测定角质形成细胞中TNFR1和TNFR2的表达。（E）免疫荧光法检测角质形成细胞中TNFR1和TNFR2的表达。数据来自三个独立的实验。数据点和误差条代表平均值 ± SEM。显示了具有代表性的图像**第页 < 0.01.
图8
图8
TNF受体相关因子2（TRAF2）介导TWEAK诱导的小鼠角质形成细胞Ro52上调。培养PAM212细胞在体外同时接受紫外线B照射和TWEAK刺激。（A）采用定量逆转录聚合酶链反应检测细胞凋亡抑制蛋白1（cIAP1）和NF-κB诱导激酶（NIK）mRNA表达水平。（B）同样，在这些细胞中测量TRAF2的mRNA表达水平。（C、D）在添加TWEAK后的不同时间点对cIAP1和TRAF2蛋白进行蛋白质印迹。（E、F）通过Western blotting，在转染TRAF2或对照siRNA的角质形成细胞中检测到Ro52蛋白。数据来自三个独立的实验。数据点和误差条代表平均值 ± SEM。显示了具有代表性的图像**第页 < 0.01.
图9
图9
Ro52表达和其他下游信号的TWEAK/因子诱导14（Fn14）调节图。紫外线B（UVB）照射增强角质形成细胞中Fn14和TNF受体1型（TNFR1）的表达。TWEAK与Fn14的结合启动Fn14/TNF受体相关因子2（TRAF2）/细胞凋亡抑制蛋白1（cIAP1）复合物的形成，该复合物进一步与TNFR1伙伴相互作用，触发细胞凋亡以及Ro52的表面表达。Fn14/TRAF2/cIAP1复合物还可以激活核因子κB（NF-κB）和磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/Akt通路，上调Ro52和炎症细胞因子的表达，后者招募巨噬细胞。浸润性巨噬细胞分泌促炎细胞因子，包括TWEAK和干扰素-α，共同加重皮肤红斑狼疮的免疫反应。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Kuhn A，Landmann A。皮肤红斑狼疮的分类和诊断。J Autoimmun（2014）48–49:14–9.10.1016/J.jaut.2014.01.021-DOI程序-公共医学
    1. Oke V，Wahren-Herlenius M.皮肤红斑狼疮：临床方面和分子发病机制。《实习医学杂志》（2013）273（6）：544–54.10.111/joim.12057-DOI程序-公共医学
    1. Stannard JN，Kahlenberg JM。皮肤红斑狼疮：发病机制和与系统性狼疮相关性的更新。《当前风湿病》（2016）28（5）：453–9.10.1097/BOR.00000000000008-DOI程序-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Bewley美联社。皮肤红斑狼疮与精神疾病密切相关。英国皮肤病杂志（2016）174（5）：958–9.10.1111/bjd.14563-DOI程序-公共医学
    1. Chong BF。了解皮肤性红斑狼疮如何发展为系统性红斑狼疮。JAMA Dermatol（2014）150（3）：296.10.1001/jamadectl.2013.9030-DOI程序-公共医学