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2017年4月7日;12(4):e0174414。
doi:10.1371/journal.pone.0174414。 2017年电子收集。

苦味酸II通过抑制脑缺血再灌注损伤中的氧化信号通路保护血脑屏障

附属公司

苦味酸II通过抑制脑缺血再灌注损伤中的氧化信号通路保护血脑屏障

李斋等。 公共科学图书馆一号

摘要

背景和目的:溶栓用于改善脑循环;同时,还应使用抗氧化剂等神经保护药物。这些实验的目的是探索抗氧化剂苦味酸II对脑缺血再灌注(CI/R)损伤后血脑屏障(BBB)的保护机制。

方法:为观察苦味酸II对CI/R损伤的拮抗作用,测定神经功能缺损评分和梗死体积。为了检测苦味酸II对神经细胞和BBB的保护作用,分别对大脑皮层组织的形态和结构进行了观察。为了研究苦苷II的抗氧化作用和机制,检测了活性氧(ROS)含量、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH氧化酶)活性以及Nox2和Rac-1的蛋白水平。为了探讨苦味酸II对BBB的保护机制,检测了ROCK、MLCK、MMP-2和claudin-5的水平。

结果:模型组神经功能评分较高,皮质梗死面积较大,神经元结构受损和BBB损伤较多,ROS含量和NADPH氧化酶活性增加,Nox2、Rac-1、ROCK、MLCK和MMP-2蛋白水平较高,claudin-5水平较低。苦味酸组神经功能评分、神经元损伤、BBB损伤、ROS含量和NADPH氧化酶活性降低(P<0.05),Rac-1、Nox2、ROCK、MLCK和MMP-2蛋白水平下调(P<0.05。

结论:苦味酸II可能通过下调Rac-1和Nox2的表达来降低ROS的含量,从而保护神经系统,并通过降低ROCK、MLCK和MMP-2的表达来保护BBB,同时增强claudin-5的表达。

PubMed免责声明

利益冲突声明

竞争利益:提交人声明,不存在相互竞争的利益。

数字

图1
图1。神经行为功能缺损评分。
A.Sham组;B.模型组;C.治疗组(苦苷II);D.阳性对照(罗布青素)组;E.治疗+阳性对照(苦味酸Ⅱ+罗布麻素)组;F.激动剂(TBCA)组;G.激动剂+治疗(TBCA+苦苷II)组;H.车辆(DMSO)组***P(P)与A组相比<0.001#P(P)与B组相比<0.05;P(P)与F组相比<0.05。数据采用单因素方差分析进行比较;数值表示为平均值±SD;n=5。
图2
图2。缺血性脑梗死,TTC染色。
A.Sham组;B.模型组;C.治疗组(苦苷II);D.阳性对照(罗布青素)组;E.治疗+阳性对照(苦味酸Ⅱ+罗布麻素)组;F.激动剂(TBCA)组;G.激动剂+治疗(TBCA+苦苷II)组;H.车辆(DMSO)组***P(P)与A组相比<0.001##P(P)与B组相比,P<0.01###P(P)与B组相比<0.001;P(P)与C组相比<0.05;P(P)与F组相比<0.05。数据采用单因素方差分析进行比较;数值表示为平均值±SD;n=5。
图3
图3。大鼠皮层神经元的形态和结构,HE×400。
A.Sham组;B.模型组;C.治疗组(苦苷II);D.阳性对照(罗布青素)组;E.治疗+阳性对照(苦味酸Ⅱ+罗布麻素)组;F.激动剂(TBCA)组;G.激动剂+治疗(TBCA+苦苷II)组;H.载体(DMSO)组***P(P)与A组相比<0.001##P(P)与B组相比<0.01###P(P)与B组相比<0.001;△△P(P)与F组相比<0.01。数据采用单因素方差分析进行比较;数值表示为平均值±SD;n=5。
图4
图4。埃文斯蓝泄漏率。
A.Sham组;B.模型组;C.治疗组(苦苷II);D.阳性对照(罗布青素)组;E.治疗+阳性对照(苦味酸Ⅱ+罗布麻素)组;F.激动剂(TBCA)组;G.激动剂+治疗(TBCA+苦苷II)组;H.车辆(DMSO)组*P(P)与B组相比<0.05。将数据与单因素方差分析进行比较;数值表示为平均值±SD;n=5。
图5
图5。ROS含量和NADPH氧化酶活性。
A.Sham组;B.模型组;C.治疗组(苦苷II);D.阳性对照(罗布青素)组;E.治疗+阳性对照(苦味酸Ⅱ+罗布麻素)组;F.激动剂(TBCA)组;G.激动剂+治疗(TBCA+苦苷II)组;H.载体(DMSO)组*P(P)与A组相比<0.05##P(P)与B组相比<0.01#P(P)与B组相比<0.05;△△P(P)与F组相比<0.01。数据采用单因素方差分析进行比较;数值表示为平均值±SD;n=5。
图6
图6。Rac-1和Nox2的蛋白表达水平。
A.Sham组;B.模型组;C.治疗组;D.阳性对照组;E.治疗+阳性对照组;F.激动剂组;G.激动剂+治疗组;H.车辆组**P(P)与A组相比<0.01*P(P)与A组相比<0.05##P(P)与B组相比<0.01#P(P)与B组相比<0.05;P(P)与F组相比<0.05。数据采用单因素方差分析进行比较;数值表示为平均值±SD;n=5。
图7
图7。ROCK、MLCK、MMP-2和claudin-5的表达。
A.Sham组;B.模型组;C.治疗组;D.阳性对照组;E.治疗+阳性对照组;F.激动剂组;G.激动剂+治疗组;H.车辆(DMSO)组。在克劳丁-5图的下半部分,每组的第一根杠是22KD,第二根杠是17KD***P(P)与A组相比<0.001**P(P)与A组相比<0.01*P(P)与A组相比<0.05##P(P)与B组相比,P<0.01#P(P)与B组相比<0.05;P(P)与F组相比<0.05;☆☆☆P(P)与A组相比<0.001;★★★P(P)与B组相比<0.001。数据采用单因素方差分析进行比较;数值表示为平均值±SD;n=5。

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