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.2016年8月9:6:30593。
doi:10.1038/srep30593。

旋涡仪对癌和非癌食管细胞三维核结构的差异性改变

维维克·南达库玛 1 2, 南娜·汉森 2, 尊敬的L Glenn 2, Jessica H Han（杰西卡·韩） 2, 斯蒂芬妮·海兰德 2, 凯瑟琳·埃尔南德斯 2, 帕蒂·塞内查尔 2, 罗杰·约翰逊 2, 金伯利·J·布西 2, 迪尔德雷·梅尔德拉姆 1 2
附属公司

旋涡仪对癌和非癌食管细胞三维核结构的差异性改变

维维克·南达库玛等。 科学代表. .

摘要

组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂vorinostat作为一种用于治疗实体肿瘤的“表观”药物近年来受到了广泛关注。然而，其作用机制尚不完全清楚，尤其是其与伴随肿瘤进展的三维核结构畸变的相互作用。我们研究了vorinostat对来自正常、化生（癌前）和恶性组织的人类食管上皮细胞系的影响。使用基于新型光学计算机断层扫描（CT）的定量3D吸收显微镜和传统共焦荧光显微镜的组合，我们表明恶性细胞优先接受伏立尼达治疗，从而改变其相对于非癌细胞的3D核结构。固定单个细胞的光学CT（细胞CT）成像显示，药物治疗的癌细胞在核形态计量学方面表现出显著的变化。共焦显微镜显示，伏立诺达引起H3K9ac标记的常染色质和H3K9标记的组成性异染色质分布的变化。此外，3D免疫-FISH显示，药物诱导的DNA修复基因MGMT的表达伴随着向化生细胞核中的细胞核中心的空间迁移，而非在非肿瘤细胞中。我们的数据表明，vorinostat对正常和异常细胞三维核结构的差异调节可能在其抗癌作用中发挥功能作用。

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数字

图1
图1。相对于化生CP-A和正常鳞状EPC2细胞，伏立诺达降低FLO-1食管腺癌细胞的活性。
以下情况后的药物剂量反应（DDR）曲线：(一) 24, (b条)48和(c（c）) 72 伏立诺达暴露小时。(d日)与CP-a和EPC2相比，FLO-1细胞的IC-50值明显较低。24小时EPC2和CP-A单元的缺失IC50值（描述为--） 小时时间点(d日)表明此时这些细胞对药物的反应最小。结果数据（n = 将细胞生长归一化后，使用Prism 6（Graphpad Software，San Diego，CA）中的剂量-反应-抑制可变斜率函数和载体对照DMSO进行分析。误差条表示平均值的标准误差（SEM）。
图2
图2。与化生和正常食管鳞状上皮细胞相比，伏立诺治疗优先降低FLO-1癌细胞的核大小和核内团块。
单细胞光学CT成像细胞的代表性体积渲染图显示了DMSO处理（顶行）和伏立尼撒处理（底行）EPC2（左列）、CP-A（中列）和FLO-1（右列）细胞的表面形态和核内部。细胞质是灰色的，核膜是蓝色的，核密度增加的颜色由绿色变为红色，如颜色刻度条所示。
图3
图3。Vorinostat治疗可不同程度地改变正常鳞状细胞（EPC2）、化生Barrett’s（CP-A）和腺癌（FLO-1）食管上皮细胞的3D核结构和异质性。
直方图说明了0.94的影响 μM vorinostat（红色曲线）打开：(一——c（c）)核体积；(d日——如果)核质比；(克——我)核形凹陷；(j-l型)与二甲基亚砜处理的细胞相比，细胞核内团块的数量和形态异质性（蓝色曲线）。P值指标：**P < 0.01，****页 < 0.0001. 治疗后，所有三种细胞类型的NC比率都出现了统计上显著的变化；在EPC2细胞中NC比率增加，在CP-A和FLO-1细胞中降低。经处理的FLO-1细胞还表现出核体积和核内团块减少。药物暴露还导致CP-A细胞核明显变得更凹形，并导致EPC2细胞核内的核内团块增加。每个条件下200个细胞生成直方图。使用Mann-Whitney检验在Prism6中分析数据。
图4
图4。FLO-1食管腺癌细胞在细胞周期的G1期和G2期均发生旋涡状态诱导的3D核结构改变。
(一)单细胞光学CT成像细胞的代表性假彩色容积渲染图显示，与细胞周期G1期和G2期的未经处理的FLO-1细胞相比，经vorinostat处理的FLO-1细胞的表面形态和核内部更光滑。细胞质是灰色的，核膜是蓝色的，核密度增加的颜色由绿色变为红色，如色标条所示。(b条)与未处理细胞相比，伏立康唑处理（红色曲线）的细胞核大小、核细胞质（NC）比率、核形状凹度和核内团块数量的形态异质性直方图（蓝色曲线）。每个条件下100个细胞生成直方图。P值用*表示：***P < 0.001，****磅 < 0.0001. 使用Mann-Whitney检验在Prism6中分析数据。
图5
图5。伏立诺达暴露后MGMT表达增加伴随着基因位点的差异性重新定位以及正常和异常食管上皮细胞之间的H3K9ac协同定位。
(一)直方图显示了在DMSO（点灰色）和vorinostat（黑色）处理的正常EPC2、化生CP-A和恶性FLO-1细胞中MGMT位点的核定位趋势。使用相对径向距离（RRD）度量（0）计算核位置 = 外围，1 = 中心）。伏立诺达暴露后，MGMT位点向CP-A的核内部移动，但在EPC2或FLO-1细胞中没有移动。P值用*：ns表示 = 不显著（p > 0.05），**p < 0.01. 在FLO-1中暴露于伏诺司他改变了RRD的分布，使其变为正态分布（A = 0.5933，p值 = 0.1198). 在CP-A中未发现类似结果(b条)盒形图反映了伏立诺达治疗前后每种细胞类型中MGMT位点核位置的异质性程度。与CP-A和EPC2细胞相比，经处理的FLO-1细胞核在MGMT的核位置上表现出最大的异质性。(c（c）)方框图显示显著较高（p < 0.01）在药物处理的CP-A和FLO-1细胞中MGMT与H3K9ac共定位标记的常染色质结构域，并且在EPC2细胞中没有变化。通过MGMT FISH和H3K9ac染色的像素强度的Pearson相关性评估Co-localization。使用Kolmogorov-Smirnoff（KS）非参数检验分析频率分布。
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参考文献

    1. Glozak M.和Seto E.组蛋白脱乙酰酶与癌症。癌基因26，5420–5432（2007）。-公共医学
    1. Ropero S.和Esteller M.组蛋白脱乙酰酶（HDAC）在人类癌症中的作用。分子肿瘤学1，19-25（2007）。-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Weichert W.HDAC在人类恶性肿瘤中的表达与临床预后。《癌症信件》280、168–176（2009）。-公共医学
    1. Witt O.、Deubzer H.E.、Milde T.和Oehme I.HDAC家族：与癌症相关的靶点是什么？《癌症来信》277，8-21（2009）。-公共医学
    1. Grant S.、Easley C.和Kirkpatrick P.Vorinostat。《Nature Reviews Drug Discovery》第6期，第21–22页（2007年）。-公共医学

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