Establishment of immortalized murine mesothelial cells and a novel mesothelioma cell line

doi:10.1007/s11626-015-9885-z

.2015年8月；51(7):714-21.

doi:10.1007/s11626-015-9885-z。 Epub 2015年4月15日。

永生化小鼠间皮细胞的建立及一种新型间皮瘤细胞系

沃尔特·布鲁姆¹, 拉什洛佩奇, 伊曼纽拉·费利·布斯科, 珍妮·沃特米勒-罗德里格斯, 吴立春, 巴特·弗鲁特, 马克·德·佩罗, 击败施瓦勒

附属公司

PMID： 25877069
预防性维修识别码：项目经理4539351
内政部： 2007年10月17日/11626-015-9885-z

永生化小鼠间皮细胞的建立及间皮瘤细胞系的建立

沃尔特·布鲁姆等。体外细胞开发生物动画. 2015年8月.

.2015年8月；51(7):714-21.

doi:10.1007/s11626-015-9885-z。 Epub 2015年4月15日。

作者

沃尔特·布鲁姆¹, 拉什洛佩奇, 埃马努埃拉·费尔利·博斯科, 珍妮·沃特米勒-罗德里格斯, 吴立春, 巴特·弗鲁特, 马克·德·佩罗, 击败施瓦勒

附属

¹弗里堡大学医学系，地址：Route Albert-Gockel 1，1700，Fribourg，Switzerland。

PMID： 25877069
预防性维修识别码：项目经理4539351
内政部： 2007年10月17日/11626-015-9885-z

勘误表in

勘误表：建立永生化小鼠间皮细胞和新型间皮瘤细胞系。
Blum W、Pecze L、Felley-Bosco E、Worthmüller-Rodriguez J、Wu L、Vrugt B、de Perrot M、Schwaller B。 Blum W等人。体外细胞开发生物动画。2017年10月；53(9):853. doi:10.1007/s11626-017-0194-6。体外细胞开发生物动画。2017 PMID：28840527 免费PMC文章。没有可用的摘要。

摘要

间皮细胞易受石棉纤维诱导的细胞毒性影响，并在较长时间内发生转化；由此产生的间皮瘤是一种高度侵袭性肿瘤，目前被认为是无法治愈的（癌症治疗评论37:543-558，2011）。迄今为止，只有少数永生化间皮细胞和间皮瘤细胞系的小鼠细胞培养模型存在。我们从野生型（WT）和神经纤维瘤病2（merlin）杂合子（Nf2+/-）小鼠中获得SV40-永生化细胞系，这两种小鼠都具有常用的遗传背景C57Bl/6J。所有永生化间皮克隆在补充胎牛血清的DMEM中持续生长。细胞可以传代40次以上，没有任何形态变化或增殖率下降的迹象。肿瘤抑制基因NF2是人类间皮瘤中最常见的突变基因之一，但其具体功能尚不清楚。因此，这些可能与恶性间皮瘤形成相关的基因型不同的细胞系有望作为有用的体外模型，尤其是与相同基因型小鼠的体内研究进行比较。此外，我们从反复接触青石棉的Nf2+/-小鼠中产生了一种新的小鼠间皮瘤细胞系RN5。RN5细胞具有高度致瘤性。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
形态学(一)和生长特征(b条)从WT和Nf2+/-小鼠分离的初级间皮细胞，均生长在Connell培养基中。(一)两种基因型的间皮细胞都显示出典型的“鹅卵石样”形态。(b条)与WT细胞相比，Nf2+/-细胞的增殖略有增加；代表性增长曲线n个 > 显示了3个实验。

**图2。**
DMEM中永生间皮细胞形态和细胞生长 + 10%FBS(一)使用Incucyte Live Cell Imaging系统（FLR 10×）拍摄Brightfield图像，显示来源于WT和Nf2+/−小鼠的永生化间皮细胞克隆。典型的“鹅卵石状”形态是保守的；所有克隆的增殖率均高于未永生的原始克隆（比例尺：100μm）。(b条)WT和Nf2+/-克隆的典型孵化器生长曲线。(*c（c）*)如图1和图2所示，使用所有细胞和细胞系在种子接种后144小时获得的MTT信号一. (d日)与原代间皮细胞相比，三个基因型WT和Nf2+/-克隆的MTT数据分组(*第页 < 0.05; ***第页 < 0.0005).

**图3。**
Western blot检测WT和Nf2+/-细胞中的SV40大T抗原和间皮素，并与WT和N2+/-间皮细胞的原始永生克隆进行比较。(一)来自典型实验的Western blot信号。β-肌动蛋白的Western blot信号用于间皮素表达水平的正常化。(b条)典型蛋白质印迹的定量分析(n个 = 每个基因型3个样本，第页 < 0.05分组的原代细胞与分组的永生化细胞系）。

**图4。**
集落形成分析。(一)初级WT间皮细胞能够在带有软琼脂的平板中形成集落，以及人MM-衍生细胞系MSTO-211H(b条)用作阳性对照（来源于双相间皮瘤）。所选菌落代表永生化细胞iMeso-WT1的形态外观(*c（c）*)和iMeso-NF3(d日)如图所示。*比例尺*：250微米。

**图5。**
小鼠间皮瘤细胞系RN5、AK7和AB12的形态学和体外生长。(一)RN5和AK7的上皮形态与AB12细胞的双相或混合型形态相比较。细胞大小、形态和生长特征(b条)RN5和AK7细胞的情况惊人相似。(*c（c）*)RN5细胞的免疫荧光图像显示结蛋白染色相当均匀(红色). 泛细胞角蛋白染色(绿色)显示了典型的镶嵌图案；用DAPI标记细胞核(蓝色). (d日)Western blot分析（30μg总蛋白/车道）显示间皮素在三种小鼠间皮瘤细胞系RN5、AK7和AB12中的表达。

**图6。**
RN5皮下异种移植。(一)接种后24天每周监测异种移植物生长(n个 = 4只小鼠）。(b条)异种移植物的组织切片经苏木精和伊红染色(左边)和戈德纳(*正确的*)露出皮肤(秒)，皮下脂肪组织(*（f）*)、和肌肉(米).比例尺：1毫米。(*c（c）*)放大强调肿瘤组织(t吨)来自Goldner彩色部分。*比例尺*：250微米。免疫组织化学分析显示波形蛋白表达(d日)泛细胞角蛋白强共表达(*e（电子）*)在部分肿瘤细胞群中。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

CRISPR/Cas9-介导NF2的建立和表征^-/-人类间皮细胞系：恶性胸膜间皮瘤中成纤维细胞生长因子受体2的分子研究。
Wahiduzzaman M、Karnan S、Ota A、Hanamura I、Murakami H、Inoko A、Rahman ML、Hyodo T、Konishi H、Tsuzuki S、Hosokawa Y。 Wahiduzzaman M等人。癌症科学。2019年1月；110(1):180-193. doi:10.1111/cas.13871。Epub 2018年12月14日。癌症科学。2019 PMID：30417500 免费PMC文章。
间皮细胞长期接触SV40和石棉会导致恶性转化和化疗耐药。
Cleaver AL、Bhamidipaty K、Wylie B、Connor T、Robinson C、Robinson-BW、Mutsaers SE、Lake RA。 Cleaver AL等人。致癌。2014年2月；35(2):407-14. doi:10.1093/carcin/bgt322。Epub 2013年10月15日。致癌。2014 PMID：24130165
肿瘤前和肿瘤大鼠间皮细胞系的特征：TET、DNMT和5-羟甲基胞嘧啶的参与。
Roulois D、Deshayes S、Guilly MN、Nader JS、Liddell C、Robard M、Hulin P、Ouacher A、Le Martelot V、Fonteneau JF、Grégoire M、Blanquart C、Pouliquen DL。 Roulois D等人。 Oncotarget公司。2016年6月7日；7(23):34664-87. doi:10.18632/目标8970。 Oncotarget公司。2016 PMID：27129173 免费PMC文章。
NF2/Merlin失活与间皮瘤的潜在治疗靶点。
佐藤·T、塞奇多·Y。 Sato T等人。国际分子科学杂志。2018年3月26日；19(4):988. doi:10.3390/ijms19040988。国际分子科学杂志。2018 PMID：29587439 免费PMC文章。审查。
恶性间皮瘤的动物模型。
凯恩银行。凯恩公司。吸入毒物。2006年11月；18(12):1001-4. doi:10.1080/08958370600835393。吸入毒物。2006 PMID：16920675 审查。

查看所有类似文章

引用人

在恶性胸膜间皮瘤小鼠模型中使用新型微生物调节剂提高抗癌免疫。
Gattlen C、Frank KR、Marie DN、Trompette A、Chriqui LE、Hao Y、Abdelnour E、Gonzalez M、Krueger T、Dyson PJ、Siankevich S、von Garnier C、Ubags NDJ、Cavin S、Perentes JY。 Gattlen C等人。 JTCVS打开。2024年2月17日；18:324-344. doi:10.1016/j.xjon.2024.02.007。电子采集2024年4月。 JTCVS打开。2024 PMID：38690424 免费PMC文章。
恶性胸膜间皮瘤（MPM）样本的基因组和转录组分析揭示了临床前检测的关键见解。
LaureA、Rigutto A、Kirschner MB、Opitz L、Grob L、OpitzI、Felley-Bosco E、Hiltbrunner S、Curioni-Fontecedro A。 LaureA等人。癌症（巴塞尔）。2023年5月18日；15(10):2813. doi:10.3390/cancers15102813。癌症（巴塞尔）。2023 PMID：37345150 免费PMC文章。
EMT基因特征对恶性间皮瘤的预后价值。
Wu L、Yoshihara K、Yun H、Karim S、Shokri N、Zaeimi F、Man HSJ、Zia A、Felley-Bosco E、de Perrot M。 Wu L等人。国际分子科学杂志。2023年2月21日；24(5):4264. doi:10.3390/ijms24054264。国际分子科学杂志。2023 PMID：36901697 免费PMC文章。
在恶性间皮瘤中发现的一组新兴EMT基因。
Wu L、Amjad S、Yun H、Mani S、de Perrot M。 Wu L等人。科学报告2022年1月19日；12(1):1007. doi:10.1038/s41598-022-04973-x。科学代表2022。 PMID：35046456 免费PMC文章。
宿主间皮素的表达增加了腹膜微环境中卵巢癌的转移。
Hilliard TS、Kowalski B、Iwamoto K、Agadi EA、Liu Y、Yang J、Asem M、Klymenko Y、Johnson J、Shi Z、Marfowaa G、Yemc MG、Petrasko P、Stack MS。 Hilliard TS等人。国际分子科学杂志。2021年11月18日；22(22):12443. doi:10.3390/ijms22212443。国际分子科学杂志。2021 PMID：34830322 免费PMC文章。

查看所有“被引用”文章

工具书类

1. Altomare DA。一种再现人类间皮瘤分子特征的小鼠模型。2005年癌症研究；65:8090–8095. doi:10.1158/008-5472.CAN-05-2312。-内政部-公共医学
1. A P，Sáenz Robles MT，Pipas JM。多瘤病毒的大T抗原：惊人的分子机器。微生物年鉴。2012;66:213–236. doi:10.1146/annurev-micro-092611-150154。-内政部-公共医学
1. Balmain A.癌症是一种复杂的遗传特征：人类和小鼠模型的肿瘤易感性。单元格。2002;108:145–152. doi:10.1016/S0092-8674（02）00622-0。-内政部-公共医学
1. Bianchi AB，Mitsunaga SI，Cheng JQ，等。原发性恶性间皮瘤中神经纤维瘤病2型基因（NF2）失活突变的高频率。美国国家科学院院刊1995；92:10854–10858. doi:10.1073/pnas.92.24.10854。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
1. Bianchi C、Giarelli L、Grandi G等。胸膜石棉相关间皮瘤的潜伏期。欧洲癌症预防杂志。1997年；6:162–166.-公共医学

出版物类型

行动

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

物质

行动
行动
行动
行动

LinkOut-更多资源

[1] Altomare DA。一种再现人类间皮瘤分子特征的小鼠模型。2005年癌症研究；65:8090–8095. doi:10.1158/008-5472.CAN-05-2312。-内政部-公共医学

[2] Altomare DA。一种再现人类间皮瘤分子特征的小鼠模型。2005年癌症研究；65:8090–8095. doi:10.1158/008-5472.CAN-05-2312。-内政部-公共医学

[3] A P，Sáenz Robles MT，Pipas JM。多瘤病毒的大T抗原：惊人的分子机器。微生物年鉴。2012;66:213–236. doi:10.1146/annurev-micro-092611-150154。-内政部-公共医学

[4] A P，Sáenz Robles MT，Pipas JM。多瘤病毒的大T抗原：惊人的分子机器。微生物年鉴。2012;66:213–236. doi:10.1146/annurev-micro-092611-150154。-内政部-公共医学

[5] Balmain A.癌症是一种复杂的遗传特征：人类和小鼠模型的肿瘤易感性。单元格。2002;108:145–152. doi:10.1016/S0092-8674（02）00622-0。-内政部-公共医学

[6] Balmain A.癌症是一种复杂的遗传特征：人类和小鼠模型的肿瘤易感性。单元格。2002;108:145–152. doi:10.1016/S0092-8674（02）00622-0。-内政部-公共医学

[7] Bianchi AB，Mitsunaga SI，Cheng JQ，等。原发性恶性间皮瘤中神经纤维瘤病2型基因（NF2）失活突变的高频率。美国国家科学院院刊1995；92:10854–10858. doi:10.1073/pnas.92.24.10854。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[8] Bianchi AB，Mitsunaga SI，Cheng JQ，等。原发性恶性间皮瘤中神经纤维瘤病2型基因（NF2）失活突变的高频率。美国国家科学院院刊1995；92:10854–10858. doi:10.1073/pnas.92.24.10854。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[9] Bianchi C、Giarelli L、Grandi G等。胸膜石棉相关间皮瘤的潜伏期。欧洲癌症预防杂志。1997年；6:162–166.-公共医学

[10] Bianchi C、Giarelli L、Grandi G等。胸膜石棉相关间皮瘤的潜伏期。欧洲癌症预防杂志。1997年；6:162–166.-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

永生化小鼠间皮细胞的建立及一种新型间皮瘤细胞系

附属

永生化小鼠间皮细胞的建立及间皮瘤细胞系的建立

作者

附属

勘误表in

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

医疗

研究材料

其他

勘误表in

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

相关信息

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

医疗

研究材料

其他