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。2011年3月25日：1382:275-81。
doi:10.1016/j.braines.2011.01.048。 Epub 2011年1月22日。

Wnt1细胞系中缺乏早老素-1的小鼠脑积水和异常的膜下器官

Mitsunari Nakajima公司 1, 松田庆子, 宫崎直人, 福田康熙, 渡边松男, 冈山佐治, 胡安·佩雷斯, 佩德罗·费尔南德斯·勒布雷兹, 沈洁, 福川义子
附属公司

Wnt1细胞系中缺乏早老素-1的小鼠脑积水和异常的膜下器官

Mitsunari Nakajima公司等。 大脑研究。 。

勘误表in

  • 脑研究2011年6月13日；1395:116

摘要

早老素-1（PS1）是一种跨膜蛋白，在许多情况下与家族性阿尔茨海默病的发生有关。PS1在胚胎发生中广泛表达，对神经发生、体细胞发生、血管生成和心脏形态发生至关重要。为了进一步研究PS1在大脑中的作用，我们使用Cre-loxP重组系统使Wnt1细胞系中的PS1基因失活。这里我们显示，Wnt1细胞系中PS1的条件失活会导致先天性脑积水和缝下器官异常，提示PS1可能在调节脑脊液稳态中发挥作用。

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数字

图1
图1
Wnt1-cre PS1-cKO大脑的心室扩张。用苏木精和伊红对5周龄的对照组（A，C）和Wnt1-cre PS1-cKO（B，D）小鼠的矢状面（A，B）和冠状面（C，D）脑切片进行染色。注意侧脑室（B和D中的黑色箭头）和第三脑室（D中的箭头）的扩张。（E） 用图像J测量对照组（n=6）和Wnt1-cre PS1-cKO（n=8）小鼠冠状断面的心室面积（侧心室和第三心室）和大脑总面积，并计算心室面积相对于大脑总面积的百分比。数值为平均值±标准偏差。*：对照组和Wnt1-cre PS1-cKO组之间的百分比差异显著（P<0.005）。钢筋=5 mm（A，B），3 mm（C，D）。
图2
图2
Wnt1-cre PS1-cKO小鼠SCO和室管膜细胞异常。用抗SCO-糖蛋白（A，B的AFRU；C，D的Mab4A6）或抗波形蛋白（E-H）抗体对5周龄的对照（A，C，E，G）和Wnt1-cre PS1-cKO（B，D，F，H）小鼠脑SCO的4μm厚冠状石蜡切片进行免疫组化染色。（G） 和（H）分别以（E）和（F）中方框标记的区域的较高放大倍数显示视图。注意突变体中变形的SCO（B，D，F）。突变SCO中SCO-糖蛋白的免疫反应性降低（B和D箭头所示）。突变体中的室管膜细胞形状异常，细胞中的波形蛋白表达增加（H中的箭头）。30μm厚的冠状低温恒温器切片，穿过4个第个用抗上合组织糖蛋白抗体（Mab4A6）对5周龄的对照（I，K）和Wnt1-cre PS1-cKO（J，L）小鼠脑的心室进行免疫组织化学染色。注意，与对照相比，突变体（J，L）中缺乏Reissner纤维（Reissner纤维由K中的箭头指示）。3V=3伏第个心室。4伏=4第个心室。棒材=0.2毫米（A、B）、0.1毫米（C、D）、0.1厘米（E、F）、0.03毫米（G、H）、0.05毫米（I、J）、0.02毫米（K、L）。
图2
图2
Wnt1-cre PS1-cKO小鼠SCO和室管膜细胞异常。用抗SCO-糖蛋白（A，B的AFRU；C，D的Mab4A6）或抗波形蛋白（E-H）抗体对5周龄的对照（A，C，E，G）和Wnt1-cre PS1-cKO（B，D，F，H）小鼠脑SCO的4μm厚冠状石蜡切片进行免疫组化染色。（G） 和（H）分别以（E）和（F）中方框标记的区域的较高放大倍数显示视图。注意突变体中变形的SCO（B，D，F）。突变SCO中SCO-糖蛋白的免疫反应性降低（B和D箭头所示）。突变体中的室管膜细胞形状异常，细胞中的波形蛋白表达增加（H中的箭头）。30μm厚的冠状低温恒温器切片，穿过4个第个用抗SCO-糖蛋白抗体（Mab4A6）对5周龄的对照（I，K）小鼠脑室和Wnt1-cre PS1-cKO（J，L）小鼠脑进行免疫组化染色。请注意，与对照组相比，突变体（J，L）中缺少Reissner纤维（Reissner的纤维由K中的箭头指示）。3伏=3第个心室。4伏=4第个心室。棒材=0.2毫米（A、B）、0.1毫米（C、D）、0.1厘米（E、F）、0.03毫米（G、H）、0.05毫米（I、J）、0.02毫米（K、L）。
图3
图3
Wnt1-cre PS1-cKO小鼠SCO降低和Sylvian导水管狭窄。用苏木精和曙红对来自5周龄对照（A、C、E）和Wnt1-cre PS1-cKO（B、D、F）小鼠大脑的罗斯特拉尔至尾侧冠状切片进行染色。注意突变体中SCO的形成减少（B中的白色细箭头）和Sylvian导水管的狭窄（D和F中的白色箭头）。第三V=第三心室，Aq=侧脑室导水管。钢筋=0.4 mm
图4
图4
限制性Wnt1-cre介导的脑内重组。Wnt1-cre（Tg/+）的矢状面（A）和冠状面（B，C，D）脑切片；用X-gal试剂对5周龄的Rosa26-LacZ（floxed/+）小鼠进行染色。条件Rosa26-LacZ等位基因的存在允许对其中loxP位点与Wnt1-cre等位基因重组的细胞进行X-gal染色。注意，X-gal染色仅限于小脑（A，D）、中脑（A）和内侧缰核（A，B）。在形成第三脑室（B）和第四脑室（D）的SCO（C）、室管膜细胞（C）和脉络丛的细胞中也存在强β-半乳糖苷酶染色。3V=第三脑室，4V=第四脑室，CB=小脑，CP=脉络丛，DG=齿状回，EC=室管膜细胞，MB=中脑，MH=内侧缰核，SCO=肌下器官。钢筋=2 mm（A）、0.1 mm（B）、0.05 mm（C）、0.2 mm（D）。
图5
图5
PS1的Western blotting。Western blot分析对照组（1和3区）和Wnt1-cre PS1-cKO（2区和4区）小鼠皮层（1区和2区）和小脑（3区和4）的蛋白裂解物。使用抗PS1-NTF、抗PS1-CTF、抗APP-CTF或抗肌动蛋白抗体对印迹蛋白进行染色。注意PS1-NTF和-CTF带强度的降低以及突变小脑中APP-stub的出现（通道4）。
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