跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https公司

网站是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
。2010年8月10日；5（8）：e12059。
doi:10.1371/journal.pone.0012059。

非极端日间紫外线照射下再造皮肤角质形成细胞和成纤维细胞的不同氧化应激反应

克莱尔·马里奥内特 1, 塞西尔·皮尔拉德, 弗朗索瓦·勒琼, 朱丽叶·索克, 玛丽·托马斯, 弗朗索瓦斯·伯内德
附属公司

非极端日间紫外线照射下再造皮肤角质形成细胞和成纤维细胞的不同氧化应激反应

克莱尔·马里奥内特等。 公共科学图书馆一号。 。

摘要

表征阳光照射生物效应的实验通常涉及太阳模拟器。然而，他们解决了最坏的情况，即在常见的户外活动中很少出现的天顶太阳。因此，定义了一种非极端紫外线辐射光谱，称为“日常紫外线辐射”（DUVR），其UVA（320-400 nm）与UVB（280-320 nm）的辐照度比更高。在本研究中，分析了急性暴露于低生理剂量的DUVR（相当于4月中旬巴黎每天接受剂量的10%和20%）对三维重建皮肤模型的生物影响。在这种情况下，只有在使用最高剂量的DUVR后才能检测到表皮和皮肤形态的改变。然后，我们通过分析成纤维细胞和角质形成细胞中24个平行标记物的mRNA水平的调节，重点关注DUVR诱导的氧化应激反应。DUVR显著调节了这两种细胞类型中这些标记物的mRNA水平。注意到一种细胞类型差异反应：与角质形成细胞反应相比，成纤维细胞的反应更快，大多数诱导和高水平调节。因此，我们的研究结果显示，尽管皮肤深层存在真皮成纤维细胞，但其对氧化应激的反应更为敏感，这为了解日常紫外线暴露中发生的皮肤生物事件提供了新的见解。

PubMed免责声明

利益冲突声明

竞争利益：所有作者均为欧莱雅高级研究公司的全职员工。因此，他们参与了基础研究项目。该研究领域属于欧莱雅理疗中心感兴趣的一般领域，即紫外线对皮肤的生物效应。作者确认，这不会改变他们对《作者指南》中详述的所有PLoS ONE数据和材料共享政策的遵守。

数字

图1
图1。模拟紫外线照射对人体再造皮肤的皮肤和细胞效应。
（a） ：使用校准的马卡姆光谱辐射计记录DUVR光谱。阴影区域表示DUVR光谱中的UVA部分。（b） ：假辐照（对照），7焦耳/厘米2和13焦耳/厘米248小时后，采集DUVR暴露样品进行经典组织学检查，并进行波形蛋白（波形蛋白：绿色标记，细胞核反染：红色标记）和p53免疫标记。暴露于7 J/cm2与对照样品相比，DUVR没有引起变化。相反，13焦耳/厘米2DUVR导致皮肤表层成纤维细胞消失，并诱导p53阳性角质形成细胞（箭头所示）。（c） 样品经过假辐照（对照）或暴露于7 J/cm2和13焦耳/厘米2连续5天每天一次DUVR。最后一次暴露72小时后，对其进行组织学和vimnetin免疫染色取样。与对照组相比，重复剂量的DUVR处理的样品在表皮（基底层上角质形成细胞的厚度减少和死亡）和真皮（成纤维细胞的数量减少）方面表现出剧烈的变化。箭头表示活的成纤维细胞，括号表示活的角质形成细胞。（d） ：MMP-1 ELISA检测：在急性或反复暴露（每天一次，连续5天）于指定剂量的DUVR后，测量培养基中产生的MMP-1的量。星号表示显著不同的值。酒吧 = 50微米。
图2
图2。暴露于DUVR的重建皮肤中的ROS测定。
左面板-DUVR暴露后重建皮肤中DCFH-DA荧光水平。右面板-DCFH-DA探针并入和DUVR暴露后重建皮肤的切片。括号和箭头分别表示DUVR暴露样品中的荧光角质形成细胞和成纤维细胞。未在非假体再造皮肤中检测到任何一种。虚线划分表皮和真皮。
图3
图3。人体再造皮肤DUVR暴露后基因调制的分布、类型和平均值。
在DUVR暴露后2、6和24小时，在每个时间点的三个独立实验中，通过QPCR分别定量重建皮肤的成纤维细胞（F）和角质形成细胞（K）中24个氧化应激标记物的mRNA水平。（a） 显著调制基因的调制数量和类型。（b） 调制比对数的平均值和置信区间。在每个时间点，计算每个标记的基因调制比（暴露样品中的mRNA量与3个对照样品中的平均mRNA量）。24对数的平均值和置信区间10计算了调制比。大于或小于0的值分别对应于mRNA数量的诱导或抑制。
图4
图4。DUVR暴露重建皮肤中Nrf2靶基因mRNA和蛋白水平的调节。
（a） ：DUVR暴露后2和6小时（7或13 J/cm2)QPCR法测定成纤维细胞（F）和角质形成细胞（K）中HO-1、TXNR、NQO1、γGCS-L和γGCS-H的mRNA水平。每个直方图条显示归一化mRNA数量（n）的平均值±平均标准误差（SEM） = 3). 将假暴露样品中的mRNA量调整为1。指示值对应显著调制（*，p<0.05）。（b） ：7 J/cm后6小时和24小时2用western blot法检测重建皮肤成纤维细胞（F）和角质形成细胞（K）中全细胞和胞质提取物中的DUVR、HO-1和TXNR蛋白水平。GAPDH水平用于数据标准化。阳性对照：用20µM forskolin处理的正常人黑素细胞。
图5
图5。DUVR对人再造皮肤中倍体mRNA水平的影响。
在DUVR暴露后2小时和6小时，通过QPCR定量假手术或DUVR照射样品（7或13 J/cm）重建皮肤成纤维细胞（F）和角质形成细胞（K）中倍体基因（即SESN1-T1、SESN1-T2、SESN3、SESN2）的mRNA水平2). 每个直方图条显示标准化mRNA数量（n）的平均值±SEM = 3). 将sham暴露样品中每个标记的mRNA量调整为1。指示值对应于DUVR暴露样品中的mRNA数量平均值，与对照样品中的平均mRNA数量有统计学差异（*，Student’t检验，p<0.05）。
图6
图6。DUVR对人类重建皮肤中金属硫蛋白亚基mRNA水平的影响。
DUVR暴露6小时后，通过QPCR对假手术或DUVR暴露样品中重建皮肤的成纤维细胞（F）和角质形成细胞（K）中金属硫蛋白基因（即MT1G、MT1X、MT1E和MT2A）的mRNA水平进行定量（7或13 J/cm2). 每个直方图条显示标准化mRNA数量（n）的平均值±SEM = 3). 将sham暴露样品中每个标记的mRNA量调整为1。指示值对应于DUVR暴露样本中mRNA量的平均值，与对照样本中mRNA量的平均值在统计学上不同（*，Student’t检验，p<0.05）。
图7
图7。DUVR对人再造皮肤中MSRA mRNA和蛋白水平的影响。
（a） DUVR暴露后2、6和24小时（7或13 J/cm2)用QPCR定量分析再造皮肤成纤维细胞（F）和角质形成细胞（K）中MSRA的mRNA水平。每个直方图条显示标准化mRNA数量（n）的平均值±SEM = 3). 将假暴露样品的mRNA量调整为1。指示值对应显著的调制（见材料和方法，*学生测试，p<0.05）。（b） 7 J/cm后6小时和24小时2检测重建皮肤表皮角质形成细胞全细胞提取物中MSRA蛋白的含量。使用GAPDH水平对数据进行标准化。箭头表示MSRA对应的波段。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

查看所有“被引用”文章

参考文献

    1. Gilchrest BA。皮肤上皮增生症（阳光诱导的衰老）收录：Gilchrest-BA，编辑。光损伤。美国剑桥：Blackwell Science Inc；1995年，第97–116页。
    1. Kraemer KH。阳光与皮肤癌：另一个发现的联系。美国国家科学院院刊1997；94:11–14.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. 科利帕。比利时布鲁塞尔：欧洲化妆品、盥洗用品和香水协会；1994年，Colipa防晒系数测试方法。
    1. Sheehan JM，Young AR。《晒伤细胞重访：机械方面的更新》。光化学光生物科学。2002;1:365–377.-公共医学
    1. Young AR、Orchard GE、Harrison GI、Klock JL。日常的亚红斑暴露对人体皮肤的有害影响可以通过日常使用的广谱防晒霜来预防。《皮肤病学杂志》。2007;127:975–978.-公共医学

出版物类型

MeSH术语