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.2010;43(3):122-33.
doi:10.1159/000252979。 Epub 2009年10月29日。

视网膜色素上皮-脉络膜灌注组织培养过程中视网膜色素上皮细胞形态和功能的变化

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视网膜色素上皮-脉络膜灌注组织培养过程中视网膜色素上皮细胞形态和功能的变化

三浦洋子等。 眼科研究. 2010.

摘要

目的:评价视网膜色素上皮(RPE)-脉络膜灌注培养物在培养过程中形态和功能的变化。

方法:在灌注组织培养系统中培养猪RPE脉络膜组织。在指定的时间后,检查组织学、IV型胶原和血管性血友病因子的免疫定位、钙调素-AM的RPE细胞活性、TUNEL分析和RPE细胞的闭塞素免疫定位。在不同的时间段后,用选择性RPE治疗激光对组织进行治疗,并对伤口愈合反应进行表征。用酶联免疫吸附法测定血管内皮生长因子分泌。

结果:第8天,组织学上观察到RPE细胞明显的形态学退行性改变。根据IV型胶原的免疫组织化学,布鲁赫膜直到第8天才显示出任何明显的分解。Von Willebrand因子染色在培养期间下降,特别是在脉络膜毛细血管。钙化蛋白-AM染色和TUNEL分析显示,仅少数细胞在第4天出现凋亡变化,但在第8天许多细胞出现凋亡变化。在第8天观察到阻塞素去定位。当在新鲜培养物和3天培养物上受伤时,选择性RPE治疗激光产生的伤口被单层RPE完全封闭,但在6天培养物中受伤时,单层RPE没有完全封闭。血管内皮生长因子的分泌在第2天到第5天之间保持稳定,但之后增加。

结论:在规定的培养灌注条件下,猪RPE脉络膜组织适合于实验,最多可维持5天。

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