TAp73 knockout shows genomic instability with infertility and tumor suppressor functions

doi:10.1101/gad.1695308

。2008年10月1日；22(19):2677-91.

doi:10.10101/gad.1695308。 Epub 2008年9月19日。

TAp73基因敲除显示基因组不稳定性与不育和肿瘤抑制功能

理查德·托马西尼¹, 竹原胜也, 玛格丽塔·威廉, 藤谷正史, 亚历山德罗·鲁菲尼, 卡罗尔·C·张, 法蒂玛·可汗, 安妮克·伊蒂·尤滕, 安德鲁·韦克汉姆, 曹明声, 胡安·利奥瓦纳, 杰里米·斯奎尔, Igor法理学, 大卫·卡普兰, 格里·梅利诺, 安德烈亚·尤里西科娃, Tak W Mak公司

附属机构

PMID： 18805989
预防性维修识别码：项目经理2559903
内政部： 10.1101/加德1695308

TAp73基因敲除显示基因组不稳定性与不育和肿瘤抑制功能

理查德·托马西尼等。基因开发。 2008。

。2008年10月1日；22(19):2677-91.

doi:10.1101/gad.1695308。 Epub 2008年9月19日。

作者

理查德·托马西尼¹, 竹原胜也, 玛格丽塔·威廉, 藤谷正史, 亚历山德罗·鲁菲尼, 卡罗尔·C·张, 法蒂玛·可汗, Annick Itie-Youten公司, 安德鲁·韦克汉姆, 曹明声, 胡安·利奥瓦纳, 杰里米·斯奎尔, Igor法理学, 大卫·卡普兰, Gerry Melino公司, 安德烈亚·尤里西科娃, Tak W Mak公司

隶属关系

¹坎贝尔家族乳腺癌研究所，加拿大安大略省多伦多市玛格丽特公主医院，M5G 2C1。

PMID： 18805989
预防性维修识别码：项目经理2559903
内政部： 10.1101/加德1695308

摘要

Trp53基因家族成员Trp73编码两种主要的蛋白质亚型，即TAp73和DeltaNp73，具有相反的促凋亡和抗凋亡功能；因此，它们的相对比例调节细胞命运。然而，p73亚型在肿瘤发生、胚胎发育和细胞死亡等细胞事件中的确切作用尚不清楚。为了确定p73功能的哪些方面可归因于TAp73亚型，我们生成并鉴定了编码TAp73异构体的外显子被特异性删除以产生TAp73缺陷（TAp73（-/-））小鼠的小鼠。在这里，我们表明，特异性缺乏TAp73亚型的小鼠在Trp73（-/-）和Trp53（-/--）小鼠的表型之间形成了一种表型中间物，与自发性和致癌诱导的肿瘤、不育、衰老以及海马发育不全的发生率有关。此外，TAp73（-/-）小鼠的细胞表现出与非整倍体增强相关的基因组不稳定性，这可能是这些突变体中观察到的自发性肿瘤发病率增加的原因。因此，TAp73亚型发挥肿瘤抑制功能，并表明Trp73在维持基因组稳定性中的新作用。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
TAp73的生成^−/−小鼠和上调ΔNp73表达。(一个)小鼠的结构*Trp73型*显示TAp73和ΔNp73亚型家族的基因。领域：（蓝色）交易激活；（橙色）DNA结合；（黄色）齐聚；（绿色）不育α基序。(B类)目标战略。指示靶向载体与野生型的同源重组*Trp73型*基因导致用新基因和TAp73亚型特异性外显子2和3的缺失。显示了LoxP位点和用于Southern印迹的探针。(C)TAp73组织中ΔNp73表达的定量^+/+和TAp73^−/−老鼠。TAp73中ΔNp73 mRNA水平的倍增^−/−组织与野生型组织进行实时PCR比较。(**)*P（P）*<0.01（学生的t吨-测试）。(D类)10月龄野生型和TAp73缺乏小鼠肺和卵巢中ΔNp73水平的Western blot分析。C-17抗体对α-C末端同种型具有特异性，IMG-313抗体对ΔNp73同种型具有特异性。（Ab）抗体。(E类)胸腺细胞死亡。来自TAp73的胸腺细胞^+/+，TAp73^−/−和p53^−/−用指定浓度的指定药物处理小鼠24小时，并通过annexinV染色和流式细胞术检测细胞死亡率。数据表示两个实验的平均值±SD。

**图2。**
TAp73生殖缺陷的特征^−/−雌性小鼠。(一个)正常TAp73^−/−卵巢结构。(左侧和中心面板）4周龄TAp73卵巢切片^+/+和TAp73^−/−苦味酸和甲基蓝染色的小鼠。放大倍率，5×10。(赖特面板）虽然未检测到卵巢大体形态的明显差异，但排卵卵母细胞被困在TAp73的囊下^−/−卵巢。放大倍数，40×10。(B类)TAp73缺乏的雌性排卵较少。不成熟TAp73^+/+，TAp73^+/−和TAp73^−/−对雌性小鼠进行超数排卵，计算每只小鼠的卵母细胞数。结果显示，所示数量的平均排卵卵母细胞数±SE(n个)小鼠/基因型。(**)*P（P）*<0.001（学生的t吨-测试）。(C)卵巢储备因TAp73缺乏而减少。超排卵未成熟TAp73的卵巢序列切片^+/+和TAp73^−/−对小鼠进行组织形态计量学分析。结果显示，每组5只小鼠的平均非滋养卵泡数/小鼠±SE。（*）*P（P）*< 0.01; (**)*P（P）*<0.001（学生的t吨-测试）。原始（Prd）卵泡和初级（Prm）卵泡的数量均显著减少，但具有两到三层颗粒细胞（Sec-2/3）的次级卵泡数量所证明的生长速度没有改变。(D类)排卵卵母细胞数量减少是由排卵障碍而非卵泡发育不足引起的。在3周龄TAp73中测定了排卵前（46h/PMSG）带有卵母细胞的格拉夫卵泡数和排卵后（14h/HCG）带有卵子的黄体化卵泡数^+/+和TAp73^−/−雌性小鼠。结果显示Graffian卵泡/小鼠的平均数±SEn个=每组5只小鼠。(**)*P（P）*<0.001（学生的t吨-测试）。

**图3。**
TAp73缺乏对卵母细胞质量的影响。(一个,B类)TAp73纺锤异常的定量^+/+和TAp73^−/−体外成熟卵母细胞(一个)或体内(B类). 虽然在进行减数分裂和中期II（MII）阻滞的能力上没有观察到差异，但在TAp73卵母细胞中检测到更多的纺锤体异常。(**)*P（P）*<0.001（学生的t吨-测试）。(C)具有代表性的示例B类.放大倍数，40×10。(D类)IVF程序显示，TAp73缺陷导致的受精率没有差异，但受精卵通过着床前发育的进展是异常的。TAp73的百分比^−/−受精后在适当的发育日达到四至八细胞、桑椹胚和囊胚阶段的卵母细胞数量大大减少。（*）*P（P）*< 0.01; (***)*P（P）*< 0.0001. 使用*X（X）*2测试。(E类)从TAp73获得的IVF衍生囊胚质量较差^−/−通过细胞总数评估卵母细胞(左边)和内细胞质量（ICM）评分(*正确的*). （**）*P（P）*<0.001（学生的t吨-测试）。(F类)胚泡DAPI染色(顶部，放大倍率，20×10）和八世纪停滞胚胎(底部，放大倍数，40×10）B类（白色箭头）有丝分裂细胞；（白色箭头）正常核；（红色箭头）多核细胞；（红色箭头）精子头。(*G公司*)出生后第4天TAp73的表达^+/+用H79抗体免疫组化染色检测卵巢。(*H（H）*)TAp73上调基因的网络可视化^+/+和TAp73^−/−新生儿卵巢。节点颜色表示GO（基因本体）功能，如图例所示。节点形状代表不同的目标：指向上的三角形是TAp73中上调的目标^−/−卵巢；指向下方的三角形是TAp73中上调的靶点^+/+卵巢。用红色圈出的菱形和三角形代表网络中的关键蛋白质。较粗的线条表示靶点之间的直接相互作用。红线代表网络中的关键相互作用。所有其他线代表次级相互作用蛋白质。

**图4。**
TAp73对正常海马发育至关重要。使用七个TAp73的多个实验的代表性图片*^+/+*和七个TAp73^−/−4个月龄TAp73小鼠冠状前脑切片*^+/+*(一个,C,E类)和TAp73^−/−(B类,D类,F类)用甲酚紫染色的C57B6背景小鼠。(一个,B类)前脑前连合水平的Nissl染色冠状切片。箭头表示侧脑室。TAp73的皮层厚度（括号）相似*^+/+*和TAp73^−/−大脑。(*C–F类*)前脑头侧海马水平的Nissl染色冠状切片。中方框表示的面积C和D类以更高的放大倍数显示E类和F类分别是。箭头在D类和F类表示齿状回下叶的位置，该位置在TAp73中缺失*^−/−*大脑。

**图5。**
TAp73^−/−小鼠易患肿瘤，对致癌物敏感。(一个)TAp73的Kaplan-Meyer生存曲线^+/+(n个=18），TAp73^+/−(n个=20）和TAp73^−/−(n个=22）只小鼠。*P（P）*<0.001（对数秩检验）。(B类)TAp73中的自发性肿瘤谱^+/+，TAp73^+/−和TAp73^−/−老鼠。TAp73中的自发性肿瘤发展^−/−老鼠是有意义的*P（P）*-的值*P（P）*<0.005(*X（X）*2测试）。(C，箭头）TAp73组织中的H&E染色肿瘤^−/−老鼠。（1）原位结肠癌，10倍放大。（2）卵巢侵袭性淋巴瘤，10倍放大。（3a–3c）肺腺癌，10倍放大，3b是3c的高倍放大，20倍放大。（4a–4b）子宫浸润性淋巴瘤，10倍放大，4b是4a、40倍放大的高倍放大。虚线表示健康组织和肿瘤组织之间的边界。(D类)六种TAp73的代表性LOH分析^+/−荷瘤小鼠（T1-6）；（T）肿瘤；（N）正常组织。(E类)DMBA处理的TAp73的Kaplan-Meyer生存曲线^+/+(n个=23）和TAp73^−/−(n个=23）小鼠在治疗后的几周内。*P（P）*<0.005（对数秩检验）。

**图6。**
在没有TAp73的情况下，基因组稳定性的维持有缺陷。(一个)TAp73流式细胞术细胞周期分析^+/+(顶部)和TAp73^−/−(底部)用诺卡唑治疗MEF达指定小时数。该图是使用FlowJo 7.2.2软件创建的。(B类)磷烯酮H3的百分比⁺TAp73培养物中的细胞^+/+（TAp73野生型）和TAp73^−/−用诺卡唑治疗MEF指定时间。（*）*P（P）*<0.01（学生的t吨-测试）。(C)多核百分比(左边)和有丝分裂(*正确的*)TAp73中的细胞^+/+和TAp73^−/−如图所示，用紫杉醇或诺卡唑处理的MEF。(底部)DAPI染色的多核TAp73^−/−中小微企业；放大40倍。所示数据代表三个不同实验的平均值±SE。(**)*P（P）*<0.001（学生的t吨-测试）。(D类)H1299培养物中过度表达空载体（EV）或含有所示TAp73亚型的载体并用紫杉醇处理24小时的多核细胞百分比（**）*P（P）*<0.001（学生的t吨-测试）。(E类,F类)G2/M期或>G2/M相的细胞百分比（非整倍体细胞）。从肺部提取细胞(E类)或胸腺(F类)野生型TAp73^−/−、和*Trp53基因*^−/−小鼠，并用诺可达唑治疗12小时。结果显示为三个独立试验的细胞平均百分比±SE。(**)*P（P）*<0.001（学生的t吨-测试）。(*G公司*)非整倍体增加。(顶部)TAp73中的细胞百分比^+/+和TAp73^−/−3T3培养物显示二倍体（2N）、近二倍体、四倍体（4N）、近四倍体（±4N）和非整倍体（>4N）DNA含量。(底部)a±4N TAp73的代表性核型^−/−3T3电池。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

中的注释

陪审团支持：p73毕竟是一种肿瘤抑制剂。
Rosenbluth JM、Pietenpol JA。 Rosenbluth JM等人。基因开发，2008年10月1日；22(19):2591-5. doi:10.1101/gad.1727408。基因开发2008。 PMID：18832062 审查。

类似文章

肾脏发生过程中DeltaNp73到TAp73亚型的时空转换：对分化基因表达的影响。
塞夫丁Z、迪亚沃里提斯V、斯特夫科娃J、迪普S、范H、埃尔达尔SS。 Saifudeen Z等人。生物化学杂志。2005年6月17日；280(24):23094-102. doi:10.1074/jbc。M414575200。Epub 2005年4月1日。生物化学杂志。2005 PMID：15805112
无名指泛素连接酶PIR2对TAp73和DeltaNp73蛋白稳定性的差异控制。
Sayan BS、Yang AL、Conforti F、Tucci P、Piro MC、Browne GJ、Agostini M、Bernardini S、Knight RA、Mak TW、Melino G。 Sayan BS等人。美国国家科学院院刊2010年7月20日；107(29):12877-82. doi:10.1073/pnas.0911828107。Epub 2010年7月6日。美国国家科学院院刊，2010年。 PMID：20615966 免费PMC文章。
肿瘤蛋白p73的多种亚型在成人端脑和脉络丛中表达，并存在于脑脊液中。
Cabrera-Socror A、Pueyo Morlans M、Suarez Sola ML、Gonzalez Delgado FJ、Castañeyra-Perdomo A、Marin MC、Meyer G。 Cabrera Socorro A等人。欧洲神经病学杂志。2006年4月；23(8):2109-18. doi:10.1111/j.1460-9568.2006.04750.x。欧洲神经病学杂志。2006 PMID：16630058
p73通过不同的机制诱导细胞凋亡。
Ramadan S、Terrinoni A、Catani MV、Sayan AE、Knight RA、Mueller M、Krammer PH、Melino G、Candi E。 Ramadan S等人。生物化学与生物物理研究委员会。2005年6月10日；331(3):713-7. doi:10.1016/j.bbrc.2005.03.156。生物化学与生物物理研究委员会。2005 PMID：15865927 审查。
p63和p73：在发育和肿瘤形成中的作用。
Moll UM，Slade N。 Moll UM等人。 Mol Cancer Res.2004年7月；2(7):371-86. Mol Cancer Res.2004年。 PMID：15280445 审查。

查看所有类似文章

引用人

RAC1b与TAp73α-SMAD4信号协同诱导人胰腺癌中双糖表达并抑制基底细胞和TGF-β驱动的细胞运动。
Ungefroren H、Reimann J、Konukiewitz B、Braun R、Wellner UF、Lehnert H、Marquardt JU。 Ungefroren H等人。生物医学。2024年1月16日；12(1):199. doi:10.3390/生物医学12010199。生物医学。2024 PMID：38255305 免费PMC文章。
同位素特异性破坏TP73型该基因揭示了TAp73γ通过瘦素在肿瘤发生中的关键作用。
孔X、严伟、孙伟、张毅、杨华杰、陈明、陈浩、德维尔·怀特·RW、张杰、陈曦。 Kong X等人。埃利夫。2023年8月31日；12:电话82115。doi:10.7554/eLife.82115。埃利夫。2023 PMID：37650871 免费PMC文章。
TAp73通过促进SMAD4表达和SMAD4依赖性抑制ERK激活来抑制胰腺癌细胞中的EMT和细胞迁移。
Ungefroren H、Konukiewitz B、Braun R、Wellner UF、Lehnert H、Marquardt JU。 Ungefroren H等人。癌症（巴塞尔）。2023年7月26日；15(15):3791. doi:10.3390/cancers15153791。癌症（巴塞尔）。2023 PMID：37568607 免费PMC文章。
HTLV-1 bZIP因子诱导的乳酸代谢重编程和表观遗传学状态促进白血病细胞扩增。
丰田章男（Toyoda K）、JI Yasunaga、T Shichijo T、Arima Y、Tsujita K、Tanaka A、Salah T、Zhang W、Hussein O、Sonoda M、Watanabe M、Kurita D、Nakashima K、Yamada K、Miyoshi H、Ohsima K、Matsuoka M。 Toyoda K等人。血癌发现。2023年9月1日；4(5):374-393. doi:10.1158/2643-3230.BCD-22-0139。血癌发现。2023 PMID：37162520 免费PMC文章。
p73激活胰腺导管腺癌中基础谱系鉴定和纤毛发生的转录特征。
Hur SK、Somerville TDD、Wu XS、Maia-Silva D、Demerdash OE、Tuveson DA、Notta F、Vakoc CR。 Hur SK等人。 bioRxiv[预印本]。2023年4月21日：2023.04.20.537667。doi:10.1101/2023.04.20.537667。生物Rxiv。2023 PMID：37131797 免费PMC文章。预打印。

查看所有“被引用”文章

工具书类

1. Acton B.M.、Juriscova A.、Jurisica I.、Casper R.F.小鼠和人类胚胎发育植入前阶段线粒体膜电位的变化。摩尔·哼·再现。2004;10:23–32.-公共医学
1. 体节分割期间，Notch-regulated转录需要Akanuma T.、Koshida S.、Kawamura A.、Kishimoto Y.、Takada S.Paf1复合物同源物。2007年EMBO代表；8:858–863.-项目管理咨询公司-公共医学
1. Baird D.T.、Collins J.、Egozcue J.、Evers L.H.、Gianaroli L.、Leridon H.、Sunde A.、Templeton A.、Van Steirteghem A.、Cohen J.等人，《生育和衰老》。哼。谴责。更新。2005;11:261–276.-公共医学
1. Bolstad B.M.、Irizarry R.A.、Astrand M.、Speed T.P.基于偏差和方差的高密度寡核苷酸阵列数据归一化方法的比较。生物信息学。2003;19:185–193.-公共医学
1. Bourdon J.C.、Fernandez K.、Murray Zmijewski K.、Liu G.、Diot A.、Xirodimas D.P.、Saville M.K.、Lane D.P.p53亚型可以调节p53转录活性。《基因与发育》2005；19:2122–2137.-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型

行动

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

物质

行动
行动
行动
行动

赠款和资金

MC_U132670600/MRC_/医学研究委员会/英国

LinkOut-更多资源

[1] Acton B.M.、Juriscova A.、Jurisica I.、Casper R.F.小鼠和人类胚胎发育植入前阶段线粒体膜电位的变化。摩尔·哼·再现。2004;10:23–32.-公共医学

[2] Acton B.M.、Juriscova A.、Jurisica I.、Casper R.F.小鼠和人类胚胎发育植入前阶段线粒体膜电位的变化。摩尔·哼·再现。2004;10:23–32.-公共医学

[3] 体节分割期间，Notch-regulated转录需要Akanuma T.、Koshida S.、Kawamura A.、Kishimoto Y.、Takada S.Paf1复合物同源物。2007年EMBO代表；8:858–863.-项目管理咨询公司-公共医学

[4] 体节分割期间，Notch-regulated转录需要Akanuma T.、Koshida S.、Kawamura A.、Kishimoto Y.、Takada S.Paf1复合物同源物。2007年EMBO代表；8:858–863.-项目管理咨询公司-公共医学

[5] Baird D.T.、Collins J.、Egozcue J.、Evers L.H.、Gianaroli L.、Leridon H.、Sunde A.、Templeton A.、Van Steirteghem A.、Cohen J.等人，《生育和衰老》。哼。谴责。更新。2005;11:261–276.-公共医学

[6] Baird D.T.、Collins J.、Egozcue J.、Evers L.H.、Gianaroli L.、Leridon H.、Sunde A.、Templeton A.、Van Steirteghem A.、Cohen J.等人，《生育和衰老》。哼。谴责。更新。2005;11:261–276.-公共医学

[7] Bolstad B.M.、Irizarry R.A.、Astrand M.、Speed T.P.基于偏差和方差的高密度寡核苷酸阵列数据归一化方法的比较。生物信息学。2003;19:185–193.-公共医学

[8] Bolstad B.M.、Irizarry R.A.、Astrand M.、Speed T.P.基于偏差和方差的高密度寡核苷酸阵列数据归一化方法的比较。生物信息学。2003;19:185–193.-公共医学

[9] Bourdon J.C.、Fernandez K.、Murray Zmijewski K.、Liu G.、Diot A.、Xirodimas D.P.、Saville M.K.、Lane D.P.p53亚型可以调节p53转录活性。《基因与发育》2005；19:2122–2137.-项目管理咨询公司-公共医学

[10] Bourdon J.C.、Fernandez K.、Murray Zmijewski K.、Liu G.、Diot A.、Xirodimas D.P.、Saville M.K.、Lane D.P.p53亚型可以调节p53转录活性。《基因与发育》2005；19:2122–2137.-项目管理咨询公司-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

TAp73基因敲除显示基因组不稳定性与不育和肿瘤抑制功能

隶属关系

TAp73基因敲除显示基因组不稳定性与不育和肿瘤抑制功能

作者

隶属关系

摘要

数字

中的注释

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

分子生物学数据库

研究材料

摘要

数字

中的注释

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

相关信息

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

分子生物学数据库

研究材料