FGF17型CHH患者的突变
(A) 在转染FGFR1和FGF荧光素酶报告子的细胞中,增加WT FGF17的剂量会产生典型的乙状结肠剂量-反应曲线(蓝色),这被FGFR1c p.Leu342Ser改变所抵消。
(B) FGF17结构域示意图和确定蚀变位置。使用以下缩写:SP,信号肽。
(C) 在FGF8b-FGFR2c晶体结构(蛋白质数据库ID 2FDB)中观察到的FGF8b(橙色)与D2和FGFR2c的D2-D3连接体(绿色)之间的界面描述了FGF8bArg177(R177)与FGFR2cD2的Asp247(D247)之间的氢键,以及FGF8a与FGFRArg251(R251)之间的氢键。
(D) FGF8bβ-三叶核心的疏水内部说明了Ile108(I108)、Met151(M151)、Val65(V65)、Val67(V67)、Val99(V99)(Ile99,FGF17中的I99)、Leu86(L86)、Ile73(I73)和Phe129(F129)之间的疏水相互作用。
(E) FGF17结合的SPR分析重量(橙色)和FGF17p.Arg177他的(绿色)至FGFR1c外结构域。FGF17型重量和FGF17p.Arg177他的固定在CM5传感器芯片上,并传递不同浓度的FGFR1c胞外区。FGF17的完整剂量-反应曲线重量-FGFR1c和FGF17p.Arg177他的-生成FGFR1c结合。为了进行比较,显示了在每个配体上注射800 nM FGFR1c溶液后获得的传感器图的叠加。
(F) FGF荧光素酶报告分析表明,p.Arg177His(绿色)和p.Ile108Thr(红色)FGF17的改变损害了配体的生物活性。缩写如下:ns,不重要;a,p<0.05。
(G) FGFR1c p.Arg250Gln和FGF17 p.Ile108Thr功能丧失改变以相加方式起作用。荧光素酶活性绘制为三次独立实验的平均值±SEM(数据归一化为WT),并按中所述拟合剂量-反应曲线。使用以下缩写:a,p<0.05。
(H)17楼表达于Fgf8型-依赖的方式。Fgf17型E10.5 WT的WM-ISH(面板1和3)和Fgf8型纯合性低形态(Fgf8型−/−; 面板2和4)图中显示了胚胎。679nt地高辛标记17楼使用核糖探针。面板1和2显示胚胎头部的矢状图;比例尺代表500 mm。面板3和4显示胚胎头部的腹视图;比例尺代表250 mm。箭头的用法如下:实心箭头,中脑-中脑交界处;虚线箭头,连合板;箭头、内侧嗅板(GnRH神经元出现的地方)。