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.1997年9月5日;272(36):22417-24.
doi:10.1074/jbc.272.36.22417。

半胱氨酸亚硫酸盐脱硫酶,一种大肠杆菌NIFS样蛋白,具有硒半胱氨酸裂解酶和半胱氨酸脱硫酶活性。一种新型吡哆醛酶的基因克隆、纯化及特性研究

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半胱氨酸亚硫酸盐脱硫酶,一种大肠杆菌NIFS样蛋白,具有硒半胱氨酸裂解酶和半胱氨酸脱硫酶活性。一种新型吡哆醛酶的基因克隆、纯化及特性研究

H Mihara公司等。 生物化学杂志. .
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摘要

硒代半胱氨酸裂解酶(EC 4.4.1.16)专门将硒代半月氨酸分解为丙氨酸和元素硒,而棕色固氮杆菌的半胱氨酸脱硫酶(NIFS蛋白)不加区分地作用于半胱氨酸和硒代半乳糖,分别产生元素硫和硒以及丙氨酸。这些蛋白质显示出一些序列同源性。大肠杆菌基因组包含三个与nifS序列同源的基因。我们已经在染色体中克隆了63.4分钟定位的基因,并进行了表达、纯化至同源性,并对基因产物进行了表征。该酶包含两个具有401个氨基酸残基的相同亚基(Mr 43238),并含有5’-磷酸吡哆醛作为辅酶。该酶催化从L-半胱氨酸、L-胱氨酸、L-硒代半胱氨酸和L-硒代胱氨酸中去除元素硫和硒原子,生成L-丙氨酸。由于L-半胱氨酸亚磺酸被脱硫形成L-丙氨酸作为首选底物,我们将这种新酶命名为半胱氨酸亚硫酸盐脱硫酶。丙氨酸取代四个半胱氨酸残基(Cys-100、Cys-176、Cys-323和Cys-358)的突变酶都是活性的。半胱氨酸亚硫酸盐脱硫酶不需要Cys-358对应于维氏A.vinelandii NIFS的Cys-325,它在所有NIFS类蛋白质中都是保守的,并且是催化必需的(Zheng,L.,White,R.H.,Cash,V.L.,and Dean,D.R.(1994)Biochemicology 33,4714-4720)。因此,该酶在这方面与棕色棕曲霉NIFS不同。

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