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.1987年4月21日;26(8):2315-25.
doi:10.1021/bi00382a037。

新合成组蛋白的沉积:新组蛋白H2A和H2B与新组蛋白H3和H4不沉积在同一核小体中

新合成组蛋白的沉积:新组蛋白H2A和H2B与新组蛋白H3和H4不沉积在同一核小体中

V杰克逊. 生物化学. .

摘要

我们已经开发了程序来研究组蛋白在复制细胞中沉积期间的组蛋白-甾体相互作用。用致密氨基酸标记细胞60分钟,随后核小体内的组蛋白与甲醛交联成八聚体复合物。这些配合物在密度梯度中沉淀到平衡,并通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离出八聚体和二聚体配合物。随着交联的逆转,确定了单个密度标记组蛋白在八聚体中的分布。新合成的H3和H4沉淀为四聚体,与旧H2A和H2B相关。新合成的H2A和H2B沉积物是与旧H2A、H2B、H3和H4相关的二聚体。讨论了这些结果对细胞核内组蛋白相互作用动力学的意义。控制实验用于测试制备过程中这些复合物的人为形成。此外,还进行了重组实验,以证明这些八聚物的组成可以通过其在密度梯度上的分布来确定。

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