Involvement of Ubiquitin-Editing Protein A20 in Modulating Inflammation in Rat Cochlea Associated with Silver Nanoparticle-Induced CD68 Upregulation and TLR4 Activation

doi:10.1186/s11671-016-1430-9

.2016年12月；11(1):240.

doi:10.1186/s11671-016-1430-9。 Epub 2016年5月4日。

泛素编辑蛋白A20参与银纳米粒子诱导的CD68上调和TLR4激活对大鼠耳蜗炎症的调控

郝峰¹, 伊尔马里·派克¹, 邹静^2 3

附属公司

¹芬兰坦佩雷，Medisininankatu 3，33520，坦佩雷大学医学院，耳鼻喉科，听力和平衡研究室。
²芬兰坦佩雷市Medisiinarinkatu 33520坦佩雷大学医学院耳鼻喉科听力与平衡研究室。Jing.Zou@staff.uta.fi。
³中国人民解放军耳鼻喉头颈外科中心耳鼻喉头颈部外科，第二军医大学长海医院，中国上海。Jing.Zou@staff.uta.fi。

PMID： 27142878
预防性维修识别码：项目经理4854861
内政部： 10.1186/s11671-016-1430-9

泛素编辑蛋白A20参与银纳米粒子诱导的CD68上调和TLR4激活对大鼠耳蜗炎症的调控

郝峰等。纳米级Res Lett. 2016年12月.

.2016年12月；11(1):240.

doi:10.1186/s11671-016-1430-9。 Epub 2016年5月4日。

作者

郝峰¹, 伊尔马里·派克¹, 邹静^2 3

附属公司

¹芬兰坦佩雷，Medisininankatu 3，33520，坦佩雷大学医学院，耳鼻喉科，听力和平衡研究室。
²芬兰坦佩雷市Medisiinarinkatu 33520坦佩雷大学医学院耳鼻喉科听力与平衡研究室。Jing.Zou@staff.uta.fi。
³中国人民解放军耳鼻喉头颈外科中心耳鼻喉头颈部外科，第二军医大学长海医院，中国上海。Jing.Zou@staff.uta.fi。

PMID： 27142878
预防性维修识别码：项目经理4854861
内政部： 10.1186/s11671-016-1430-9

摘要

银纳米颗粒（AgNPs）被证明会暂时损害外耳道、中耳粘膜和内耳皮肤中的生物屏障，在输送到中耳后导致部分可逆的听力损失。目前的研究旨在阐明分子机制，强调TLR信号通路与耳蜗中巨噬细胞的潜在招募以及泛素编辑蛋白A20对炎症的调节相关。通过鼓室内注射不同浓度的AgNPs，用免疫组织化学方法对大鼠耳蜗中可能参与这些信号通路的分子进行了彻底分析。结果表明，0.4%AgNPs而非0.02%AgNP上调了Corti器官纹基底细胞、螺旋韧带纤维细胞和非感觉支持细胞中CD68、TLR4、MCP1、A20和RNF11的表达。0.4%AgNPs对CD44、TLR2、MCP2、Rac1、肌球蛋白轻链、VCAM1、Erk1/2、JNK、p38、IL-1β、TNF-α、TNFR1、TNFR2、IL-10或TGF-β无影响。本研究表明，AgNPs可能通过上调CD68增强Corti器官非感觉支持细胞的免疫活性，从而赋予纹状基底细胞和螺旋韧带纤维细胞巨噬细胞样功能，可能参与TLR4的激活。A20和RNF11通过负调节炎性细胞因子的表达，在维持耳蜗稳态中发挥作用。

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数字

图1
CD68型⁺通过免疫荧光共聚焦显微镜或免疫组织化学显示鼓内注射0.4%AgNPs后7天大鼠耳蜗中的细胞。暴露于dH的耳蜗中₂O、 Corti器官（CO）的内毛细胞（IHC）和柱细胞（PC）呈中度染色，而外毛细胞（OHC）和Deiters细胞（DC）呈极弱染色(小时). 纹状基底细胞（SBCs）、螺旋韧带纤维细胞（SLFs）和螺旋神经节细胞（SGCs）呈轻度染色(d日,**（f）**). 在暴露于0.4%AgNPs的耳蜗中，SBC和SLF（主要是III型）在第一轮(一)以及CO的IHC和PC(克)显示出更强烈的染色。稀疏分支细胞(**c（c）**)和单核细胞(我)螺旋韧带和蜗轴分别用CD68染色。然而，第二轮和第三轮的SBC和SLF(b条,**c（c）**)、SGC(**e（电子）**)毛细血管内皮细胞(**e（电子）**)、OHC和DC(克)没有显示任何更改。染色强度的比较如所示j个和k个.比例尺 = 30μm英寸一–**（f）**，20μm英寸克,小时，以及中的放大图像我和80μm英寸我

图2
TLR4级⁺通过免疫荧光共聚焦显微镜或免疫组织化学显示鼓内注射0.4%AgNPs后7天大鼠耳蜗中的细胞。暴露于dH的耳蜗中₂O、纹基底细胞（SBC）和螺旋韧带纤维细胞（SLF）呈轻度染色(d日)而Corti器官（CO）的螺旋神经节细胞（SGCs）、毛细胞（HCs）、柱细胞（PC）和Deiters细胞（DC）的染色极弱(**（f）**,小时). 在暴露于0.4%AgNPs的耳蜗中，SBC和SLF表现出更强烈的染色，这与耳蜗转向无关(一–**c（c）**). 在CO中，内毛细胞（IHC）、PC和DC显示出更强烈的染色，但外毛细胞（OHC）没有(克). 然而，SGC没有显示任何变化(**e（电子）**). 染色强度的比较如所示我和j个.比例尺 = 30微米

图3
MCP1（MCP1）⁺通过免疫荧光共聚焦显微镜或免疫组织化学显示鼓内注射0.4%AgNPs后7天大鼠耳蜗中的细胞。暴露于dH的耳蜗中₂O、 Corti器官（CO）的Deiters细胞（DC）呈强染色，而内毛细胞（IHC）和内柱细胞（IPC）呈中等染色(小时). CO的纹状中间细胞（SIMC）、纹状基底细胞（SBC）、螺旋神经节细胞（SGC）、外毛细胞（OHC）和外柱细胞（OPC）呈轻度染色，而螺旋韧带纤维细胞（SLF）呈极弱染色(d日,**（f）**,小时). 在暴露于0.4%AgNPs的耳蜗中，SLF显示出更强烈的染色，这与耳蜗转向无关，而SIMC、SBC和毛细血管内皮细胞（CaEC）在第一转向时显示出更为强烈的染色(一–**c（c）**). 在CO中，IPC和DC表现出更强烈的染色，但毛细胞（HC）和OPC没有(克). 然而，SGC没有显示任何变化(**e（电子）**). 染色强度的比较如所示我和j个.比例尺 = 30微米

图4
A20型⁺和RNF11⁺通过免疫荧光共聚焦显微镜或免疫组织化学显示鼓内注射0.4%AgNPs后7天大鼠耳蜗中的细胞。暴露于dH的耳蜗中₂O、 Corti器官（CO）的螺旋神经节细胞（SGCs）、内毛细胞（IHCs）、柱细胞（PC）和Deiters细胞（DC）的A20染色增强(j个,n个)而纹状基底细胞（SBCs）、螺旋韧带纤维细胞（SLFs）和外毛细胞（OHCs）表现出轻微的A20染色(d日,n个). CO的SBCs、SGCs和内柱细胞（IPC）对RNF11表现出强烈染色，而SLF、毛细胞（HC）和外柱细胞（OPCs）对RNF11表现出轻度染色(小时,我,第页). DC对RNF11的染色极弱(第页). 在暴露于0.4%AgNPs的耳蜗中，SBC和SLF显示出更强烈的A20和RNF11染色，这与耳蜗转向无关(一–**c（c）**,**e（电子）**–克). 在CO中，OHC和DC对A20的染色更为强烈(米)OPC和DC对RNF11的染色更为强烈(o个). 然而，SGC和毛细血管内皮细胞（CaEC）的A20和RNF11染色没有任何变化(我,k个). 染色强度的比较如所示q个和第页.比例尺 = 50μm英寸一–小时，20μm英寸米,n个和30μm英寸我–我,o个,第页

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