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.2012:2012:245819.
doi:10.1155/2012/245819。 Epub 2012年8月7日。

组织蛋白酶D在大肠癌中的表达：从蛋白质组学发现到使用Western Blotting、免疫组织化学和组织芯片的验证

钱德拉·基拉纳 1, 史红军, 艾玛·莱恩, 凯莉·胡德, 罗斯·米勒, 彼得·贝思韦, 基廷, T威廉·乔丹, 马克海斯, 理查德·斯塔布斯
附属公司

组织蛋白酶D在大肠癌中的表达：从蛋白质组学发现到使用Western Blotting、免疫组织化学和组织芯片的验证

钱德拉·基拉纳等。 国际蛋白质组学杂志. 2012.

摘要

尽管近年来外科技术和治疗方法取得了进步，但结直肠癌（CRC）的生存率仍然令人失望，大约40-50%的新诊断患者最终死于转移性疾病。目前仅通过光学显微镜进行分期并不能充分预测预后，并且将受益于生物标记物的额外支持，以便对患者进行适当分层以进行辅助治疗。我们已经确定组织蛋白酶D在侵袭前区（IF）和肝转移（LM）的细胞中的表达显著高于主瘤体（MTB）的细胞。随后用免疫组织化学方法检测119例CRC患者组织芯片中组织蛋白酶D的表达。IF时肿瘤细胞的强表达与任何临床病理参数或患者生存率没有显著相关性。然而，组织蛋白酶D在MTB细胞中的表达在晚期CRC中高度升高，并与随后的远处转移和癌症特异性生存期缩短显著相关。我们还发现，肿瘤细胞周围的巨噬细胞对组织蛋白酶D染色强烈，但在IF和CRC患者MTB的巨噬细胞组织酶D与检查的临床病理参数之间没有发现显著相关性。

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数字

图1
图1
（a） 2D凝胶上的组织蛋白酶D在肿瘤主体（MTB）、IF区（IF）和肝转移（LM）样本上的斑点；（b） 通过cy5标记的LMD样品（红色）的2DE western印迹和使用Cy3标记抗体（绿色）（ECL-Plex）验证组织蛋白酶D的分布。
图2
图2
组织蛋白酶D在两个不同区域（主要肿瘤体）的表达验证。采用免疫组织化学（IHC）（DAB底物，棕色）对同一患者的原发性肿瘤和肝转移（LM）的浸润前沿（IF）区域进行检测。切片用苏木精（蓝色）复染（20倍物镜）。
图3
图3
组织芯片免疫组织化学强度评分的代表性CRC组织（DAB底物，棕色）。组织蛋白酶D（a）无表达或弱表达得分为1。（b） 组织蛋白酶D在肿瘤细胞中的中度表达得分为2，组织蛋白酶c的强表达得分为3。组织切片用苏木精（蓝色）复染（20倍物镜）。
图4
图4
CRC患者癌症特异性生存期（月）与主要肿瘤上皮组织蛋白酶D表达相关。
图5
图5
不同阶段CRC患者（TNM）的MTB（实心黑色）和IF（蓝色）肿瘤细胞中组织蛋白酶D表达的平均得分。
图6
图6
原发性大肠肿瘤的邻近切片染色组织蛋白酶D（a）（DAB底物，棕色）。CD68染色（b）证实组织蛋白酶D在基质组织细胞群中的强表达与巨噬细胞（DAB底物，棕色）有关。切片用苏木精（蓝色）（40倍物镜）复染。
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