A single immunization with soluble recombinant trimeric hemagglutinin protects chickens against highly pathogenic avian influenza virus H5N1

doi:10.1371/journal.pone.0010645

.2010年5月14日；5（5）：e10645。

doi:10.1371/journal.pone.0010645。

可溶性重组三聚血凝素单次免疫保护鸡抵抗高致病性禽流感病毒H5N1

Lisette A H M Cornelissen公司¹, 罗伯特·P·德·弗里斯, 埃尔斯·德波尔·路易斯, 阿兰·里格特, 彼得·J·M·罗蒂尔, Cornelis A M de Haan公司

附属公司

PMID： 20498717
预防性维修识别码：项目经理2871037
内政部： 10.1371/journal.pone.0010645

可溶性重组三聚血凝素单次免疫保护鸡抵抗高致病性禽流感病毒H5N1

Lisette A H M Cornelissen公司等人。公共科学图书馆一号. 2010.

.2010年5月14日；5（5）：e10645。

doi:10.1371/journal.pone.0010645。

作者

Lisette A H M Cornelissen公司¹, 罗伯特·P·德·弗里斯, 埃尔斯·德波尔·路易斯, 阿兰·里格特, 彼得·J·M·罗蒂尔, Cornelis A M de Haan公司

附属

¹荷兰莱利斯塔德瓦赫宁根大学中央兽医学院。

PMID： 20498717
预防性维修识别码：项目经理2871037
内政部： 10.1371/日志.pone.0010645

摘要

背景：高致病性禽流感病毒H5N1导致家禽多器官疾病和死亡，给家禽业造成重大经济损失。此外，它还对公众健康构成重大威胁，因为它可以直接从受感染的家禽传播给死亡率极高（60%）的人类。对高致病性禽流感H5N1的有效疫苗接种将保护商业家禽，从而通过降低鸟传人和人传人的可能性，提供一项重要的控制措施。

方法/主要发现：在本研究中，我们评估了哺乳动物细胞中产生的重组可溶性三聚亚型5血凝素（sH5（3））的疫苗潜力。分泌纯化的sH5（3）具有生物活性，其与配体的结合呈唾液酸依赖性。研究表明，在一次接种H5N1病毒后，它可以以剂量依赖的方式保护鸡免受致命的H5N1攻击。根据从气管和泄殖腔拭子中分离的RNA的定量RT-PCR测定，受保护动物并没有释放挑战性病毒。同样在小鼠中，接种sH5（3）疫苗可完全保护其免受HPAI H5N1的攻击。

结论/意义：我们的结果表明，sH5（3）构成了一种有吸引力的疫苗抗原，用于保护鸡和哺乳动物免受HPAI H5N1的感染。由于这些重组可溶性血凝素制剂可以以较高的产量和相对较短的交付周期生产，因此能够对流行性和潜在的大流行性流感病毒作出快速反应。

PubMed免责声明

利益冲突声明

竞争利益：作者P.J.M.R.和C.A.M.d.H.根据本研究报告的结果提交了专利申请。这并不会改变作者对所有PLoS ONE数据和材料共享政策的遵守程度。

数字

**图1。重组可溶性三聚体H5蛋白的表达、纯化和生物活性。**
（A）所用H5表达盒的示意图。H5外域编码序列（H5）在CMV启动子控制下，在框架中克隆，DNA序列编码信号肽（SP）、GCN4异亮氨酸拉链三聚基序（GCN4）和Strep-tag II（ST）。（B）通过SDS-PAGE和western blotting分析H5在培养基中的表达和分泌情况。用小鼠抗链球菌标签抗体检测重组蛋白。（C）凝胶过滤法分析纯化的重组H5蛋白。所示为使用Superdex200GL 10–300色谱柱的H5蛋白制剂的洗脱曲线。232 kDa过氧化氢酶对照的洗脱由线条指示。（D）重组H5蛋白的蓝色天然-PAGE分析。在电泳前加热HA样品后观察到的单体、二聚体和三聚体外结构域物种在凝胶中的位置。（E）在将重组可溶性H5三聚体应用于胎球蛋白结合分析之前，将其与针对Strep-tag的HRP偶联小鼠抗体复合。在用VCNA（胎球蛋白+VCNA）治疗胎球蛋白后，也评估HA结合。

**图2。sH5型^三鸡接种疫苗。**
10只鸡用10ug sH5免疫两次^三（第0天和第21天）。作为挑战对照，对鸡进行模拟处理（PBS）。接种疫苗三周后，所有鸟类都受到10只⁵TCID公司₅₀HPAI H5N1 A/越南/1194/04（A）Kaplan-Meier生存曲线，表明各组（B–C–D）每天的死亡率百分比。首次免疫后3周采集血样（sH5^三1×）和第二次接种后3周（sH5^三2×). sH5^三ELISA（B）测定的抗体水平、H5N1的HI滴度（NIBRG-14）（C）和sH5的HI效价^三（D）每只鸟的血清中。条形图表示每组的几何平均值。虚线表示本实验中与保护相关的最低抗体水平。

**图3。sH5型^三鸡单次或强化接种后的剂量滴定。**
用10、2或0.4µg sH5免疫7组10只鸡^三一次或两次，间隔3周。作为激发对照，一组进行模拟治疗（PBS）。接种疫苗四周后，所有鸡都受到10只⁵TCID公司₅₀HPAI H5N1 A/越南/1194/04。Kaplan-Meier生存曲线，表示接种两次（A）或一次（B）（模拟）疫苗的各组每天的死亡率百分比。（C–D）sH5^三通过ELISA测定每只接种两次（C）或一次（D）模拟疫苗的鸡在激发当天的抗体水平。（E–F）同一血清中的血清HI滴度，对照sH5测定^三（模拟）接种两次（E）或一次（F）疫苗的鸡。条形图表示测试组的几何平均值。

**图4。sH5型^三给小鼠接种疫苗。**
用2µg sH5对10只BALB/c小鼠进行腹腔免疫^三一次（第21天）或两次，每次间隔3周（第0天和第21天）。作为挑战对照，一组小鼠被模拟处理（PBS）两次（第0天和第21天）。接种疫苗三周后，小鼠感染了～10 LD₅₀并在接下来的14天内每天监测临床症状和体重。（A） Kaplan-Meier生存曲线，显示各组每天的死亡率百分比。（B）每组临床评分中位数。（C）各组的平均体重表示为起始体重的百分比，绘制为时间的函数。误差条表示标准偏差。（D–E）在激发当天采集血样。sH5型^三ELISA（D）测定的抗体水平。针对sH5的HI滴度^三（E） ●●●●。条形代表几何平均值。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

表达可溶性三聚血凝素的新城疫病毒对鸡和小鼠高致病性H5N1流感的保护作用。
Cornelissen LA、de Leeuw OS、Tacken MG、Klos HC、de Vries RP、de Boer-Luijtze EA、van Zoelen-Bos DJ、Rigter A、Rottier PJ、Moormann RJ、de Haan CA。 Cornelissen LA等人。公共科学图书馆一号。2012;7（8）：e44447。doi:10.1371/journal.pone.0044447。Epub 2012年8月28日。公共科学图书馆一号。2012 PMID：22952980 免费PMC文章。
用细菌产生的新型血凝素蛋白进行初级疫苗接种可在商业鸡中诱导对H5亚型流感病毒的中和抗体反应。
Sączynska V、Romanik-Chru sh cielewska A、Florys K、Cecuda-Adamczewska V、Łukasiewicz N、Sokołowska I、Kęsik-Brodacka M、P \322»ucienczak G。 Sączynska V等人。前免疫。2019年9月4日；10:2006. doi:10.3389/fimmu.2019.02006。2019年eCollection。前免疫。2019 PMID：31552018 免费PMC文章。
含灭活新城疫病毒和重配高致病性H5N1禽流感病毒的双价疫苗单剂量对鸡致命性HPAI和NDV感染的效力。
Lee DH、Park JK、Kwon JH、Yuk SS、Erdene-Ochir TO、Jang YH、Seong BL、Lee JB、Park SY、Choi IS、Song CS。 Lee DH等人。公共科学图书馆一号。2013;8（3）：e58186。doi:10.1371/journal.pone.0058186。Epub 2013年3月1日。公共科学图书馆一号。2013 PMID：23469269 免费PMC文章。
新城疫病毒载体禽流感疫苗的创新。
Kim SH、Samal SK。 Kim SH等人。病毒。2019年3月26日；11(3):300. doi:10.3390/v11030300。病毒。2019 PMID：30917500 免费PMC文章。审查。
开发H5N1亚型流感疫苗的新策略：进展和挑战。
钢J。钢J。生物药物。2011年10月1日；25(5):285-98. doi:10.1007/BF03256169。生物药物。2011 PMID：21942913 审查。

查看所有类似文章

引用人

植物疫苗表达和纯化策略的最新进展。
Venkataraman S、Khan I、Habibi P、Le M、Lippert R、Hefferon K。 Venkataraman S等人。前植物科学。2023年11月23日；14:1273958. doi:10.3389/fpls.2023.1273958。eCollection 2023年。前植物科学。2023 PMID：38078091 免费PMC文章。审查。
三聚体线圈基序以微粒体亲和力结合细菌脂多糖。
Hatlem D、Christensen M、Broeker NK、Kristiansen PE、Lund R、Barbirz S、Linke D。 Hatlem D等人。前细胞感染微生物。2023年2月16日；13:1125482. doi:10.3389/fcimb2023.1125482。eCollection 2023年。前细胞感染微生物。2023 PMID：36875521 免费PMC文章。
SARS-CoV-2的三体受体结合域是ACE2受体介导的病毒进入的有效抑制剂。
Basavarajappa SC、Liu AR、Bruchez A、Li Z、Suzart VG、Liu Z、Chen Y、Xiao TS、Buck M、Ramakrishnan P。 Basavarajappa SC等人。 iScience。2022年8月19日；25(8):104716. doi:10.1016/j.isci.2022.104716。Epub 2022年7月4日。 iScience。2022 PMID：35813876 免费PMC文章。
病毒样颗粒中的神经氨酸酶有助于防止高剂量禽流感病毒挑战感染。
Kang HJ、Chu KB、Yoon KW、Eom GD、Mao J、Kim MJ、Lee SH、Moon EK、Quan FS。 Kang HJ等。病原体。2021年10月7日；10(10):1291. doi:10.3390/pathines1011291。病原体。2021 PMID：34684240 免费PMC文章。
乳酸乳球菌表面的血凝素对鸡体内不同的H5N1病毒具有广泛的交叉保护作用。
雷H，高T，岑Q，彭X。 Lei H等人。 Microb细胞事实。2020年10月15日；19(1):193. doi:10.1186/s12934-020-01453-7。 Microb细胞事实。2020 PMID：33059676 免费PMC文章。

查看所有“被引用”文章

工具书类

1. Webster RG、Bean WJ、Gorman OT、Chambers TM、Kawaoka Y.甲型流感病毒的进化与生态学。《微生物评论》1992；56:152–179。-项目管理咨询公司-公共医学
1. Munster VJ，Fouchier RA。禽流感病毒：病毒与鸟类生态学。疫苗。2009;27:6340–6344。-公共医学
1. Uyeki TM。人类感染高致病性禽流感A（H5N1）病毒的全球流行病学。呼吸学。2008;13（补充1）：S2–9。-公共医学
1. Yen HL，韦伯斯特RG。流感大流行是当前的威胁。当前顶级微生物免疫学。2009;333:3–24.-公共医学
1. Ellebedy AH，Webby RJ。流感疫苗。疫苗。2009;27（补充4）:D65–68。-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型

行动

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

物质

行动
行动
行动
行动

LinkOut-更多资源

[1] Webster RG、Bean WJ、Gorman OT、Chambers TM、Kawaoka Y.甲型流感病毒的进化与生态学。《微生物评论》1992；56:152–179。-项目管理咨询公司-公共医学

[2] Webster RG、Bean WJ、Gorman OT、Chambers TM、Kawaoka Y.甲型流感病毒的进化与生态学。《微生物评论》1992；56:152–179。-项目管理咨询公司-公共医学

[3] Munster VJ，Fouchier RA。禽流感病毒：病毒与鸟类生态学。疫苗。2009;27:6340–6344。-公共医学

[4] Munster VJ，Fouchier RA。禽流感病毒：病毒与鸟类生态学。疫苗。2009;27:6340–6344。-公共医学

[5] Uyeki TM。人类感染高致病性禽流感A（H5N1）病毒的全球流行病学。呼吸学。2008;13（补充1）：S2–9。-公共医学

[6] Uyeki TM。人类感染高致病性禽流感A（H5N1）病毒的全球流行病学。呼吸学。2008;13（补充1）：S2–9。-公共医学

[7] Yen HL，韦伯斯特RG。流感大流行是当前的威胁。当前顶级微生物免疫学。2009;333:3–24.-公共医学

[8] Yen HL，韦伯斯特RG。流感大流行是当前的威胁。当前顶级微生物免疫学。2009;333:3–24.-公共医学

[9] Ellebedy AH，Webby RJ。流感疫苗。疫苗。2009;27（补充4）:D65–68。-项目管理咨询公司-公共医学

[10] Ellebedy AH，Webby RJ。流感疫苗。疫苗。2009;27（补充4）:D65–68。-项目管理咨询公司-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

可溶性重组三聚血凝素单次免疫保护鸡抵抗高致病性禽流感病毒H5N1

附属

可溶性重组三聚血凝素单次免疫保护鸡抵抗高致病性禽流感病毒H5N1

作者

附属

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

医疗

研究材料

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

相关信息

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

医疗

研究材料