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.2010年4月13日；102(8):1276-83.
doi:10.1038/sj.bjc.6605626。 Epub 2010年3月30日。

卵巢癌干细胞样副细胞具有致瘤性和抗化疗性

L Hu先生 1, C麦克阿瑟, R B杰菲
附属公司

卵巢癌干细胞样副细胞具有致瘤性和抗化疗性

L Hu先生等。 英国癌症杂志. .

摘要

背景：卵巢癌是最致命的妇科恶性肿瘤。尽管卵巢癌患者最初对化疗有反应，但他们通常会产生化疗耐药性。我们假设，一小部分卵巢癌细胞具有干细胞特性，有助于肿瘤发生和耐药性。

方法：流式细胞术和Hoechst 33342流出法从卵巢癌患者腹水和接种人卵巢癌细胞系的小鼠腹水中分离出副群（SP）细胞。通过免疫细胞化学和RT-PCR检测SP细胞的干细胞标记物OCT4、NANOG、STELLAR和ABCG2/BCRP1。在体内外研究SP细胞和非SP细胞的肿瘤发生和化疗耐药性。

结果：免疫细胞化学和RT-PCR检测到SP细胞表达ABCG2/BCRP1、OCT4、STELLAR和NANOG。SP细胞中ABCG2/BCRP1的表达高于非SP细胞。接种SP细胞的异种小鼠比接种非SP细胞的小鼠产生更多的肿瘤。同时，SP细胞培养导致广泛的细胞增殖，这明显高于非SP细胞。在体内和体外，SP细胞与非SP细胞相比具有抗化疗的能力。

结论：卵巢癌SP细胞具有致瘤性和化疗耐药性。ABCG2/BCRP1在化疗耐药中起着重要作用，这对新的治疗方法具有指导意义。

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数字

图1
图1
(一个)流式细胞术检测小鼠腹水中人OVCAR3卵巢癌细胞的侧群（SP）。盒装电池（标记为R4）表示Hoechst-不包括SP(B类)流式细胞术检测患者腹水来源卵巢癌细胞的SP。盒装电池（标记为P3）表示Hoechst-不包括SP。增加50 μM（M）维拉帕米导致SP显著降低一个和B类.
图2
图2
(A–D)用OCT4和Hoechst染料33342对荷人卵巢癌细胞的小鼠腹水细胞进行染色。(E–H（E–H）)用ABCG2/BCRP1和Hoechst染料33342对来自携带人卵巢癌细胞的小鼠腹水的细胞进行共培养。(A、 E）亮场；(B、 F类)Hoechst-染料吸收（蓝色）；(C)OCT4（青铜）；(G公司)ABCG2/BCRP1（青铜）；(D类)合并的图像B类和C; 和(H（H）)合并图像F类和G公司箭头指示对OCT4或ABCG2和Hoechst dim具有免疫反应性的细胞。条形=10 μ米(I–L型)ABCG2/BCRP1（红色荧光）和NANOG（绿色荧光）在来自小鼠腹水的人类卵巢癌细胞（OVCAR3）的副群中的免疫定位。(我)ABCG2/BCRP1；(J型)亮场；(K（K）)NANOG；(L（左）)合并我和J型.Bar=10 μ米(M（M）–P（P）)携带人类卵巢癌细胞的小鼠肿瘤组织中ABCG2/BCRP1（红色荧光）和NANOG（绿色荧光）的免疫定位。(M（M）)ABCG2/BCRP1；(N个)亮场；(O（运行）)NANOG；和(P（P）)合并M（M）和O（运行）箭头表示对OCT4或ABCG2呈免疫反应的细胞。条形=10 μ米(问–X（X）)SP（标准普尔）与非SP细胞凋亡在体外.SP的凋亡(问–T型)与非SP细胞(U型–X（X）)顺铂和/或维拉帕米治疗48小时后在体外. (问,U型)控制；(R（右）,V（V）)顺铂；(S公司,W公司)维拉帕米；和(T型,W公司)顺铂加维拉帕米。棕色细胞核表示凋亡细胞。比例尺=10 μm.注意SP细胞对顺铂有耐药性(R（右）)但维拉帕米可以逆转这种阻力(T型).
图3
图3
(一个)人类卵巢癌（OVCAR3）和人类胚胎干细胞（hESCs）小鼠腹水中ABCG2和STELLAR的RT–PCR分析。(B类)人卵巢癌细胞（OVCAR3）非SP和SP中ABCG2的RT-PCR分析。(C)人卵巢癌细胞（hOCC）非SP细胞和SP细胞中ABCG2的RT-PCR分析。
图4
图4
非SP细胞(一个)与SP细胞(B类)卵巢癌患者腹水培养5天。非SP细胞(C)和SP细胞(D类)将来自患者腹水的人卵巢癌细胞（500个细胞）移植到两个小鼠的肾胶囊下8周。非SP细胞(E类)和SP细胞(F类)将来自小鼠模型腹水的OVCAR3细胞（500个细胞）移植到两个小鼠的肾包膜下8周。非SP细胞(G公司，三只小鼠）和SP细胞(H（H）将来自A2780-CP（顺铂耐药）细胞的三只小鼠腹腔注射到六只小鼠（20 每只小鼠1000个细胞），持续8周。条形=10 μ米。
图5
图5
顺铂对SP腹腔注射小鼠肿瘤负荷的影响与从A2780-CP细胞分离的非SP。接种后8周开始治疗。治疗组包括对照组（溶媒）和单用顺铂。实验结束时（治疗3周），将小鼠处死。尸检时，肿瘤被切除并称重。SP-Con（对照）=未经治疗的旁观者；SP-CP=接受顺铂治疗的副作用人群；NSP-Con=未经治疗的非住院人群（对照组）；NSP-CP=接受顺铂治疗的非住院人群；*P（P）<0.05与NSP-CP；**P（P）<0.01与SP-CON.数据表示为平均值（bar±s.d.）。
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