CCR2 promotes hepatic fibrosis in mice

doi:10.1002/hep.22952

.2009年7月；50(1):185-97.

doi:10.1002/hep.22952。

CCR2促进小鼠肝纤维化

濑木英弘¹, 萨缪尔·德米尼奇, 野口佳彦（Sayaka Inokuchi）, Kojiro Taura公司, 宫井胜美, 尼科·范·罗伊扬, 罗伯特·施瓦布, 大卫·A·布伦纳

附属公司

PMID： 19441102
预防性维修识别码： PMC2705470型
内政部： 10.1002/hep.22952

CCR2促进小鼠肝纤维化

Ekihiro Seki先生等。肝病学. 2009年7月.

.2009年7月；50(1):185-97.

doi:10.1002/hep.22952。

作者

Ekihiro Seki先生¹, 萨缪尔·德米尼奇, 野口佳彦（Sayaka Inokuchi）, Kojiro Taura公司, 宫井胜美, 尼科·范·罗伊扬, 罗伯特·施瓦布, 大卫·A·布伦纳

附属

¹加利福尼亚大学圣地亚哥分校医学院医学系，美国加利福尼亚州拉霍亚92093-0702。ekseki@ucsd.edu

PMID： 19441102
预防性维修识别码： PMC2705470型
内政部： 10.1002/hep.22952

摘要

趋化因子和趋化因子受体有助于肝星状细胞（HSCs）和枯否细胞（Kupffer cells）的迁移，这两种细胞是纤维化发生的关键类型。在此，我们研究了单核细胞趋化蛋白（MCP）-1、MCP-2和MCP-3受体CCR2在肝纤维化中的作用。胆管结扎（BDL）后，肝脏CCR2、MCP-1、MCP-2和MCP-3信使RNA表达增加。Kupffer细胞和HSC都表达CCR2，但肝细胞不表达CCR2。通过胶原蛋白沉积、α-平滑肌肌动蛋白表达和肝羟脯氨酸含量评估，BDL-和CCl（4）诱导的CCR2（-/-）小鼠纤维化明显减轻。我们通过氯膦酸盐、辐射和骨髓（BM）移植的组合产生了CCR2嵌合小鼠，使库普弗细胞（而不是HSC）与BM细胞完全重建。含有野生型BM的嵌合小鼠显示巨噬细胞募集增加，而含有CCR2（-/-）BM的嵌合小鼠在BDL后5天显示巨噬细胞募集减少。尽管骨髓中表达的CCR2增强了损伤早期巨噬细胞的募集，但慢性纤维化模型中的纤维化反应需要在包括HSC在内的常驻肝细胞上表达CCR2，而不是骨髓上。体外实验表明，CCR2（-/-）或其下游介体p47phox（-/--）缺陷的HSC对MCP-1、MCP-2和MCP-3没有表现出细胞外信号调节激酶和AKT磷酸化、趋化性或活性氧生成。

结论：我们的结果表明，CCR2促进HSC趋化和肝纤维化的发展。

PubMed免责声明

数字

**图1。肝纤维化中CCR2和CCR2配体的表达增加**
在BDL（n=6）或12次重复CCl后对小鼠的肝脏进行分析₄在指定的时间点进行治疗（n=6）。**（A、B）**在BDL后测量CCR2、MCP-1、MCP-2和MCP-3的肝脏mRNA水平**（A）**或CCl₄治疗**（B）**通过qPCR。**（中-英）**CCR2表达（绿色）通过与结蛋白（红色，C类)，F4/80（红色，D类)和泛细胞角蛋白（红色，E类)共聚焦显微镜观察。箭头表示CCR2-阳性细胞和结蛋白-（C）或F4/80阳性细胞（D）。虚线表示肝内胆管（E）。**（F）**采用RT-PCR方法检测枯否细胞、HSC和肝细胞CCR2 mRNA的表达。β-actin mRNA起到了内部控制作用。

**图2。CCR2中肝纤维化的减少^-/-BDL后的小鼠**
重量（n=6）和CCR2^-/-（n=6）只小鼠接受BDL。**（A）**在BDL后21天，通过天狼星红染色和定量评估纤维性胶原沉积。**（B）**测定肝脏羟脯氨酸含量。**（C、D）**免疫组织化学（C）和免疫印迹（D）检测α-SMA的表达。**（E）**在WT（n=5）和CCR2中测量肝脏α1（I）、α-SMA、TGFβ1和TIMP-1的mRNA水平^-/-（n=5）BDL后5天，通过qPCR。*胆管结扎CCR2组p＜0.05^-/-小鼠与胆管结扎的WT小鼠。原始放大倍数为×100（A，C）。

**图3。CCR2减轻肝脏炎症和巨噬细胞浸润^-/-BDL后的小鼠**
**（A、B）**肝脏TNFα、MCP-1、RANTES、MIP-1β、IL-1β和IL-6 mRNA水平**（A）**和CD68（B）以WT（n=5）和CCR2进行测量^-/-qPCR检测BDL后5天（n=5）。**（C）**BDL后21天用免疫组织化学方法检测F4/80的巨噬细胞浸润。**（D）**用免疫组织化学方法检测4-羟基壬醛。**（E）**测定BDL后5或21天的血清ALT、ALP和T-Bil水平。*胆道结扎CCR2 p<0.05^-/-小鼠与胆管结扎的WT小鼠。原始放大倍数为×200（C，D）。

**图4。CCR2缺乏抑制CCl后肝纤维化₄治疗**
重量（n=6）和CCR2^-/-（n=6）小鼠注射了12次CCl₄（0.5微升/克）。**（A、B）**12次注射CCl后，通过天狼星红染色（A）和定量（B）评估纤维胶原沉积₄.（C）测定肝脏羟脯氨酸含量。**（D、E）**免疫组织化学法检测α-SMA的表达**（D）**和western印迹**（E）**.（F）注射CCl 12次后血清ALT水平₄已测量。*：CCl组p<0.05₄-经处理的CCR2^-/-小鼠与CCl₄-治疗WT小鼠。原始放大倍数为×100（A，D）。

**图5。BDL后早期巨噬细胞浸润需要骨髓源性细胞上的CCR2**
通过移植WT或CCR2产生嵌合小鼠^-/-BM注入辐照和氯膦酸盐处理的WT小鼠或CCR2^-/-小鼠（每组4-5只）。然后将嵌合小鼠接种BDL 5天。**（A）**WT小鼠脾细胞中CCR2 mRNA水平较低，而CCR2中CCR2的mRNA水平正常，证实了BMT的成功^-/-移植WT-BM的小鼠。**（B）**用qPCR检测嵌合小鼠肝脏促炎细胞因子（TNF-α、MCP-1、RANTES和MIP-1β）mRNA水平。**（C、D）**用免疫组织化学方法检测F4/80的巨噬细胞浸润**（C）**和CD68的qPCR（D）.（E）测定BDL后5天嵌合体小鼠的血清ALT水平。原始放大倍数为×200（C）.*p<0.05，**p<0.01。

**图6。BDL后受体源性细胞（而非骨髓源性细胞）介导CCR2依赖性纤维生成效应**
**（A-F）**通过移植CCR2产生嵌合小鼠^-/-BM注入辐照和氯膦酸盐处理的WT小鼠（n=6）或CCR2^-/-小鼠（n=6）和*反之亦然*（每组6人）。BMT后3个月，对小鼠进行BDL，在BDL后21天判断肝纤维化。**（A-B）**天狼星红染色评估嵌合体小鼠的肝纤维化**（A，左），**定量**（A，右）**和羟脯氨酸测量**（B）**.（C）免疫组化显示α-SMA表达**（C，上部）**和western印迹**（C，下部）。（D）**用免疫组织化学方法检测F4/80的巨噬细胞浸润。**（E）**用免疫组织化学方法检测4-羟基壬烯酸的积累。**（F）**测定BDL后21天嵌合体小鼠的血清ALT水平。原始放大倍数为×100（A、C）和×200（D、E）.*p＜0.05，**p＜0.01。

**图7。受体细胞上的CCR2对CCl至关重要₄-诱导性肝纤维化**
**（A-F）**通过移植CCR2产生嵌合小鼠^-/-BM注入辐照和氯膦酸盐处理的WT小鼠（n=5）或CCR2^-/-小鼠（n=5）和*反之亦然*（每组5人）。CCl 12注射液诱导肝纤维化₄.（A、B）天狼星红染色评估嵌合小鼠的肝纤维化**（A）**，定量**（B），**羟脯氨酸含量的测定**（C）**.（D、E）免疫组织化学法检测α-SMA的表达**（D）**和western印迹**（E）**.（F）嵌合小鼠12次注射CCl后血清ALT水平₄测量BDL后。原始放大倍数为×100（A、D）.*p<0.05，**p<0.01。

**图8。CCR2依赖性NADPH氧化酶依赖性ROS的产生和HSC对MCP-1、MCP-2和MCP-3的趋化性**
**（A-F）**与WT、CCR2隔离的HSC^-/-和p47phox^-/-用MCP-1、MCP-2和MCP-3刺激小鼠。**（A）**在WT和CCR2中测定磷酸化AKT（Ser473上）、总AKT、磷酸化ERK和总ERK^-/-免疫印迹法检测HSC。**（B）**将含有MCP-1、MCP-2或MCP-3（50ng/ml）的无血清培养基置于下室。与WT或CCR2隔离的HSC^-/-小鼠被放在上面的房间里。刺激24小时后统计HSC向下腔的迁移。**（C）**在WT或CCR2中检测胶原α1（I）、αSMA、TIMP-1、IL-6和PCNA的mRNA表达^-/-qPCR刺激24小时后HSC。**（D）**来自WT、CCR2的小鼠HSC^-/-和p47phox^-/-小鼠被DCFDA（8μM）负载20分钟，并与MCP-1、MCP-2和MCP-3（100ng/ml）孵育，测量荧光强度30分钟。**（E）**在WT和p47phox中测定磷酸化AKT（Ser473上）、总AKT、磷酸化ERK和ERK2^-/-免疫印迹法检测HSC。**（F）**将含有MCP-1、MCP-2或MCP-3（50ng/ml）的无血清培养基置于下室。从WT或p47phox分离的HSC^-/-将小鼠置于上腔，进行或不进行DPI（10μM）预处理30分钟。刺激24小时后统计HSC向下腔的迁移。*：p＜0.05。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

鞘氨醇激酶1通过阻止miR-19b-3p介导的CCR2抑制来促进肝纤维化。
Lan T、Li C、Yang G、Sun Y、Zhung L、Ou Y、Li H、Wang G、Kisseleva T、Brenner D、Guo J。 Lan T等人。肝病学。2018年9月；68(3):1070-1086. doi:10.1002/ep.29885。Epub 2018年4月27日。肝病学。2018 PMID：29572892 免费PMC文章。
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶在肝纤维化中的作用和细胞来源。
De Minicis S、Seki E、Paik YH、Osterreicher CH、Kodama Y、Kluwe J、Torozzi L、Miyai K、Benedetti A、Schwabe RF、Brenner DA。 De Minicis S等人。肝病学。2010年10月；52(4):1420-30. doi:10.1002/hep.23804。肝病学。2010 PMID：20690191 免费PMC文章。
蛋白酪氨酸磷酸酶1b缺乏通过调节nadph氧化酶防止肝纤维化。
加西亚·鲁伊斯一世、布兰斯·鲁伊斯N、拉达P、帕尔多五世、鲁伊斯L、布拉斯·加西亚a、瓦尔德坎托斯议员、格劳·桑兹M、索利斯·赫鲁佐JA、瓦尔维德·a·M。 García-Ruiz I等人。氧化还原生物。2019年9月；26:101263. doi:10.1016/j.redox.2019.101263。Epub 2019年6月29日。氧化还原生物。2019 PMID：31299613 免费PMC文章。
巨噬细胞的肝脏募集通过CCR2促进非酒精性脂肪性肝炎。
Miura K、Yang L、van Rooijen N、Ohnishi H、Seki E。 Miura K等人。美国生理学杂志胃肠病学肝病生理学。2012年6月1日；302（11）：G1310-21。doi:10.1152/ajpgi.00365.2011。Epub 2012年3月22日。美国生理学杂志胃肠病学肝病生理学。2012. PMID：22442158 免费PMC文章。
常驻和非常驻巨噬细胞在心脏纤维化中的不同作用。
胡S，杨M，黄S，钟S，张Q，丁H，熊X，胡Z，杨Y。胡S等。《Front Cardiovasc Med.2022年3月7日》；9:818188. doi:10.3389/fcvm.2022.818188。eCollection 2022年。《Front Cardiovasc Med.2022》。 PMID：35330948 免费PMC文章。审查。

查看所有类似文章

引用人

处于胆汁淤积性肝损伤十字路口的线粒体：针对新的治疗途径。
李X、阮T、王S、孙X、刘C、彭毅、陶毅。李X等。临床转肝素杂志。2024年9月28日；12(9):792-801. doi:10.14218/JCTH.2024.00087。Epub 2024年7月15日。临床转肝素杂志。2024 PMID：39280065 免费PMC文章。审查。
对用于肝脏保护研究的不同实验模型的见解：综述。
Babu S、Ranajit SK、Pattnaik G、Ghosh G、Rath G、Kar B。 Babu S等人。当前药物研发技术。2024;21（4）：e191223224660。doi:10.2174/0115701638278844231214115102。当前药物研发技术。2024 PMID：39206705 审查。
Cenicriviroc抑制肝内单核细胞募集和MMP1抑制细胞外基质降解可协同减轻体内肝脏炎症和纤维化。
Geervliet E、Karkdijk E、Bansal R。 Geervliet E等人。科学报告，2024年7月23日；14(1):16897. doi:10.1038/s41598-024-67926-6。科学报告2024。 PMID：39043893 免费PMC文章。
揭示铁凋亡在NAFLD向NASH进展中的作用：机制理解的最新进展。
于强，宋磊。 Yu Q等人。前内分泌（洛桑）。2024年7月4日；15:1431652. doi:10.3389/fendo.2024.1431652。eCollection 2024年。前内分泌（洛桑）。2024 PMID：39036052 免费PMC文章。审查。
通过细胞膜工程纳米粒靶向传递MerTK蛋白增强糖尿病ApoE的胞吐作用并减轻动脉粥样硬化^-/-老鼠。
邱S，刘J，陈J，李Y，步T，李Z，张L，孙W，周T，胡W，杨G，袁L，段Y，邢C。邱S等。纳米生物技术杂志。2024年4月13日；22(1):178. doi:10.1186/s12951-024-02463-y。纳米生物技术杂志。2024 PMID：38614985 免费PMC文章。

查看所有“引用者”文章

工具书类

1. Bataller R，Brenner DA。肝纤维化。临床投资杂志。2005;115:209–18.-项目管理咨询公司-公共医学
1. Friedman SL.肝纤维化的分子调控，组织损伤的综合细胞反应。生物化学杂志。2000;275:2247–50.-公共医学
1. Friedman SL.肝纤维化的机制。胃肠病学。2008;134:1655–69.-项目管理咨询公司-公共医学
1. Karin M，Greten FR.NF-kappaB：炎症和免疫与癌症发展和进展的联系。Nat Rev免疫学。2005;5:749–59.-公共医学
1. Friedman SL，Arthur MJ。Kupffer细胞条件培养基对培养的大鼠肝脏脂肪细胞的激活。通过诱导血小板衍生生长因子受体直接增强基质合成和刺激细胞增殖。临床投资杂志。1989;84:1780–5.-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型

行动
行动

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动

物质

行动
行动

赠款和资金

LinkOut-更多资源

[1] Bataller R，Brenner DA。肝纤维化。临床投资杂志。2005;115:209–18.-项目管理咨询公司-公共医学

[2] Bataller R，Brenner DA。肝纤维化。临床投资杂志。2005;115:209–18.-项目管理咨询公司-公共医学

[3] Friedman SL.肝纤维化的分子调控，组织损伤的综合细胞反应。生物化学杂志。2000;275:2247–50.-公共医学

[4] Friedman SL.肝纤维化的分子调控，组织损伤的综合细胞反应。生物化学杂志。2000;275:2247–50.-公共医学

[5] Friedman SL.肝纤维化的机制。胃肠病学。2008;134:1655–69.-项目管理咨询公司-公共医学

[6] Friedman SL.肝纤维化的机制。胃肠病学。2008;134:1655–69.-项目管理咨询公司-公共医学

[7] Karin M，Greten FR.NF-kappaB：炎症和免疫与癌症发展和进展的联系。Nat Rev免疫学。2005;5:749–59.-公共医学

[8] Karin M，Greten FR.NF-kappaB：炎症和免疫与癌症发展和进展的联系。Nat Rev免疫学。2005;5:749–59.-公共医学

[9] Friedman SL，Arthur MJ。Kupffer细胞条件培养基对培养的大鼠肝脏脂肪细胞的激活。通过诱导血小板衍生生长因子受体直接增强基质合成和刺激细胞增殖。临床投资杂志。1989;84:1780–5.-项目管理咨询公司-公共医学

[10] Friedman SL，Arthur MJ。Kupffer细胞条件培养基对培养的大鼠肝脏脂肪细胞的激活。通过诱导血小板衍生生长因子受体直接增强基质合成和刺激细胞增殖。临床投资杂志。1989;84:1780–5.-项目管理咨询公司-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

CCR2促进小鼠肝纤维化

附属

CCR2促进小鼠肝纤维化

作者

附属

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

医疗

其他

摘要

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

相关信息

赠款和资金

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

医疗

其他