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随机对照试验
。2008年1月15日；5（1）：e17。
doi:10.1371/journal.pmed.0050017。

聚集因子B在金黄色葡萄球菌鼻腔定植中的关键作用

海曼·F·L·韦特海姆 1, 伊芙琳·沃尔什, 鲁斯·乔德勒姆, 达米安·梅莱斯, Hélène A M Boelens女士, 海伦·米亚洛维奇, 亨利·A·维尔布鲁赫, 蒂莫西·福斯特, 亚历克斯·范·贝尔库姆
附属公司
随机对照试验

聚集因子B在金黄色葡萄球菌鼻腔定植中的关键作用

海曼·F·L·韦特海姆等。 公共科学图书馆医学。 。

摘要

背景：金黄色葡萄球菌在五分之一人口的鼻前庭永久定植，这是自身感染的危险因素。金黄色葡萄球菌侵染鼻子的确切机制尚不清楚。葡萄球菌细胞球蛋白聚集因子B（ClfB）在体外促进鳞状上皮细胞的粘附，可能是一种生理相关的定植因子。

方法和结果：我们通过人工接种人类志愿者野生型菌株及其单位点ClfB敲除突变株，确定了葡萄球菌细胞角蛋白结合蛋白ClfB在定植过程中的作用。野生型菌株以剂量依赖性的方式粘附于固定化重组人细胞角蛋白10（CK10），而ClfB（-）突变体没有粘附。当野生型菌株在不良生长培养基中生长到固定阶段时，与在营养丰富的环境中生长相同菌株相比，野生型菌株对CK10的粘附性更好。鼻腔培养显示，突变菌株从鼻腔中清除的速度明显快于野生型菌株，中位数为3+/-1d，而非7+/-4d（p=0.006）。此外，在随访结束时，3/16名志愿者的鼻孔中仍然存在野生型菌株，而突变菌株没有。

结论：人类定植模型结合体外数据表明，ClfB蛋白是鼻内持续携带金黄色葡萄球菌的主要决定因素，是非殖民化策略的候选靶分子。

PubMed免责声明

利益冲突声明

竞争利益：提交人声明，不存在相互竞争的利益。

数字

图1
图1。研究设计
首先，将左鼻孔或右鼻孔随机分为两组，分别接种8325-4株（WT）和DU5997株（突变株）。其次，对侧鼻孔随机接受自然发生（图中为“WT”）或突变株。
图2
图2。ClfB表达实验
（A） RPMI中的细菌生长和ClfB表达。菌株8325–4、DU5997和SH1000在RPMI中生长，并定期取样监测生长。（B） 在生长的早期指数期、早期稳定期和晚期稳定期采集的样本通过Western免疫印迹法进行分析。通道1、2和3分别在指数生长早期、稳定生长早期和稳定生长晚期显示菌株8325-4的ClfB表达。泳道4、5和6分别显示菌株DU5997在早期指数生长期、早期稳定生长期和晚期稳定生长期的ClfB表达。通道7、8和9分别在指数生长早期、稳定生长早期和稳定生长晚期显示SH1000中的ClfB表达。（C） TSB中的细菌生长和ClfB表达。菌株8325–4在TSB中生长，并定期取样以监测生长情况。（D） 采用免疫印迹法检测生长早期指数期、早期稳定期和晚期稳定期的ClfB表达。通道1、通道2和通道3显示了在TSB中生长的菌株8325-4在指数生长早期、稳定生长早期和稳定生长晚期的ClfB表达。
图3
图3。金黄色葡萄球菌在不同生长阶段对重组细胞角蛋白10的粘附
数据代表三个独立的实验。条形图表示标准偏差。（A） 指数生长期细菌细胞对rMK10的粘附。菌株8325–4在RPMI或TSB中生长到指数阶段，其结合rMK10的能力与在RPMI中生长的DU5997进行了比较。（B） 生长静止期细菌细胞对rMK10的粘附。将菌株8325–4在RPMI或TSB中生长到固定相，并将其结合rMK10的能力与在RPMI中生长的DU5997进行比较。
图4
图4。野生型菌株与突变菌株在鼻子中的存活率
（A） 8325–4株金黄色葡萄球菌的Kaplan-Meier生存曲线（实线）及其相关性研究ClfB公司−人类鼻子中的突变株（DU5997）（虚线）（两个鼻孔中最后培养的菌株）。突变株的所有细胞在14天后被清除，这明显快于8325-4株金黄色葡萄球菌的清除率。（B） 8325–4株金黄色葡萄球菌（WT）的Kaplan-Meier生存曲线和ClfB公司−将突变株（DU5997；虚线）混合接种在一个鼻孔中。（C）后续样本中的cfu数量为8325–4和DU5997。
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