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.2004年7月;92(1):591-9.
doi:10.1152/jn.0057.2004。

使用一类新的右旋糖酐结合指示剂在生理温度下测量突触前钙

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使用一类新的右旋糖酐结合指示剂在生理温度下测量突触前钙

迈克尔·拜尔林等人。 神经生理学杂志. 2004年7月.
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摘要

突触前钙(Ca(pre))因其在触发和调节神经递质释放方面的作用而被广泛研究。尽管钙调节和钙驱动过程可能强烈依赖于温度,但技术上的困难限制了对钙(预)的大多数研究,使其温度远远低于生理范围。在这里,我们评估了膜透性乙酰氧基甲基(AM)指示剂和右旋糖酐结合指示剂在生理温度下测量Ca(pre)的使用。对加载到大鼠小脑切片平行纤维中的这两种类型的指标进行比较,发现了显著的差异。AM指示剂迅速从轴突和突触前终末挤出,因此不能用于高温下的长期测量。相反,右旋糖酐结合指示剂保留在平行纤维中,因此非常适合在生理温度下测量Ca(pre)。可用的葡聚糖指示剂数量有限,促使我们合成了三种新的指示剂,以红色显示峰值发射(575-600 nm)。这些指示剂允许同时使用多个钙指示剂,这些钙指示剂可以根据激发和发射波长、对组织自身荧光相对不敏感的激发和发射波段的使用以及在表达绿色荧光蛋白(GFP)的系统中的测量轻易区分。因此,我们发现右旋糖酐结合指示剂非常适合在生理温度下长期记录Ca(pre),并且新的红色指示剂的开发大大扩展了其用途。

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